5. Репродуктивная токсичность

Исследования по репродуктивной токсичности включают проверку влияния данного вещества на мужскую и женскую плодовитость и общую способность к продолжению рода, на внутри- и послеутробное развитие, а также выяснение наличия у него тератогенных свойств.

Под тератогенностью вещества понимают его способность вызывать появление уродств у эмбрионов. Тератогены принципиально недопустимы в качестве вспомогательных веществ в пищевых технологиях и добавок в продуктах питания. В то же время некоторые природные составляющие пищевых продуктов (например, спирт) обладают значительной тератогенностью, а вызываемая спиртом алкогольэмбриопатия считается серьёзной токсикологической проблемой.

Для проверки на тератогенность беременным животным дают тестируемое вещество в критических фазах эмбрионального развития. Определяют, в частности, число имплантаций эмбрионов, число их ранних и поздних рассасывании, число живых и мёртвых зародышей, положение и распределение зародышей в маточных трубах, массу приплода, уродства скелета и органов.

В процессе эмбрионального развития различные органы в разное время и в разной степени восприимчивы к тератогенным факторам. Поэтому при изучении тератогенеза важную роль играет время экспозиции.

К настоящему времени очень хорошо описано тератогенное действие талидомида («контерган-катастрофа»¹²), спирта и диэтилстильбэстрола, который занимает особое место в трансплацентарном индицировании опухолей. Имеются указания на тератогенность антагонистов фолиевой кислоты (аминоптерин) и синтетических прогестинов [7].

 

6. Подострая токсичность13

Испытания на подострую токсичность имеют обычно продолжительность 28 дней и представляют собой промежуточное звено между исследованиями острой (однократное введение вещества и наблюдение в течение 1-2 недель) и субхронической токсичности (ежедневное введение вещества в течение 90 дней и более, см. 7 гл. З). Путём многократного (обычно

3-кратного) введения вещества за сравнительно короткое время в этих испытаниях пытаются обнаружить возможное кумулятивное токсическое действие тестируемого вещества или его метаболитов. В рамках этих же исследований выясняют, происходит ли адаптация организма к испытуемому веществу и не проявляют ли какие-либо конкретные органы особой чувствительности к нему. Эго можно определить, например, измерением активности различных ферментов печени.

 

7. Субхроническая токсичность

При исследовании субхронической токсичности испытуемое вещество скармливают в течение 3-6 месяцев (т.е. в течение срока, составляющего приблизительно 10% продолжительности жизни подопытных животных). Для опытов используют обычно грызунов (крыс, мышей или хомяков) и другие виды животных (собак или свиней). Чтобы иметь возможность обнаружить различия действия в зависимости от пола, включают » опыт равное число мужских и женских особей. Необходимо использовать достаточно большое число животных, чтобы можно было сделать статистическую оценку. В опытах участвует и некоторое количество контрольных животных, которых содержат в тех же условиях, что и подопытных, но им не скармливают исследуемое вещество. Проверяемое вещество применяют в нескольких дозах (не менее трёх). Наивысшая из них должна находиться в области, в которой несомненно можно ожидать токсического действия. Таким образом узнают, какие органы подвержены воздействию испытуемого вещества. В дальнейших опытах уделяют им особое внимание.

Опыты по субхронической токсичности включают исследования живых животных и их трупов (по окончании опыта).

У живых животных наблюдают и изучают внешние параметры, такие, как поведение, изменение массы тела, потребление пищи и воды. Проверяют внешний вид и состав мочи и фекалий, наличие в них нефизиологических веществ и других отклонений от нормы. Проводят клинико-биохимические исследования крови и её сыворотки, которые дают информацию о выполнении органами важнейших функций. По окончании опыта животных забивают. Определяют массу главных внутренних органов и затем подвергают их макроскопическому и гистологическому исследованию. Особое внимание обращают на печень и почки, поскольку именно их функции связаны в первую очередь с обменом веществ и секрецией. Часто они реагируют на скармливание повышенных доз определённых веществ небольшим и обратимым увеличением, не сопровождающимся гистологическими изменениями. Это увеличение может быть объяснено биологической реакцией на стрессовую ситуацию.

Для исследования субхронической токсичности доза тестируемого вещества должна быть выбрана так, чтобы, с одной стороны, токсическое действие было явно заметно, с другой - подопытные животные остались живы. Испытания на субхроническую токсичность, наряду с уже упомянутыми целями (выяснение возможности адаптации к исследуемому веществу, накопления его в организме животного, «обратимости» причиняемого им вреда; определение «целевых органов»), служат и для оценки диапазона доз и способа введения вещества в организм при изучении хронической токсичности (см. 8 гл. 3).