3 Подготовка проб

3.1 Отбор пищевых образцов для исследования осуществляется в соответствии с требованиями ГОСТ 9792

3.1.2 Отобранные образцы продуктов герметично упаковывают в полиэтиленовые мешки, стеклянные банки с притертыми крышками, маркируют и нумеруют. Образцы доставляют в лабораторию для анализа сразу же после отбора проб. В случае необходимости допускается хранить при температуре 4 + 2°С в течение времени не более срока годности пищевых продуктов или замораживать до температуры минус 10 - 12°С и хранить не более 2 недель.

3.1.3 К исследованию скоропортящихся образцов следует приступать в день их доставки в лабораторию.

4 Аппаратура, материалы и реактивы

4.1 Аппаратура

Фотометр планшетный вертикального сканирования,с фильтрами соответствующими длине волны 450 нм

39

(Проект)

Аквадистиллятор ГОСТ 6709

Холодильник бытовой электрический ГОСТ 16317

Часы механические сигнальные ГОСТ 3145

Весы аналитические 120 г/0,001 мг ГОСТ Р 54071

Весы лабораторные общего назначения, 2класса точности, до 200 г/0,1 г ГОСТ 14004 Центрифуга настольная с эффективностью не менее 4000 g [1] ТУ 5.375-4261

Насос (компрессор) мембранный ГОСТ 15150

Аппарат универсальный для встряхивания ТУ 64-1-2451-78 [2]

Шкаф (стол) лабораторный с вытяжным устройством ГОСТ 23308

Шейкер лабораторный для пробирок ГОСТ 9147

4.2 Материалы

Дозаторы пипеточные автоматические с переменным объемом 0,02 - 0,2 см3, 0,1 см3 одноканальные

Дозаторы пипеточные автоматические восьмиканальные с переменным объемом 0,05- 0,3 см3

Наконечники для автоматических пипеток объемом до 0,30 см3 и до 1,00 см3 однократного применения

Стаканы химические и колбы мерные вместимостью 25, 50, 200 и 500 см3 ГОСТ 1770

Цилиндры мерные вместимостью 25 см3 ГОСТ 1770

4. 3 Реактивы

Набор реагентов для количественного определения тетрациклина типа "Ридаскрин Тетрациклин"

Дигидрофосфат натрия водный ГОСТ 4172

Гидрофосфат натрия ГОСТ 11773

Гидрофосфат натрия двухводный ГОСТ 245

Хлорид натрия ГОСТ 4233

Гидрооксид натрия ГОСТ 2263

Моногидрат лимонной кислоты ГОСТ 3652

40

(Проект)

Щавелевая кислота ГОСТ 22180

ЭДТА-натриевая соль ГОСТ 29263

Метанол* или этанол 95,0% ГОСТ Р 50469 или ГОСТ 2222

Этилацетат ГОСТ 8981

н-гексан ТУ 6-09-3375-78 [3]

Ацетонитрил ТУ 6-09-06-1092-83 [4]

Дистиллированная вода ГОСТ 6709

5 Принцип метода иммуноферментного анализа

Базовым принципом для количественного определения антибиотиков тетрациклиновой группы в пищевых продуктах является твердофазный конкурентный иммуноферментный анализ на полистироловых планшетах. Метод основан на конкуренции свободного антибиотика из исследуемых образцов и антибиотика, предварительно адсорбированного на твердой фазе (лунке планшета) в составе белкового конъюгата, за центры связывания специфичных к тетрациклинам антител во вносимом растворе. После отделения не связавшихся реагентов количество антител, прореагировавших с иммобилизованным антигеном, определяют с помощью вторичных антивидовых антител, меченных пероксидазой хрена. Количество связавшегося с антителами конъюгата вторичных антител определяют с помощью субстрат - хромогенной смеси. При этом количество определяемого антибиотика, содержащегося в исследуемом образце, обратно пропорционально регистрируемой оптической плотности продукта ферментативной реакции.