1.8 Основные положения, выносимые на защиту:

• распространение послеродового эндометрита у коров;

• растворимость и динамика распада озона в физиологическом растворе;

• антимикробная активность озонированного изотонического раствора хлорида натрия;

• влияние при различных способах введения озонированного физраствора на гематологические показатели, воспроизводительную способность и сократительную активность матки коров;

• разработка портативного устройства для гистерографии;

• эффективность профилактики и терапии эндометрита у коров с использованием озонированного раствора хлорида натрия.

2 Материал и методы исследования

Работа проводилась в 2001-2003 годах и являлась составной частью научных исследований по теме: «Усовершенствовать и разработать методы и средства диагностики, профилактики и лечения незаразных болезней сельскохозяйственных животных» с номером гос. регистрации 01.200.2-01263. Клинико-экспериментальные исследования выполняли на разновозрастных коровах холмогорской и голштинизированной чёрно-пёстрой пород с продуктивностью 3,5 - 7,0 тысяч килограмм молока.

Изучение вопроса о степени распространения акушерских заболеваний у коров и контроль за эффективностью лечебных процедур проводили согласно «Методическим указаниям по диагностике, терапии и профилактике болезней органов размножения у коров и тёлок» (М.,2000).

Отбор проб маточного содержимого от коров, больных острым послеродовым гнойно-катаральным эндометритом для бактериологических исследований, осуществляли по методике Н.Н. Михайлова с соавт.(1967). Для выделения чистых культур бактерий, исследуемый материал в начале высевали на МПБ и культивировали в течение 24 часов при температуре 37⁰С, а затем рассевали дробным методом на различные питательные среды: МПА, Эндо, молочно-солевой агар, кровяной агар, ЭНЦПХ-агар, Китта-Тарроцци, Чапека. Морфологию и тинкториальные свойства бактерий определяли путем микроскопирования предварительно окрашенных мазков по Граму. Культуральные свойства бактерий изучали в процессе выделения и выращивания на различных питательных средах, учитывали характер и интенсивность роста, форму и структуру колоний, степень помутнения и пигментообразования, наличие или отсутствие поверхностной пленки, пристеночного кольца и характер осадка.

Разработка методик озонотерапии и озонопрофилактики выполнена с использованием отечественного генератора медицинского озона «Озон-М-50» (МАЮИ 941714.004 ТУ) производства ОАО «Электромашиностроительный завод им. ЛЕПСЕ» г. Киров, изотонического раствора натрия хлорида и рыбьего жира, изготовленного согласно ТУ 8112-04977536-1-93.

Оценку величины растворимости озона в 1000,0 мл физиологического раствора и динамику его распада осуществляли йодометрическим методом по ГОСТ № 030941 в модификации О.Ю. Искусных, М.И. Рецкого (2002).

В цельной крови гемоглобин определяли по Сали, эритроциты и лейкоциты подсчитывали в счетной камере Горяева, выводили лейкограмму. Фагоцитарную активность нейтрофилов оценивали с использованием латекс-теста по С.Г. Потаповой и др. (1977). В сыворотке крови общий белок определяли рефрактометрическим методом, белковые фракции - нефелометрическим методом по Оллу и Маккорду, в модификации С.А. Карпюка (1962), бактерицидную активность по О.В. Смирновой, Т.А. Кузьминой (1966), лизоцимную активность по В.Г. Дорофейчуку (1968), общие иммуноглобулины с применением NaSО₄ (б/в, х.ч.), циркулирующие иммунные комплексы по П.В. Барановскому, В.С. Дальнишину (1983). Оценку состояния процессов пероксидации проводили методом индуцированной биохемилюминесценции на биохемилюминометре БХЛ-06, сопряжённым с компьютером IBM PC/AT в диалоговом режиме.

Параметры сократительной активности матки у коров, после туалета наружных половых органов, оценивали с помощью разработанного нами гистерографа. Изучению подергали сократительные эффекты в ответ на введение окситоцина, окситоцина и физиологического раствора, озонированного изотонического раствора натрия хлорида с концентрацией озона 1,2 мг/л (ОФР 1), 2,2 мг/л (ОФР 2) и 5,3 мг/л (ОФР 3) и 25 ЕД окситоцина.

Для изучения эффективности профилактических мероприятий в отношении послеродового эндометрита опытной группе животных с первого дня послеродового периода, трехкратно с интервалом 48 часов внутривенно вводили озонированный физиологический раствор в дозе 1000,0 мл с концентрацией озона 1,2; 2,2; 5,3 мг/л и окситоцин в дозе 25 ЕД. Интервал между введениями составлял 48 часов.

Изучение эффективности применения озонированного физиологического раствора при лечении коров, больных острым послеродовым гнойно-катаральным эндометритом, проводили на пяти группах животных. Лекарственные препараты вводили в матку при помощи полистироловой пипетки через каждые 48 часов. Коровам первой группы внутриматочно инстиллировали озонированный физиологический раствор с концентрацией озона 5,3 мг/л. Животным второй группы вначале полость матки санировали озонированным изотоничным раствором натрия хлорида с последующим его удалением. Затем вновь внутриматочно вводили озонированный физиологический раствор с концентрацией озона 5,3 мг/л. Коровам третьей группы в качестве этиотропной терапии применяли 10%-й раствор фуразолидона, приготовленного на физиологическом растворе. Животных четвертой группы лечили, используя 10%-й раствор окситетрациклина на той же основе. Коровам пятой группы в качестве этиотропного средства в полость матки вводили 10%-й раствор ихтиола. Для однократной внутриматочной инстилляции использовали 100,0 мл каждого из изучаемых лекарственных средств.

Определение эффективности озонотерапии в составе сочетанной терапии коров, больных острым эндометритом, развившегося после нормального отёла, на фоне субинволюции матки провели на животных 5-ти групп (n=20). В первом эксперименте коровам подопытной и контрольной групп внутриматочное введение лекарственных препаратов сочетали с новокаиновыми блокадами по методикам С.Г.Исаева, Г.С.Фатеева и А.И.Мирона. Интраматочно по способу глубокого цервикального введения с ректальной фиксацией шейки матки вводили различные лекарственные препараты. Во втором эксперименте животным всех групп назначали внутриматочное введение лекарственных препаратов сочетано с однократными внутримышечными инъекциями магэстрофана (2,0 мл), синэстрола (3,0 мл) и окситоцина (50 ЕД). На третьем этапе провели сравнение эффективности лечения послеродового эндометрита между озонированным физиологическим раствором и озонированным рыбьим жиром в составе комплексной терапии совместно с озонированным физраствором, вводимым внутривенно.

Исчисление экономической эффективности озонотерапии проводили согласно «Методике определения экономической эффективности ветеринарных мероприятий» М., 1997. Статистическая обработка материала выполнена на персональном компьютере IBM “Pentium IV” в операционной системе “Windows-2000” с помощью пакета программ “Microsoft Office 2000”.