Микробиологическая диагностика микоплазма- и уреаплазма-инфекций.

Патологический материал: кровь, мокрота, слизь из носоглотки, выделения и соскоб из уретры, влагалища, шейки матки, осадок мочи, сперма и другие, в зависимости от заболевания.

Микоплазмозы.

1. Бактериологический метод. Наиболее доказательный. Проводят посев на твердые и двухфазные среды, выделение и идентификацию чистых культур. Для посева используют сердечно-мозговой агар, двухфазную среду (селективный агар с налитым поверх него сывороточно-глюкозным бульоном с добавлением пенициллина и ацетата таллия). Признаки роста появляются в промежутке от одной до 7 недель. Ускоряет этот метод идентификация колоний с помощью эпифлуоресценции. Культуры идентифицируются на основе морфологических, культуральных, ферментативных свойств.

2. Экспресс-метод. С помощью РИФ, РНГА, ИФА, агрегат-агглютинации выявляют микоплазмы или их антигены в клиническом материале.

3. Серологическая диагностика. Применяются РСК, ИФА, агрегат-агглютинация, непрямая РИФ для выявления специфических антител в крови больного.

Респираторные микоплазмозы в клинических лабораториях чаще всего диагностируют методами серодиагностики.

4. Полимеразная цепная реакция (ПЛР) - является самым чувствительным методом диагностики микоплазмозов.

Диагностика уреаплазмозов.

1. Бактериологический метод - чаще всего используется на практике.

Проводят посев на жидкие и плотные среды. Учет результатов посева через 24-48 часов по изменению цвета среды при отсутствии помутнения, что связано со способностью U.urealiticum расщеплять мочевину. Метод определения уреазной активности является основным при диагностике уреаплазмозов.

2. Экспресс-метод. Микроскопическое выявление уреаплазм в препаратах спермы при окраске флуорохромом оливомицином.

3. Серологическая диагностика в РСК, непрямой РИФ, РНГА, ИФА, агрегат-агглютинации, но реактивы для этих реакций малодоступны для клинических лабораторий.

Лабораторная диагностика риккетсиозов.

Патологический материал: кровь (источник возбудителя), при Ку-лихорадке - мокрота, моча, спинномозговая жидкость, молоко, мясо животных.

1. Микроскопический метод. Выявление риккетсий в исследуемом материале, в организме зараженных животных, куриных эмбрионах. В организме вшей, блох, клещей. Препараты окрашиваются по Здродовскому, Романовскому-Гимзе.

Выделение возбудителя.

2. Методы культивирования. Риккетсии не размножаются в бесклеточных средах, они являются облигатными внутриклеточными паразитами. Культивируются на куриных эмбрионах, фибробластах куриных эмбрионов, на некоторых культурах клеток (McCoy).

3. Биологическая диагностика. Для диагностики эпидемического сыпного тифа (выделение R.prowazekii) биопроба малоэффективна. Заражение животных имеет диагностическое значение при Ку-лихорадке, эндемическом сыпном тифе (кровью больного инфицируют гвинейских свинок), при лихорадке цуцу-гамуши (инфицируют белых мышей, реже хомяков, хлопковых крыс). Но всевозможные манипуляции с риккетсиями очень опасны, потому выделение возбудителя проводят только при научных исследованиях в специальных режимных лабораториях.

4. Серологическая диагностика - основа современной лабораторной диагностики. Применяют реакцию Вейля-Феликса, агглютинации с риккетсиями, РНГА, РСК, непрямую РИФ (позволяет идентифицировать IgM и IgG, что дает возможность ранней диагностики и определения стадии болезни).

Надежные результаты возможны лишь в конце первой недели заболевания. Кроме определения диагностических титров, необходимо также ориентироваться на нарастание титров антител, что имеет большее эпидемическое значение.

5. Полимеразная цепная реакция разработана для диагностики активных форм эрлихиозов.

Занести в протокол таблицу:

Классификация хламидий

Порядок Chlamydiales
Семейство Chlamydiacea
Род Chlamydia
Виды:
Chlamydia pneumoniae	Chlamydia trachomatis	Chlamydia psittaci

Таблица №1.