Реакция иммуноферментного анализа (ифа)

№

Критерии оценки

1

Иммуноферментный анализ крови— лабораторный метод определения антигенов и/или антител. Иммуноферментный анализ (ИФА) может быть качественным (показывает наличие или отсутствие антител против антигенов) и количественным (определение количества антигенов или антител). В ИФА 2 типа реакций: иммунологический и ферментативный. Состоит из 3 этапов:

2

1 этап: Специфический антиген адсорбируют в лунках полистеролового планшета. Инкубируют с испытуемыми сыворотками человека 30 минут.

3

Отмывают несвязавшиеся иммуноглобулины промывочным раствором.

4

2 и 3 этапы выявляющие образование комплекса Аг+Ат. 2этап: Связавшиеся иммуноглобулины выявляют с помощью антиглобулиновой сыворотки, к которой прикреплен фермент пероксидаза. Инкубируют 30 минут.

5

На 3 этапе добавляется субстрат (пероксид водорода) и индикатор (хромоген), который позволяет оценить ферментативную активность по интенсивности окраски. Интенсивность окраски может меняться со светло-желтого до темно-красного. Чем больше антител, тем выше интенсивность окраски. Изменение окраски свидетельствует об инфицированности больного.

Результаты ИФА:

Положительный(наличие окраски)-человек инфицирован, ИФА подтверждает иммуноблотинг.

Отрицательный(нет окраски)- хромоген не меняет свой цвет.

Ложноположительный(например,при СПИДе)- наличие в организме антител против других заболеваний, не касающихся исследуемого(например, аутоиммунные заболевания).

Ложноотрицательный(например, при СПИДе)-в терминальной фазе заболевания(когда иммунная система истощена и не вырабатывает антитела) и в период серологического окна(когда ИФА проводят в то время, когда антитела к возбудителю не успели выработаться)

Итого