9. Консистенция ( маслянистая, тестообразная, вязкая, пленчатая).

Устанавливают прикосновением к колонии микробиологической петлей.

Занятие 6 Работа 1.Количественный учет бактерий в воде

Степень загрязненности водоемов органическими веществами и наличие в них микроорганизмов соответствуют определенным зонам сапробности. Различают три зоны: Олигосапробная зона - содержит небольшое количество органических веществ и мало бактерий – от 10 до 1000 в 1 мл воды.

1. Мезосапробная зона - зона более загрязненной воды, где происходит распад белков и углеводов. Количество бактерий достигает 100 000 в 1 мл воды.

2. Полисапробная зона - зона сильнейшего загрязнения, где резко выражены гнилостные процессы анаэробного типа. Число бактерий доходит до 1 000 000 в 1 мл воды.

Санитарными показателями питьевой воды служат коли-титр и коли-индекс. Коли-титром называется наименьший объем воды в миллитрах, содержащий одну клетку кишечной палочки. Коли-индекс показывает количество кишечных палочек, содержащихся в 1 литре воды. Для водопроводной воды коли-титр должен быть не менее 300 мл, а коли-индекс не более 2-3 клеток в 1 литре.

Количественный учет бактерий в воде дает возможность определить ее чистоту.

Задание:

1. Сравнить количество бактерий в водопроводной, аквариумной и озерной воде.

2. Определить к какой зоне сапробности относится аквариумная и озерная вода?

3. Определить коли-титр и коли-индекс водопроводной воды. Соответствует водопроводной вода санитарно бактериологическим показателям?

Дата закладки -

Ход работы:

Для количественного учета бактерий в воде воду из водопровода используют без разведения.

1. Воду открытых водоемов необходимо разводить 1:100. Схема разведения воды :

колба с водой пробирка № 1 пробирка № 2 чашка Петри с МПА для исследования с 9 мл стер. воды с 9 мл стер. воды

1:10 1:100

• Стерильной пипеткой из колбы взять 1 мл исследуемой воды и внести в пробирку № 1 с 9 мл стерильной воды (разведение будет 1:10). Воду перемешать.

• Другой стерильной пипеткой из пробирки № 1 взять1 мл воды и внести в пробирку № 2 с 9 мл стерильной воды (разведение будет 1:100). Воду перемешать.

• Новой стерильной пипеткой из пробирки № 2 взять 0,2 мл воды и вылить ее на поверхность агаровой пластинки в чашку Петри.

• После впитывания воды в пластинку, чашку подписать и поставить в термостат при t = 25⁰С крышкой вниз на 2-3 суток.

Ход работы:

Дата снятия -

1. Произвести подсчет колоний, развившихся в чашке Петри. Полученные данные занести в таблицу, сделать вывод.

Результаты и обсуждение:

Источник воды	Количество м/организмов в 1 мл воды
Водопроводная Озерная Аквариумная

Вывод:

Занятие 7

Работа 1. Выделение количественный учет микроорганизмов почвы на твердых питательных средах.

Количество микроорганизмов в почве определяют методом посева почвенной суспензии на поверхность твердой питательной среды.

Учет количества микроорганизмов проводят по числу развившихся колоний, учитывая, что одна микробная клетка дает начало одной колонии. Метод позволяет учесть только микроорганизмы, способные развиваться на данной питательной среде, результаты же общей численности микроорганизмов получаются заниженными.

Задание:

4. Выделить и сравнить количество микроорганизмов в генетических горизонтах почвы подзолистого типа. (А₀ - А₂ - В - С)

Дата закладки -

Ход работы:

Приготовление почвенной суспензии.

Отвесить 10г почвы, предварительно растертой в ступке.

Перенести в колбу с 90 мл стерильной воды.

Почвенную суcпензию а колбе встряхивают в течение 5 минут.

Почвенную суcпензию необходимо развести 1:1000000.

Схема приготовления разведений.

колба с почвенной суспензией пробирка № 1 пробирка № 2

с 9 мл стер. воды с 9 мл стер. воды

пробирка №3 пробирка №4 пробирка №5 чашка Петри с МПА с 9 мл стер. воды с 9 мл стер. воды с 9 мл стер. воды

• Стерильной пипеткой из колбы взять 1 мл почвенной суспензии и внести в пробирку № 1 с 9 мл стерильной воды (разведение будет 1:10). Почвенную суcпензию перемешать встряхиванием.

• Другой стерильной пипеткой из пробирки № 1 взять1 мл почвенной суспензии и внести в пробирку № 2 с 9 мл стерильной воды (разведение будет 1:100). Почвенную суcпензию перемешать встряхиванием.

• Подобным образом готовят ряд последующих разведений.

• Новой стерильной пипеткой из пробирки № 5 взять 1мл воды и вылить ее на поверхность агаровой пластинки в чашку Петри (повторность- трехкратная).

• После впитывания воды в пластинку, чашку подписать и поставить в термостат при t = 25⁰С крышкой вниз на 2-3 суток.

Ход работы:

Дата снятия -

1. Произвести подсчет колоний, развившихся в чашке Петри. Сделать перерасчет количества микроорганизмов на 1 г воздушно-сухой почвы по формуле:

где а - число клеток микроорганизмов в 1г воздушно-сухой почвы,

б - среднее число колоний микроорганизмов на чашке Петри,

в – соответствующие разведение,

г - количество капель в 1мл жидкости в пипетке,

д - навеска почвы, взятой для анализа.

2. Полученные данные занести в таблицу, сделать вывод.

Результаты и обсуждение:

Генетические горизонты	Количество м/организмов в 1 г воздушно-сухой почвы
А0 А2 В С

Вывод:

Работа 2. Микроорганизмы, разрушающие клетчатку в аэробных условиях.

Ход работы:

3. В чашку Петри насыпать слой почвы толщиной 5-10 мм и смочить водой.

4. Сверху положить фильтр на поверхность почвы и придавить. Закрыть крышкой. 3. Чашку подписать и поставить в термостат при t = 25⁰ -30⁰С на 10-14 суток.

Задание: Приготовить фиксированный и окрашенный микропрепарат микроорганизмов.

Рассмотреть микропрепарат при увеличении микроскопа МИ-90^х, определить виды, сделать рисунок с обозначениями.