III. Снятие парафиновых срезов с микротомного ножа.

Готовые парафиновые срезы осторожно, не прикасаясь к режущему краю ножа, снимают мягкой кисточкой или изогнутой препаровальной иглой (в направлении от спинки к лезвию) и переносят либо на приготовленное предметное стекло, либо в чашку с теплой (35 - 40⁰) дистиллированной водой (но не горячей, так как парафин может расплавиться). Это делается с целью расправления морщинок и складок, образующихся на парафиновых срезах во время резки.

Можно воспользоваться и водопроводной водой, но обязательно кипяченой. В дистиллированной воде и кипяченой водопроводной парафиновые срезы могут оставаться длительное время. В некипяченой теплой воде под срезами очень скоро собираются пузырьки воздуха, мешающие равномерному приклеиванию срезов.

Помещают срезы на воду или предметное стекло обязательно поверхностью прилежащей к ножу, определить которую можно по характерному блеску (верхняя сторона всегда матовая).

С целью более легкого снятия срезов с ножа кисточку или препаровальную иглу следует слегка смачивать водой, тогда срезы легко к ним прилипают.

IV. Подготовка предметных стекол к наклеиванию

Для того, чтобы срезы прочно пристали к предметному стеклу и не отклеились во время окраски, стекла специально обрабатывают с целью обезжиривания. Для этого их основательно моют в горячей мыльной воде или длительно кипятят в 2—3% содовом растворе, затем хорошо ополаскивают в чистой горячей воде и промывают (несколько часов) в проточной. Очень хорошие результаты дает обработка предметных стекол (и других стеклянных предметов) раствором бихромата калия в серной кислоте (хромпике)

Обработанные по тому или иному способу и промытые в воде предметные стекла протирают стираной льняной тряпкой, держа стекла за края; и обезжиривают в 96° спирте или в смеси спирта с эфиром (смесь Никифирова), откуда их по мере надобности вынимают пинцетом и высушивают. Перед самой наклейкой срезов, высушенные стекла обычно покры­вают еще тонким слоем смеси белка с глицерином или сильно на­гревают (на пинцете) над пламенем спиртовки (газовой горелки). Нагревают ту поверхность стекла, на которую предполагается наклеивать срезы. Не должно быть копоти.

На хорошо обезжиренном предметном стекле вода должна ра­стекаться тонким слоем, а не собираться в капли.

Хорошие предметные стекла должны быть из белого стекла и иметь совершенно ровную поверхность, толщина их не должна превышать 1,2 мм.

V. Приготовление смеси белка с глицерином и нанесение её на предметные стёкла.

Берут свежий яичный белок (без примеси желтка), взбивают его шпателем или вилкой до со­стояния пены и выливают на большой складчатый бумажный фильтр, предварительно смоченный дистиллированной водой и фильтруют. К профильтрованному белку прибавляют, равный объем глицерина, размешивают и добавляют ку­сочек камфары или 2-3 маленьких кусочка (с пшеничное зерно) тимола для предупреждения загнивания. Можно использовать формалин в соотношении 1х100. В хорошо закрытом сосуде раствор сохраняется длительное время

Priman для наклейки парафиновых срезов предложил сле­дующую смесь: свежая кровяная сыворотка животных — 15 мл, дистиллированная вода — 10 мл и 5% раствор формалина — 6 мл. После приготовления смесь фильтруют. По наблюдениям автора, эта смесь надежнее белка с глицерином.

На сухое обезжи­ренное предметное стекло стеклянной палочкой наносят маленькую капельку смеси белка с глицерином и пальцем или чистой льняной тряпкой тщательно размазы­вают тонким слоем. Руки должны быть предварительно вымыты, а палец, которым производят размазывание смеси, обработан спир­том или этиловым эфиром (C₄H₁₀O). Нанесенный на стекло слой белка с глицерином свертывают при небольшом нагревании (50—60°), для чего стекло проводят 2—3 раза над пламенем спиртовки (как при фиксации бактерий), намазанной стороной вверх. После такой обработки предметное стекло считается готовым и на него можно наклеивать срезы.

Прекрасно держатся срезы и без белка, если стекла были осно­вательно прогреты; наклеивают на остывшие стекла.