Изготовление вирусных диагностикумов
Изготовление вирусных диагностикумов (антигенов и сывороток) имеет свои особенности. Диагностические антигены готовят, используя органы зараженных животных (тканевые антигены). Антигены полученные с использованием культур клеток называют культуральными антигенами. Основным их недостатком является содержание в своем составе балластных белков, в том числе белков других вирусов, которые могут быть в исходном сырье. Это влияет на специфичность, активность антигенов.
Для диагностики вирусных и бактериальных заболеваний выпускают наборы для твердофазного иммуноферментного анализа (ИФА), для иммунофлуоресцентного анализа.
Таким образом, описанные диагностические препараты, полученные классическими, а также современными методами позволяют на основе закономерностей иммунитета выявить наличие в исследуемых сыворотках или других тканевых жидкостях (молоке, влагалищной слизи) специфические антитела по известному антигену-диагностикуму
Бактериофаги
Бактериофаги представляют собой вирусы, поражающие бактерии и вызывающие их разрушение — лизис.
В настоящее время фаги выявлены почти у всех патогенных и многих непатогенных микроорганизмов: у энтеробактерий, микобактерий, коринебактерий, стрептококков, стафилококков, сарцин, споровых и актиномицетов. Бактериофаги широко распространены в природе.
Бактериофаги, выделенные из патогенных микроорганизмов, могут быть использованы как специфические лечебно-профилактические биопрепараты. Например, при сальмонеллезе овец, вызванном S. ovis, хороший лечебно-профилактический эффект оказал выделенный специфический овисный сальмо-фаг.
Установлено, что в популяции одного микроорганизма могут появиться клетки, устойчивые к фагам, и из них вырастают вторичные, фагоустойчивые микроорганизмы. При изучении свойств вторичных фагорезистентных культур Salmonella ovis, установили, что они не изменяют антигенных свойств, но теряют свою вирулентность.
На основании этих исследований была доказана возможность использования вторичных фагорезистентных культур с целью изготовления живых вакцин.
Используя визуальный феномен лизиса культур микроорганизмов специфическим бактериофагом нередко его используют как диагностический тест. Например, в бактериологических лабораториях феномен бактериофагии используется как высокоспецифическая реакция при диагностике сибирской язвы.
Для этой цели биопредприятиями выпускается два сибиреязвенных бактериофага.
Для их изготовления, используют авирулентные штаммы возбудителя сибирской язвы. Такие культуры выращивают в МПБ или дрожжевом бульоне. Непременным условием является то, что при засеве нужно использовать свежие, 5—6-часовые, расплодки производственных штаммов, возбудителя. Затем после посева возбудителя в бутыли вносится бактериофаг. Содержимое бутылей перемешивается, и они ставятся в термостат на 10—18 часов. По истечении указанного срока среду фильтруют через стерилизующие пластины. В фильтрате остается только бактериофаг.
После изготовления бактериофага его разливают в ампулы и подвергают контролю на стерильность, активность и специфичность.
Сибиреязвенный бактериофаг используется как диагностикум при дифференциации возбудителя сибирской язвы от антракоидов.
Примерно по такой же методике готовятся бактериофаги и к другим микроорганизмам. Но выращивание их, например сальмофагов, колифагов, проводится в течение 6—10 часов при 37°С и выдерживании до 24 часов при комнатной температуре Сальмофаги и колифаги чаще всего используются как лечебно-профилактические препараты.