- •Методические рекомендации для студентов по подготовке к лабораторным работам Лабораторная работа № 1
- •Микробиологическая лаборатория
- •2. Подготовка микробиологической лаборатории к работе
- •Правила работы в микробиологической лаборатории
- •Ведение лабораторных записей
- •Аппараты, приборы, посуда и инвентарь
- •Основные принципы метода электронной микроскопии
- •I. Основные принципы метода электронной микроскопии
- •Различные приемы подготовки к исследованию
- •Электронный микроскоп высокого напряжения
- •Задания для выполнения Задание 1. Ознакомиться с внешним видом и ультраструктурой эукариотных клеток.
- •2. Рассмотрите электронную микрофотографию клеточной стенки растительной клетки (рис.2).Обратите внимание на наличие различных слоев, а также каналоподобных структур в клеточной стенке растений.
- •Задание 2. Ознакомиться с внешним видом и особенностями ультраструктуры прокариотных клеток.
- •Лабораторная работа № 3 изучение морфологии и биологии возбудителей молочнокислого брожения
- •1. Некоторые сведения о морфологии бактерий
- •Краткая характеристика молочнокислых бактерий
- •2. Практическое использование молочнокислых бактерий
- •Ход работы
- •1. Приготовление препарата молочнокислых бактерий
- •2. Определение кислотности молока
- •Лабораторная работа №4 изучение морфологии и биологии возбудителей спиртового брожения. Дрожжи как основной объект биотехнологии.
- •Морфологические признаки дрожжей
- •Культуральные признаки дрожжей
- •Ход работы:
- •Лабораторная работа №5 изучение строения и биологии плесневых грибов как объекта биотехнологии
- •1.1. Систематика грибов:
- •Высшие грибы.
- •Низшие грибы.
- •2 Приготовление препаратов плесневых грибов и их изучение.
- •Ход работы
- •Задание
- •Лабораторная работа №6 биология бактерий р.Clostridium как важнейшего продуцента биотехнологии
- •1. Понятие о маслянокислом брожении
- •2. Культуральные и морфологические признаки клостридиев
- •3. Роль в природе
- •4. Использование клостридиев в биотехнологии
- •5. Ход работы
- •1. Выращивание маслянокислых микроорганизмов
- •2. Микроскопирование маслянокислых микроорганизмов.
- •3. Качественные реакции на масляную кислоту.
- •3.1. Получение маслянокислого железа
- •3.2. Получение масляноэтилового эфира
- •Лабораторная работа №7 изучение строения и биологии актиномицетов как объекта биотехнологии
- •Ход работы
- •Лабораторная работа №8 биология водорослей как объекта биотехнологии
- •Основные признаки и систематика водорослей.
- •Краткая характеристика основных групп (отделов) водорослей и их отдельных представителей.
- •Практическое использование водорослей.
- •IV. Задание для выполнения
- •Лабораторная работа № 9
- •Ход работы
2. Практическое использование молочнокислых бактерий
Наиболее важным в техническом отношении представителями гомоферментативных молочнокислых бактерий являются следующие:
Молочнокислый стрептококк (Streptoccocus lactis) - кокки, соединенные попарно или короткими цепочками. Это мезофилы, лучше всего развивающиеся при t=30-350С; в этих условиях молоко свертывается через 10-12 ч. В среде они накапливают до 1% кислоты. Минимальная температура их развития 100С, максимальная - 40-450С. Некоторые расы образуют антибиотик низин. Молочнокислый стрептококк широко используют для изготовления разнообразных кисломолочных продуктов, кислосливочного масла, сыров. При свертывании молока образуется ровный, плотный сгусток.
Болгарская палочка (Lactobacillus bulgaricus) - крупные палочки (иногда зернистые), часто образующие длинные цепочки. Не сбраживают сахарозу. Болгарская палочка - термофильная бактерия, оптимальная, оптимальная температура развития 40-450С. Это сильный кислотообразователь, накапливающий в молоке 2.5-3.5% молочной кислоты. Используется при изготовлении южной простокваши, кумыса.
Из гетероферментных молочнокислых бактерий следует отметить следующие виды.
Lactobacillus brevis - возбудитель брожения, протекающего при квашении капусты и огурцов. При сбраживании сахаров образует молочную (до 1.2%) и уксусную кислоты, этиловый спирт и углекислый газ. Способна образовывать ароматические вещества, придающие сквашиваемому продукту приятные вкус и аромат.
Ход работы
1. Приготовление препарата молочнокислых бактерий
Оборудование и материалы: Кефир (йогурт), предметное стекло, кристаллизатор, матрасик, капельницы с метиленовым синим и со смесью спирта с эфиром, микроскоп, фильтровальная бумага, метиленовый синий, спирт+эфир , бактериологическая петля.
Для микроскопического исследования за молочнокислых бактерий готовят препарат из скисшего молока. Бактериологическую петлю вносят в сгусток и, повернув ее вокруг оси, извлекают, прикоснувшись ею и к пленке. Сгусток размазывают на предметном стекле очень тонким слоем без воды. Сушат на воздухе. Фиксируют смесью спирта с эфиром (1:1), несколько раз нанося на мазок смесь и сливая ее. При такой фиксации погибают и прикрепляются к стеклу бактерии, и параллельно эфиром удаляется жир. Последнее необходимо, т.к. капли жира на препарате мешают окраске и микроскопированию.
Фиксированный препарат окрашивают, заливая метиленовым синим на 2-3 минуты, промывают водой, высушивают и микроскопируют при большом увеличении.
Под микроскопом на препаратах видно преобладание мелких округлых клеток - Streptococcus lactis, соединенных в короткие цепочки ( см. приложение, рис.1). Этот микроорганизм - возбудитель естественного скисания молока в наших широтах. Оптимальная температура для его развития - 30оС. В результате жизнедеятельности молочнокислого стрептококка накапливается до 1% молочной кислоты.
Нередко на препарате видны тонкие палочки рода L.bulgaricus разных размеров. Чаще всего встречаются так называемая болгарская палочка - возбудитель естественного скисания молока в южных широтах. Оптимальная температура для нее - 40оС. Этот микроорганизм кислотоустойчив, накапливает до 3.5% молочной кислоты.
Если на поверхности прокисшего молока появилась пленка, то в мазке обнаруживается также и молочная плесень. Четырехугольные или овальные клетки ее отличаются от клеток молочнокислых бактерий большими размерами.
Задание: Зарисуйте и опишите обнаруженные вами в мазке формы микроорганизмов. Постарайтесь определить род, к которому они относятся. Обнаружили ли вы наличие плесени? Дрожжей?