Радиоиммунный анализ (рит-риа)

№

Шаги проведения

Баллы

1

Специфицеский антиген адсорбируют в лунках полистиролового планшета.

25

2

Инкубируют с испытуемыми сыворотками человека.

25

3

Отмывают несвязавшиеся иммуноглобулины.

5

4

Связавшиеся иммуноглобулины выявляют с помощью антиглобулиновой (человеческой) сыворотки, отмеченными радиоактивными изотопами (J 125).

25

5

При соответствии антигена и антитела образуется комплексы, количество которых устанавливается с помощью гамма или В – счетчиков.

20

ИТОГО:

100

№

Шаги проведения

Баллы

1

При прямом методе готовится препарат, содержащий исследуемые микроорганизмы (АГ).

15

2

Фиксируют его жидким фиксатором (ацетоном).

15

3

Обрабатывают специфической люминесцирующей сывороткой (ацетон).

15

4

Отмывают избыток сыворотки.

10

5

Высушивают препарат и рассматривают в люминесцентном микроскопе.

10

6

При положительной реакции наблюдаются свечение антигена.

10

7

Это реакция позволяет за 1-2 часа обнаружить микробные антигены.

10

8

Метод прост и высокоспецифичен , но требует большого набора различных люминесцирующих сывороток.

15

ИТОГО:

100

№

Шаги проведения

Баллы

1

При непрямом методе готовится препарат, содержащий исследуемые микроорганизмы (АГ).

15

2

Фиксируют его жидким фиксатором.

15

3

Обрабатывают кроличьей специфической сывороткой.

15

4

Промывают препарат.

10

5

Обрабатывают люминесцирующей антиглобулиновой сывороткой против глобулинов кролика.

10

6

Снова промывают.

10

7

Высушивают препарат и рассматривают в люминесцентном микроскопе.

10

8

При положительной реакции наблюдаются свечение комплекса антиген+антитело.

15

ИТОГО:

100

№

Шаги проведения

1

ПЦР – это молекулярно – биологический метод диагностики.

2

Суть ПЦР состоит в циклическом удвоении определенного участка ДНК с помощью специфических праймеров (затравок) особых ферментов – полимераз.

3

В результате увеличения ДНК образуется достаточное ее количество, чтобы можно было выявить физико-химическими методами хроматографией или электрофорезом.

4

Праймеры получают из известных геномов возбудителей.

5

Обязательным условием проведения ПЦР является знание нуклеотидной последовательности объекта исследования (бактерии, вирусов и т.д.)

6

Исследуемую ДНК собирают в пробирке вместе с необходимыми компонентами и прогревают

7

При этом комлементарные нити ДНК разъединяются. Этот этап называется денатурацией ДНК.

8

К образовавшимся одноцепочечным ДНК присоединяют праймеры.

Этот этап называется «отжигом» (присоединением)

9

Фермент полимераза достраивает комплементарные цепи ДНК. Этот этап называется «элонгация» (удлинение).

10

Как правило, проводится 30 циклов, что позволяет получить 2і° копий участка ДНК возбудителя.