Лабораторная диагностика вич-инфекции

Лабораторная диагностика ВИЧ-инфекции проводится на основании комплексного обследования больного: клинического, выявления специфических антител в крови, выделения вируса из исследуемого материала путем заражения культур клеток (Т-хелперов), идентификации вирусных антигенов с помощью иммуноблоттинга, по обратнотранскриптазной активности, выявлению провируса в инфицированных клетках, по состоянию иммунной системы организма. Среди существующих методов лабораторной диагностики наиболее распространены серологические - выявление антител к антигенам вируса. Для выявления специфических антител в сыворотке обследуемого применяют – иммуноферментный анализ (ИФА). Исследование сыворотки на наличие антител в ИФА относят к тестам первого уровня. Положительный результат ИФА считают предварительным (ориентировочным) и он должен быть подтвержден на 2-3 ИФА тест-системах.

К тестам второго уровня – подтверждающим относят исследование с помощью иммуноблоттинга (ИБ). Для постановки окончательного диагноза в ИБ определяют наличие антител к каждому из структурных белков ВИЧ.

При использовании тест-систем ведущих фирм мира у больных ВИЧ-инфекцией в иммунном блоттинге во всех случаях выявляются антитела к gp160 и лишь у трети (38,8%) к р15.

Выявляемость антител к белкам вич в иммунном блоте

Антитела к белкам ВИЧ	% выявления	Антитела к белкам ВИЧ	% выявления
gp 160	100	gp 41	84,4
gp 120	91,1	p 31-34	84,4
p 65-68	93,3	p 24-25	100
p 55-52	93,0	p 17-18	80,0
		p 15	38,8

ВОЗ (1991) предлагает следующий принцип оценки результатов иммунного блота: а) положительный результат - обнаружение в сыворотке крови антител к двум вирусным белкам из группы env (gp 120, gp 41) с наличием или отсутствием белков - продуцентов gag (p 17, 25, 15) и pol;

б) отрицательный результат - отсутствие каких-либо антител;

в) неопределенный результат - обнаружение в сыворотке крови антител к белкам из группы gag (p 17, 25, 15) и pol. Чаще всего неопределенный результат связан с белками - продуцентами экспрессии гена gag ВИЧ-1 р15/17, р24 и р55, ибо в этих случаях возможны или инфицирование или ложноположительный результат. В подобных случаях, если обследуемый не относится к группе риска, а повторный анализ не дает нарастания титра антител, скорее всего человек не инфицирован.

Отрицательный результат иммуноблоттинга при наличии клинических и эпидемиологических подозрений на ВИЧ-инфекцию не отвергает возможность данного заболевания и требует повторения лабораторного исследования. Это объясняется тем, что в инкубационном периоде заболевания АТ еще нет, а в терминальной стадии, вследствие истощения иммунной системы, они уже перестают вырабатываться. В этих случаях наиболее перспективна полимеразная цепная реакция (ПЦР), позволяющая обнаружить частицы РНК вируса.

Способность вируса поражать клетки, имеющие СД-4 рецептор, позволяет проводить косвенную диагностику СПИДа на основании иммунного статуса организма. В здоровом организме имеется постоянное соотношение между рецепторами клеток СД 4 и СД 8. Этот показатель у здорового человека составляет 2,0 и более. Диагностическое, и особенно, прогностическое значение имеет показатель количество Th в 1 мл крови больного СПИДом и соотношение Th/Ts.

Если отношение Th/Ts равно 2 и более, то человек здоров. При снижении этого показателя до 0,5-легкое течение болезни и возможны оппортунистические инфекции, то есть заболевание, указывающее на наличие ВИЧ-инфекции. При значении Th/Ts от 0,2 до 0,5- регистрируется средней степени тяжести заболевание. Снижение этого показателя до 0,2 и ниже наблюдается при тяжелом течении болезни.

Зависимость между количеством Тh в 1 мл крови больного и процентом выживаемости больных СПИДом:

Процент выживаемости больных со СПИДом	Количество Т-хелперов в 1 мл
Здоровый человек	800
90%	Более 300
50-60%	100-300
20%	Менее 100