6)Методы изучения состава биополимеров. Электрофорез и электроосмос. Уравнение Гельмгольца-Смолуховского. Применение электрофоретических методов в медицине.

 Методы исследования биополимеров. При исследовании строения и конформационных превращений биополимеров широко используются как очищенные природные биополимеры, так и их синтетические модели, которые проще по строению и легче поддаются исследованию. Так, при изучении белков моделями служат гомогенные или гетерогенные полипептиды (с заданным или случайным чередованием аминокислотных остатков). Моделями ДНК и РНК являются соответствующие синтетические гомогенные или гетерогенные полинуклеотиды.

Электрофорез белков — способ разделения смеси белков на фракции или индивидуальные белки. Электрофорез белков применяют как для анализа компонентов смеси белков, так и для получения гомогенного белка. Наиболее распространенным вариантом электрофоретического анализа белков, является электрофорез белков в полиакриламидном геле по Лэммли.

Варианты метода электрофореза белковСуществует множество разновидностей и модификаций данного метода, которые используются (или использовались в определённые периоды развития биохимии) в различных областях:

• Электрофорез в свободных средах (без поддерживающей среды)

  • Электрофорез с подвижной границей

  • Зональный электрофорез без поддерживающей среды

  • Электрофорез белков в агарозном геле

Электрофорез белков подразделяется также на одномерный и двумерный (2D-) электрофорез, препаративный и аналитический, а также электрофорез нативных белков и электрофорез в присутствии детергента (в денатурирующих условиях).

Электроосмос– перенос жидкости по отношению к граничащей с ней неподвижной твердой поверхностью при приложении ЭДС (электродвижущей силы). Электроосмос возможен только в системах с твердой дисперсной фазой.

Скорость движения частиц дисперсной фазы при электрофорезе U связана с величиной ζ-потенциала уравнением Гельмгольца-Смолуховского(К – постоянная, зависящая от формы частиц дисперсной фазы; для сферических частиц К = 6):

Для клинического исследования белковых фракций крови и других биологических жидкостей человека наиболее широкое распространение получил электрофорез на бумаге. Используя специальные окраски на белки, мукополисахариды и липиды, можно анализировать распределение белков, муко- и липопротеидов [см. Белки, Кровь (белки), Липопротеиды, Мукопротеиды]. Изменения белковых фракций, выявленные методом электрофореза, характеризуются уменьшением или увеличением одной или нескольких фракций за счет белка или связанных с ним мукополисахаридов или липидов. Могут появляться фракции, не свойственные исследуемой жидкости в нормальных условиях.

7.Диализ извлечение из золей НМВ чистым растворителем с помощью полупроницаемой перегородки ,через которую не проходят коллоидные частицы.Растворитель постоянно или периодически меняется,след.удаляютсяпримеси.Недостаток метода в большей длительности процесса.

Электродиализ- процесс диализа ,ускоренный путем применения электр.тока.

Используют прибор электродиализатор.очистка идет быстро

--Компенсационный диализ- вместо чистого растворителя используют растворы определяемых НМВ разной концентрации.