Section 1
1.1. Les сaractéristiques de la structure et du fonctionnement de la H +- ATPhase vacuolaire. H+-ATPhase vacuolaire - les protéines actifs de transport, qui liées à la membrane primaire et qui jouent un rôle important dans des nombreux processus cellulaires. La fonction principale de H+ -ATPhase vacuolaire – c’est acidification d’espace interne, ce qui se produit le transfert actif secondaire des sucres, des ions et des acides aminés, c’est pourqoui cette enzyme joue un rôle important dans la croissance, le développement du corps de plante et d’adaption aux conditions de stress. On sait , q’il existe beaucoup de la H +- ATPhase vacuolaire. (Fig. 3)
Figure. 3. Schéma de la H +- ATPhase dans les plantes. Ce modèle n'est pas affiché sous-unité e. On croit que l'activité et la biosynthèse de chaque type H +-ATPhase vacuolaire est régulée en fonction du rôle spécifique et d’étape de développement de l'organisme de la plante. Les gènes multyplétes peuvent coder des isoformes avec des propriétés uniques et le niveau d'expression, facilitant le gradient H + nécessaire. Tandis que certains isoformes vacuolaires H +-ATPhase exprimée de façon constitutive, d'autres peuvent répondre aux signaux de l'environnement interne et externe. On sait que chaque sous-unité de la H +-ATPhase vacuolaire Zea mays L. code par le gène correspondant. Les séquence des gènes des sous-unités qui sont décodées à ce moment: sous-unité B, sous-unité G sous-unité et 69 kDa (DCCD) vacuolaire ATPhase. Dans plusieurs documents Rybchenko Z. et Palladina T. O. [2] ont montré, que le médicament éxplorére en particulier Metiur, augmente l'activité de transport de H +-ATPhase membrane vacuolaire, mais le mécanisme de cette activation n'est pas claire. 1.2. L’éffet des médicaments à l'expression des gènes de H +-ATPhase aux conditions de salinité et l'action des médicaments Metiur et Ivin. Le but de ce travaille a été déterminer l'effet des médicaments à l’expression des gènes de H +-ATPhase aux conditions de salinité et l'action des médicaments Metiur et Ivin. Pour ça a été utilisée la méthode RT-PCR. Les amorces ont été choisies pour conservateur aux toutes isoformes de H+-ATPhase séquence des nucléotides. Pour l’analyse elektroforehramy analyse par RT-PCR de l'expression des gènes de la H +-ATPhase membranes vacuolaires a utilisées programme GelAnalyzer. L'expression du gène H-ATPhase membrane vacuolaire environ 6 fois plus en 8 plants par jour par rapport à 17 jours, alors, il y a des processes trés actives de synthèse des transcriptes de ce ferment aux premiers stades de développement (Fig. 4, 5).
Fig. 4. L’élektroforegramme d'analyse par RT-PCR de l'expression du gène de la H +-ATPhase des membranes vacuolaires dans les cellules des racines de 8 jours plants sous l'influence des agents bioactifs et 1 jour d’exposition de sel. M-marqueur du poids moléculaire ADN, 1 - contrôle, 2 - traitement de Metiur, 3- traitement d’Ivin, 4 - 0,1 M NaCl dans l’éspace, 5 - traitement de Metiur + 0,1М NaCl, 6- traitement dù Ivin +0,1М NaCl.
Tableau.1
Les variantes |
Un contrôle |
Metiur |
Ivin |
0,1 М NaCl (contrôle saline) |
Metiur + 0,1М NaCl |
Ivin + 0,1М NaCl |
L'intensité du rayonnement en u. а. |
659±10 |
778±43 |
775±69
|
701±27
|
872±46 # |
663±37 |
М±m, n=3, p ≤0.05,*- significative par rapport au contrôle , #-probablement par rapport 0,1 М NaCl.
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Fig. 5. L’élektroforegramme d’analyse RT-PCR de l'expression des gènes de la H +-ATPhase des membranes vacuolaires dans les cellules des racines de 18 jours plants sous l'influence des agents bioactifs et 10 jour d’exposition de sel. M-marqueur du poids moléculaire ADN, 1 - contrôle, 2 - traitement de Metiur, 3- traitement d’Ivin, 4 - 0,1 M NaCl dans l’éspace, 5 - traitement de Metiur + 0,1М NaCl, 6- traitement dùIvin +0,1М NaCl. L'intensité des glowes des produites amplifiés des transcriptions d’ATPhase des membranes vacuolaires sous l'influence de drogues et bioactive et 10 jours d’exposition à 0,1 M NaCl 17 jours plants quotidiens sont présentés dans le tableau 2.
Tableau 2.
Les variantes |
Un contrôle |
Metiur |
Ivin |
0,1 М NaCl (contrôle saline) |
Metiur + 0,1М NaCl |
Ivin + 0,1М NaCl |
L'intensité du rayonnement en u. а. |
160±12 |
354±13* |
295±26*
|
472±14
|
577±26# |
516±37 |
М±m, n=3, p ≤0.05,*- significative par rapport au contrôle , #-probablement par rapport 0,1 М NaCl.
CONCLUSIONS: L'utilisation de Metiur sans saline a augmenté de l'activité d’expression du gène exploraire dans 8 jours plants en 2 fois, et par 18% en 17 jours plants. Le prétraitement par Ivin a augmenté de l’activité de la formation de la transcription en 1,8 fois dans 8 jours plants, et en 1,2 fois en 17 jours plants (tableau 1.2). En général, nos données de l’augmentation de l'activité de l'expression des gènes exploraires égalent du travail de Tsygankova [3] qui a démontré l’augmentation du niveau mRNA dans les plantes. L’éxposition de sel à 0,1 M NaCl pendant 1 jour a causé presque aucune augmentation notable de l'expression du gène de la H +- ATPhase des membranes vacuolaires, mais l'exposition de sel de 10 jours provoqué une augmentation de l'expression en 3 fois du gène correspondant (fig. 5). Nos recherches confirment la conclusion que dans les plantes résistant au sel est augmentation significative de l'activité des genes, que protéger les plantes de sodium toxique, mais dans les plantes pas résistant au sel, par exemple le maïs, telle défense n'est pas disponible. Le Metiur a augmenté de l'activité de l'expression du gène éxploraire en1,3 fois à 1 jour exposition de sel, et en 1,2 fois à 10 jours, l’Ivin a augmenté l'activité du gène éxploraire, mais dans une moindre mesure. Dans les œuvres de Rybchenko Z.I et de Palladina T. [2] ont démontré l’augmentation de l'activité de transport du gène de H +-ATPase membranaire vacuolaire sous l'influence de la salinité et de la transformation de drogues. On peut supposer que l'augmentation de l'activité de H +- ATPhase des membranes vacuolaires liée de leur influence sur le plan génétique. Ainsi, l'un des mécanismes d'adaptation des plantes de maïs aux termes de salinité est augmenté d’activité de H +- ATPhase des membranes vacuolaires au détriment d’augmenté d'activité du gène correspondant ZmV-H +-ATPase. Le mécanisme de l'action des drogues adaptogènes, en particulier Metiur liée à leur influence à l'activité de H +- d’ATPhase des membranes vacuolaires au niveau génétique.
