3. Обробка результатів.

В залежності від тривалості знезабарвлення чи змінення кольору, молоко відносять до одного із чотирьох класів, зазначених в таблиці та обов’язковому додатку до ГОСТ 9225-84

Лабораторна робота № 3

Тема: Виявлення та визначення наявності бактерій групи

кишкових паличок (БГКП).

НД на метод випробування: ГОСТ 9225 – 84. Молоко и молочные продукты . Методи м/б аналіза.

Даний метод базується на посіві певної кількості продукту, або його розведень, змивів з поверхні обладнання в рідкі лактовмісні середовища Кесслера, інкубації посівів при температурі 37⁰ С ± 1 ⁰С протягом 48 ± 3 годин, підтвердженням наявності БГКП по зброджуванню лактози з виділенням кислоти та газу.

Посіви попередньо переглядають через добу витримки в термостаті та для подальшого випробування відбирають пробірки, що помутніли, змінили колір з фіолетового на жовто-зелений, з наявністю газу . Кінцевий підрахунок проводять через 48 годин.

Ідентифікацію і підтвердження належності виявлених мікпроорганізмів до БГКП проводять по культурально-морфологічним особливостям. Для цього із рідкого поживного середовища проводять пересів в чашки Петрі на поверхню середовища Ендо таким чином, щоб отримати ізольований ріст БГКП. Через 24 години інкубування при температурі 37 ⁰С ± 1 ⁰С утворюються червоні і рожеві колонії з металевим блиском або без нього. Не менш ніж з 5 колоній готують мазки, зафарбовують по Граму і переглядають під мікроскопом. Бактерії цієї групи грам-негативні, неспроутворюючі палички.

1.Апаратура та матеріали.

1. Ваги лабораторні не менше 4 –го класу точності з найбільшою границею зважування 500 г по ГОСТ 23104.

2. Чашки Петрі ГОСТ 23 932 - 90.

3. Петля бактеріологічна.

4. Середовище Кесслера та Ендо.

5. Фізіологічний розчин.

6. Піпетки по ГОСТ 20292.

7. Колби по ГОСТ 1770.

8. Циліндри по ГОСТ 1770.

9. Термометри скляні технічні №4 по ГОСТ 2823.

10. Стакани 1-50 по ГОСТ 25336.

11. Груша гумова.

12. Вода дистильована по ГОСТ 6709.

2.Підготовка до аналізу.

1. Приготування та стерилізація середовищ Ендо та Кеслера згідно інструкції, яка надається виробником.

2. Зважування проби в кількості 10 г.

3. Приготування послідовних 10- кратних розведень.

3. Проведення аналізу.

1. Висів кількості продукту, в якій нормується відсутність БГКП на рідке поживне середовище Кеслера.

2. Інкубування посівів в термостаті протягом 24 – 48 годин при температурі 37 ⁰С.

3. Підтвердження належності вирослих на середовищі Кеслера мікроорганізмів до БГКП.

4. Пересів на щільне середовище Ендо.

5. Інкубування посівів в термостаті протягом 24 годин при температурі 37 ⁰С.

6. Приготування з колоній препаратів і їх фарбування по Граму.

7. Мікроскопування препаратів зафарбованих по Граму

4. Обрахунок результатів.

Результат вважають позитивним при виявленні навіть однієї колонії з особливостями БГКП. Висновок про наявність БГКП дають при виявленні в посівах грам-негативних, не утворюючих спор паличок, зброджуючих лактозу до кислоти та газу при температурі 37⁰ ± 1 ⁰С.