6. Витамин р (на примере рутина)
К веществам Р-витаминного действия относится ряд соединений фенольной природы, основное физиологическое действие которых – уменьшение проницаемости и повышение прочности капилляров. Они способствуют усвояемости вит.С в организме человека и животных, активно участвуют в окислительно-восстановительных процессах, обладают антиокислительными свойствами, залерживая, среди прочего, и окисление адреналина. Они также инактивируют фермент гиалуронидазу, тем самым тормозя распад гиалуроновой кислоты – гетерополисахарида в основном веществе соединительных тканей. Вит. Р угнетают активность холинэстеразы, сукцинатдегидрогеназы и ряда других ферментов.
Витаминными свойствами обладает ряд флавонолов (рутин, кверцетин), флаванонов, катехинов, кумаринов, галловая кислота и ее производные, антоцианы (красящие вещества из плодов, ягод, цветков).
Многие вещества Р-витаминного действия – это гликозиды флавонолов и флаванонов или агликоны (неуглеводные компоненты гликозидов). Например, рутин – это гликозид, в котором к дисахариду рутинозе присоединен агликон фенольного строения флавонол кверцетин.
а) с хлорным железом
Насыщенный водный р-р рутина |
1 -2 мл |
|
1%-ный р-р FeCl3 или FeCl3 · 6 Н2О |
5 капель |
Принцип: Появление зеленого окрашивания из-за образования комплекса
|
б) с серной кислотой
Принцип: Конц серная к-та образует с флавонами (рутином) оксониевые соли, обладающие в растворе желтой окраской. Флаваноны (например, гесперидин) дают с серной к-той малиновое окрашивание.
Насыщенный водный р-р рутина |
1 -2 мл |
|
ОСТОРОЖНО ПО СТЕНКЕ конц. Н2SО4 |
1 мл |
Содержимое пробирки окрашивается в желтый цвет или на границе жидкостей – желто-коричневое кольцо.
|
7. Витамин с
а) качественно - с K3Fe(CN)6
Принцип метода: восстановление феррицианида калия витамином С с изменением окраски до синей из-за образования берлинской лазури.
Ход работы. В двух пробирках смешивают 5 капель 5%-го раствора К3Fe(CN)6 c 5 каплями 1%-го раствора FeCl3. В одну из пробирок к зеленовато-бурой жидкости прибавляют 20 капель 1%-го раствора аскорбиновой кислоты или сока капусты, а в другую - столько же дистиллированной воды. Жидкость в первой пробирке приобретает зеленовато-синюю окраску, выпадает синий осадок берлинской лазури; во второй пробирке (контроль) зеленовато-бурая окраска жидкости остается без изменения.
Б) количественно – в плодах и овощах с краской Тильманса (по методичке Малого практикума).
ЖИРОРАСТВОРИМЫЕ ВИТАМИНЫ
8. Витамин А (из рыбьего жира или ретинола ацетата) Реагирует только СВЕЖИЙ витамин.
а) с серной кислотой (реакция Друммонда)
Принцип метода. При добавлении концентрированной.серной кислоты к хлороформенной эмульсии рыбьего жира образуется сине-фиолетовое окрашивание, переходящее в красно-бурое. Возникновение окраски связано с водоотнимающим действием реактива
Ход определения.(вит.А) ПОД ТЯГОЙ! На часовое стекло вносят 1 каплю рыбьего жира и 10 капель хлороформа, перемешивают палочкой и добавляют 1 каплю концентрированной серной кислоты.
9. Витамин D (из рыбьего жира)
Витамин D3 образуется из провитамина 7-дегидрохолестерина, содержащегося в подкожной жировой клетчатке, при облучении УФ-лучами.
Витамин D2 образуется из эргостерина (выступающего как провитамин) при облучении УФ-лучами. Эргостерин – соединение, характерное для грибов. Значительные количества эргостерина найдены в дрожжах и спорынье.
а) анилиновая проба
Принцип метода. При нагревании рыбьего жира, содержащего витамин D, со смесью анилина и концентрированной HCl, раствор приобретает красную окраску.
Ход работы. В сухую маленькую пробирку вносят 200 мкл рыбьего жира, 1 мл анилина, встряхивают и добавляют 100 мкл HCl конц. Нагревают до кипения и кипятят 20 с. При нагревании желтая эмульсия принимает красную окраску. Можно выполнять на часовом стекле, соответственно уменьшив количества реактивов.