61. Инактивированные (убитые) вакцины. Анатоксины. Получение, применение. Достоинства и недостатки. Роль адъювантов.

Инактивированные вакцины в качестве действующего начала включают убитые хи­мическим или физическим методом культу­ры патогенных бактерий или вирусов (цельноклеточные, цельновирионные вакцины) или же извлеченные из патогенных микробов (иногда вакцинных штаммов) комплексы, содержащие в своем составе протективные антигены (субклеточные, субвирионные вак­цины). Для инактивации бактерий и вирусов применяют формальдегид, спирт, фенол или температурное воздействие, ультрафиолето­вое облучение, ионизирующую радиацию.

Для выделения из бактерий и вирусов анти­генных комплексов (гликопротеинов, ЛПС, белков) применяют трихлоруксусную кис­лоту, фенол, ферменты, изоэлектрическое осаждение, ультрацентрифугирование, уль­трафильтрацию, хроматографию и другие фи­зические и химические методы.

Получают инактивированные вакцины путем выращивания на искусственных питательных

средах патогенных бактерий или вирусов, ко­торые затем подвергают инактивации, разру­шению (в случае необходимости), выделению антигенных комплексов, очистке, конструи­рованию в виде жидкого или лиофильно вы­сушенного препарата. В препарат обязательно добавляют консервант, иногда — адъюванты.

Дозируют вакцину в антигенных единицах; применяют, как правило, подкожно, внут­римышечно в виде нескольких инъекций на курс вакцинации.

Анатоксины (токсоиды)

Примером молекулярных вакцин являютсяанатоксины: дифтерийный, столбнячный, ботулинический (типов А, В, Е), гангренозный (перфрингенс, нови и др.), стафилококковый, холерный.

Принцип получения анатоксинов состоит в том, что образующийся при культивировании соответствующих бактерий токсин в молеку­лярном виде превращают в нетоксичную, но сохраняющую специфическую антигенность форму — анатоксин путем воздействия 0,4% формальдегида и тепла (37 °С) в течение 3-4 недель. Полученный анатоксин подвергают очистке и концентрированию физическими и химическими методами для удаления балласт­ных веществ, состоящих из продуктов бактерий и питательной среды, на которой они выращи­вались. К очищенному и концентрированному анатоксину для повышения его иммуноген- ности добавляют адъюванты, обычно сорбен­ты — гели А1(ОН)₃ и А1(Р0₄). Полученные та­ким образом препараты назвали очищенными сорбированными анатоксинами.

Дозируют анатоксины в антигенных еди­ницах: единицах связывания (ЕС) анатоксина специфическим антитоксином или в едини­цах флокуляции (LI). Анатоксины относятся к числу наиболее эффективных профилактичес­ких препаратов. Благодаря иммунизации диф­терийным и столбнячными анатоксинами рез­ко снижена заболеваемость и ликвидированы эпидемии дифтерии и столбняка. Очищенные сорбированные анатоксины применяют под­кожно или внутримышечно по схеме, предус­мотренной календарем прививок.

Адъюванты

Как было сказано выше, для усиления иммуногенности вакцин применяют адъюванты (от лат. adjuvant — помощник). В качестве адъювантов используют минеральные сорбен­ты (гели гидрата окиси и фосфата аммония), полимерные вещества, сложные химические соединения (ЛПС, белково-липополисахаридные комплексы, мурамилдипептид и его производные и др.); бактерии и компоненты бактерий, например вытяжки БЦЖ, из ко­торых готовят адъювант Фрейнда; инакти­вированные коклюшные бактерии, липиды и эмульгаторы (ланолин, арлацел); вещест­ва, вызывающие воспалительную реакцию (сапонин, скипидар). Как видно, все адъю­ванты являются чужеродными для организма веществами, имеют различный химический состав и происхождение; сходство их состоит в том, что все они способны усиливать иммуногенность антигена. Механизм действия адъювантов сложный. Они действуют как на антиген, так и на организм (А. А. Воробьев). Действие на антиген сводится к укрупнению его молекулы (сорбция, химическая связь с полимерным носителем), т. е. превращению растворимых антигенов в корпускулярные. В результате антиген лучше захватывается и активнее представляется фагоцитирующими и другими иммунокомпетентными клетками, т. е. превращается из тимусзависимого в ти- муснезависимый антиген. Кроме того, адъю- ванты вызывают на месте инъекции воспали­тельную реакцию с образованием фиброзной капсулы, в результате чего антиген длительно сохраняется, депонируется на месте инъек­ции и, поступая из «депо», длительное время действует по принципу суммации антигенных раздражений (ревакцинирующий эффект). В связи с этим адъювантные вакцины назы­вают депонированными. Адъюванты также непосредственно активируют пролиферацию клеток Т-, В-, А-систем иммунитета и уси­ливают синтез защитных белков организма. Адъюванты усиливают иммуногенность ан­тигенов в несколько раз, а такие растворимые молекулярные белковые антигены, как диф­терийный, столбнячный, ботулинический анатоксины, — до ста раз

Роль адъювантов:

Применяют для усиления иммуногенности вакцин. Используют минеральные сорбенты(гели фосфата аммония и гидрата окиси),полимерные вещества, бактерии и компоненты бактерий и т.д. Все адъюванты являются чужеродными для организма веществами.Они способны усиливать иммуногенность антигена. Адъюванты действуют как на организм так и на антиген.Действие на антиген сводится к укруплению его молекулы т.е. превращение растворимых антигенов в корпускулярные. В результате антиген лучше захватывается и активнее представляется фагоцитирующими и другими иммунокомпетентными клетками т.е. превращается из тимус зависимого в тимуснезависимый антиген. Кроме того адъюванты вызывают на месте инъекции воспалительную реакцию с образованием фиброзной капсулы в результате чего антиген долго сохраняется депонируется на месте инъекции. Адъюванты также непосредсвенно активируют пролифирацию клеток Т и В, А систем иммунитета и усиливают синтез защитных белков организма