Заключение

Работы по получению и поддержанию культуры клеток растений требуют специальных помещений, оборудования, инструментов, предполагают использование сложных питательных сред.

Существует большое количество питательных сред для разных задач культивирования, видов растений и типов эксплантатов. Наиболее часто используется среда Мурасиге и Скуга (Murashige, Skoog 1962). Она хорошо сбалансирована по входящим в нее компонентам и дает хорошие результаты при культивировании клеток многих видов растений. Питательные среды для культуры клеток растений должны включать все необходимые минеральные и органические элементы в концентрациях, максимально приближенным к тем, которые получают интактные растения для нормального роста и развития в условиях in vivo: макро- и микроэлементы, витамины, углеводы. Добавка в питательную среду регуляторов роста растений позволяет стимулировать пролиферацию культур клеток или индуцировать процессы морфогенеза.

Культура клеток растений может быть получена и успешно поддерживаться только при условии соблюдения асептики. Это достигается благодаря использованию различных методов стерилизации помещений, лабораторной посуды, инструмента, питательных сред. Особо тщательно стерилизуют поверхность эксплантатов, предназначенных для получения культуры клеток. Все работы, при которых открывают культуральные сосуды (разлив стерильной питательной среды по пробиркам, чашкам Петри, колбам, вычленение эксплантатов и их перенос на питательную среду, перенос части культуры на свежую питательную среду и др.) проводят в стерильных условиях в рабочем пространстве ламинар-бокса с соблюдением правил асептики.

В зависимости от типа эксплантата и целей эксперимента для культуры клеток используют различные культуральные сосуды и условия культивирования. Культивирование производят в культуральных комнатах, оборудованных кондиционером, в темноте (в термостатах) или при освещении (на специальных стеллажах, оборудованных подсветкой или в климакамерах). Температурный и световой режим культивирования, спектральные характеристики света могут оказывать существенное влияние на пролиферацию клеток, индукцию процессов морфогенеза в культуре клеток растений.

Через определенные промежутки времени производят перенос культур на свежую питательную среду (пассирование, субкультивирование) для того, чтобы избежать истощения питательных сред, неблагоприятного эффекта метаболитов, выделяемых в среду в процессе культивирования, недостаточного объема культурального сосуда для разросшихся культур.

Дополнительная литература

1. Bhojwani S.S., Razdan M.K. Plant tissue culture: theory and practice. Elsevier. 1996.- 767 p.

Контрольные вопросы

1. Назовите основные элементы синтетических питательных сред для культуры клеток растений.

2. Для каких целей используют запасные растворы компонентов питательной среды?

3. Каким образом обеспечивают условия асептики при получении культуры клеток растений?

4. Для чего необходимо проводить субкультивирование клеточных культур?