Билет17

1.Гемоглобин, структурная характеристика. Формы и производные гемоглобина.

Гемоглобин в качестве белкового комонента содержит глобин, а небелк – гем. Видовые разичия гемоглобина обусловленны глобином, а гем везде одинаков. Основу структуры простетической группы большинства гемосодержащих белков состав порфиновое кольцо, являющееся в свою очередь производным тетрапиррольного соединения – порфина. В зависимости от хим природы групп, находящихся в боковой цепи, порфины делятся на зтио-, мезо-, копро- и протопорфирины. Самый распространенный - протопорфирин 10.

ПРОИЗВОДНЫЕ гемоглобина. К основному гамоглобину НвА1(98%) в крови взрослого чел-ка доказано существование гемоглобина НвА2(2%), также состоящего из 2 – L-цепей и 2 – В-цепей. На долю НвА2 приходится 2,5% от всего гемоглобина. Известен также фетальный гемоглобин – новорожденных – НвF, и состоящий из 2 цепей: L и У. Он отличается от НвА1 составом аминокислот и физ-хим свойствами. Кровь новорожденного содержит 80%, взрослого 1,5%.

2.Липопротеиды сыворотки крови, строение, методы фракционирования,

Липопротеи́ны (липопротеиды) — класс сложных белков, простетическая группа которых представлена каким-либо липидом. Так, в составе липопротеинов могут быть свободные жирные кислоты, нейтральные жиры, фосфолипиды, холестериды

В ранних программных исследованиях липидов электрофорез липопротеинов проводили на бумаге. Липопротеины обычно классифицируют по плотности, однако известна другая классификация (старая), основанная на нахождении липопротеинов на бумаге после электрофореза.

Гамма

Бета

Альфа

0-40% 35-50% 15-30%

Электрофорез в ПААГ. Разделение ЛП сыворотки крови проводят в стеклянных трубках. В специальном штативе строго вертикально установленные трубки заполняют гелем с помощью шприца с длинной иглой. Исследуемый образец сыворотки готовят на том же буфере, он имеет то же значение pH, что и раствор концентрирующего геля. Чтобы предотвратить смешивание раствора сыворотки крови с верхнем "электродным" буфером, плотность исследуемой сыворотки повышают, добавляя в нее сахарозу. Пробы предварительно окрашивают насыщенным раствором судана черного В в этиловом спирте. Пробы оставляют на 1 час при комнатной температуре в темноте, после чего 0,03 - 0,05 мл окрашенной пробы используют для разделения ЛП. Образуются следующие фракции: хиломикроны (гамма) -> ЛПОНП -> ЛПНП (бета) -> ЛПВП (альфа)->ЛПОВП (альбумины+1% своб.жир.кислот) Ультрацентрифугирование (используются их различия по плотности). Центрифугирование применяется для разделения неоднородных жидких сред. Центрифугирование позволяет разделить смесь, состоящую из двух или более компонентов с разной удельной плотностью, если по крайней мере один из этих компонентов — жидкость. Разделение веществ с помощью центрифугирования основано на разном поведении частиц в центробежном поле. В центробежном поле частицы, имеющие разную плотность, форму или размеры, осаждаются с разной скоростью. Образуются следующие фракции: хиломикроны (гамма) -> ЛПОНП -> ЛПНП (бета) -> ЛПВП (альфа)->ЛПОВП (альбумины+1% своб.жир.кислот)