5. Дифференциальная диагностика и оценка результатов.

5.1. Для дифференциации из материала или среды, содержащих трихомонад,

готовят по 2 мазка. Материал берут стерильной пастеровской пипеткой со дна 

пробирки,  наносят на  чистое  обезжиренное  предметное стекло и распределяют 

тонким слоем.  Мазки высушивают на воздухе, фиксируют этиловым ректификованным 

спиртом 96-градусным в течение  20-25  мин, окрашивают азур-эозином по 

Романовскому-Гимзе (краску разводят дистиллированной водой рН 7,0-7,2 в 

соотношении 1:10) - 40-90 мин. (в зависимости  от  качества краски и 

температуры),  промывают дистиллированной или водопроводной водой рН 7,0-7,2 до 

исчезновения  следов  краски  на фильтровальной бумаге,  высушивают и исследуют 

под иммерсионной системой микроскопа (х90).

5.2. При микроскопии обнаруживают трихомонад округлой, овальной,

грушевидной,  ланцетовидной, палочковидной форм. Цитоплазма трихомонад 

окрашивается  в  голубой цвет различной интенсивности,  ядро - в красно-

фиолетовый или красный, жгутики - в красный или розовый цвет.

От переднего  конца  Т.foetus  отходят 4 жгутика,  из которых три 

направлены вперед,  а четвертый,  окаймляя ундулирующую мембрану, идет назад и 

оканчивается свободно.  Вдоль всего тела расположен аксостиль. Ядро овальной 

формы, чаще расположено ближе к передней части тела возбудителя.

5.3. Трихомонад необходимо дифференцировать от других жгутиковых

простейших.  Дифференциация основана на наличии характерных морфологических 

признаков возбудителей. У непатогенных жгутиковых родов Oicomonas,  Cercomonas, 

Bodo ундулирующая мембрана и аксостиль отсутствуют и имеются 1 или 2 жгутика.

5.4. Результат исследований считают положительным при обнаружении в

препарате из нативного материала или посевов возбудителя  трихомоноза.

6. Сроки исследований:

микроскопического - 1 дн,

культурального    - 10 дн.

С утверждением настоящих Методических указаний на территории Российской 

Федерации утрачивает силу "Методические указания по лабораторной диагностике 

трихомоноза крупного рогатого скота", одобренные Главветупром МСХ СССР 29.12.85 г.

                                                             Приложение          

                                           к "Методическим указаниям по  

                                               лабораторной диагностике 

                                   трихомоноза крупного рогатого скота"

                 Рецепты, питательных сред

1. Среда Петровского. Свежую печень крупного рогатого скота освобождают

от жира, пленок, канальцев и измельчают в мясорубке. 1 кг фарша 

заливают 1 куб.дм водопроводной воды рН 7,0-7,2,  настаивают в 

течение 1 ч. и кипятят при помешивании 1 ч.  После отстаивания фарш 

удаляют,  а жидкость доливают дистиллированной водой рН 7,6-7,2 до 

первоначального объема и фильтруют через ватно-марлевый фильтр.

Берут 500 куб. см  печеночной  воды и 500 куб.см дистиллированной воды 

рН 7,0-7,2  добавляют 10 г пептона,  5- г хлорида натрия (химически чистого) и 

доводят до кипения.  Бульон охлаждают,  определяют рН и  доводят 1%-ным водным 

раствором едкого натра до 8,2-8,4.  Бульон повторно кипятят в течение 30 мин. 

Затем добавляют 10 г мальтозы или глюкозы, 0,3 г растворимого крахмала. Среду 

разливают в стерильные пробирки по 8 куб.см, заливают вазелиновым маслом по 

0,3-0,5 куб.см,  стерилизуют при 112+-1гр.С в течение 30 мин.

Полученная среда светло-коричневого или светло-соломенного цвета, рН 

готовой среды 7,2-7,4.

Срок хранения среды в холодильнике до 6 мес.