Для получения наиболее точного результата бактериологического исследования:

При остром сепсисе необходимо исследовать 2-3 образца крови, взятых раздельными венопункциями с интервалом 30 минут.

При подостром течении берут 3 образца крови с интервалом 15-20 минут в 1-ый день и через 24 часа еще 3 посева.

Если небходимо исследовать кровь на фоне антибиотикотерапии, то проводят по 2 посева в сутки 3 дня подряд.

При лихорадке неясного генеза кровь необходимо брать 2 раза в течение 1 часа, затем по той же схеме через 24 и 36 часов.

Посев исследуемого материала. Рекомендуется производить посев крови на несколько питательных сред, чтобы обеспечить возможность роста максимально большему числу возможных возбудителей. Минимально следует использовать две среды: «двойную среду» и «среду для контроля стерильности».

Питательные среды для первичного посева:

1. «Двойная среда», состоящая из скошенного во флаконе 150 мл питательного агара и 150 мл полужидкой среды, приготовленной на питательном бульоне с добавлением 15 г глюкозы и 0,15 г агара. Кровь засевают в жидкую часть среды. Инкубируют в термостате при 37 ^°С. Флаконы ежедневно просматривают, при этом, наклоняя флакон смачивают поверхность скошенного агара бульоном. Это исключает необходимость высева на плотные питательные среды и, следовательно, уменьшает риск загрязнения при пересевах.

2. «Среда для контроля стерильности». Эту среду следует обогатить, добавив дрожжевой экстракт до 20 г на 1 литр (не менее 15 г) и агар до 5 г на 1 литр (не менее 4,25 г). Добавляют к среде 0,001 г резазурина — индикатора кислорода. Анаэробные условия контролируют по розовому окрашиванию среды. При покраснении более 20% столбика среды можно ее регенерировать на водяной бане в течение 20 минут при 100°C. Однако, эту операцию можно производить только один раз. Среда дает возможность получить рост некоторых анаэробных и полуанаэробных микроорганизмов.

3. «Среда со стаканчиком» - для предварительного лизиса форменных элементов крови. Для приготовления этой среды во флаконы с широким горлом (диаметром 30 мм), емкостью 250 мл наливают 50 мл дистиллированной воды, содержащей 0,1% агара. В этот флакон пинцетом опускают стеклянный стаканчик или пробирку длиной 70 мм и диаметром 20-22 мм, в которой находится 12 мл концентрированной питательной среды: (состав: на 100 мл перевара Хоттингера с остаточным азотом 750—800 мг%, 2 г глюкозы, 2 г хлористого натрия, рН 7,5—7,4). Стерилизуют 30 минут при 0,5 атм. Для получения гемокультуры в «среде со стаканчиком» в агаризованную воду помещают 3—5 мл крови. Оставляют флакон при комнатной температуре на 30—40 минут для гемолиза форменных элементов крови. Затем, наклоняя флакон, выливают содержимое стаканчика в водный раствор с кровью, флакон ставят в термостат. Посев гемолизированной крови позволяет выявить бактериемию в ряде случаев, тогда, когда на других средах роста нет. Высвобождение микроорганизмов, адсорбированных на эритроцитах или подвергшихся незавершенному фагоцитозу, а также снижение антибактериальной активности гемолизированной крови, делает эту среду особенно ценной при заболевании, для которого характерна незавершенность фагоцитарной реакции.

4. Полужидкая среда Китта-Тароцци с 0,5% глюкозы и 0,1% агара во флаконах по 300 или 150 мл. Во флаконы сеют 5 мл и 3 мл крови (соответственно количеству среды).

5. Жидкая среда Сабуро служит для выявления грибковых септических состояний.

Приготовление: на 1 литр дистиллированной воды берут 10 г пептона, 25 г хлористого натрия, 40 г глюкозы. Разливают во флаконы по 150—200 мл, стерилизуют при 0,5 атм. 20 минут (рН 5.5).В жидкую среду Сабуро засевают 3—4 мл крови.