Аллельспецифические пробы

С помощью аллель - олигонуклеотидов определяют те участки, которые не узнают ферменты рестрикции. Для этого синтезируют короткие олигонуклеотидные зонды, комплементарные участку нормального и мутантного аллеля в ДНК. Область генома, содержащую исследуемый ген, амплифицируют с помощью ПЦР, и образцы полученной ДНК переносят на нитроцеллюлозные фильтры (дот- или слот-блоттинг). Пробы выдерживают с ³²Р-зондами для выявления нормальной или мутантной последовательности.

Олигонуклеотиды, аллель-специфические по определенным мутация, можно использовать в качестве праймеров в ПЦР при клиническом тестировании населения на наличие патологического гена.

Использование ДНК-технологий для получения лекарственных препаратов и лечения различных болезней.

Вакцины – очищенные белки, антипенные детерминанты ряда возбудителей ряда возбудителей вирусных и бактериальных инфекций. Для этого используют технику рекомбинантных ДНК.

Белки, имеющие терапевтическое значение, получают с использованием этой технологии во многих странах мира. Так получают инсулин, гормон роста, фактор VIII, тканевой активатор плазмина (участвует в процессе фибринолиза и предотвращает образование тромба), интерлейкины, колоний стимулирующий фактор, эритропоэтин и др.

Генная терапия – лечение наследственных, многофакторных и инфекционных заболеваний путем введения в соматические клетки пациентов генов, которые обеспечивают исправление генных дефектов или придают клеткам новые функции.

Генная терапии in vivo основана на прямом введении в специализированные ткани больного клонированных и определенным образом упакованных последовательностей ДНК, поступающих в определенные клетки с помощью рецепторов.

Интерферон (Interferonum) является низкомолекулярным белком, обладающим противовирусными свой­ствами.

Его рассматривают как противовирусный антибиотик и как фактор неспецифической защиты ор­ганизма от первичной вирусной инфекции.

В медицин­ской практике используют интерферон, образуемый лейкоцитами донорской крови человека в ответ на воз­действие вируса интерфероногена.

Применяют этот противовирусный препарат в ампулах по 2 мл (порошок), также есть гели и мази с интерфероном человеческим.

Раствор готовят на дистиллированной или кипяченой воде комнатной температуры и используют в виде аппликаций на слизистую оболочку рта или ингаляций в ротовую полость.

Источник: http://alvistom.com/publ/lekarstvennye_sredstva_v_stomatologii/protivovirusnye_preparaty_v_stomatologii_protivovirusnye_lekarstvennye_sredstva/5-1-0-5

II Цель деятельности студентов на занятии

Студент должен знать:

1. Рестриктазы, механизм их действия;

2. Как происходит расщепление ДНК с помощью рестриктаз;

3. Основной смысл фрагментирования ДНК;

4. Как осуществляется идентификация специфических последовательностей в молекуле ДНК;

5. Методику секвенирования ДНК;

6. Получение рекомбинантных ДНК;

7. Как осуществляется амплификация фрагментов ДНК;

8. Основу метода клонирования ДНК и его значение;

9. Как используют знания последовательности нуклеотидов в ДНК для диагностики заболеваний, получения лекарственных препаратов и лечения различных болезней;

10. Какими свойствами обладает интерферон.

Студент должен уметь объяснить:

1. Методы выделения ДНК;

2. Метод блот-гибридизации по Саузерну;

3. Принцип полимеразной цепной реакции (ПЦР);

4. Методы идентификации моногенных мутаций:

   • Полиморфизм длины рестрикционных фрагментов;

   • Аллельспецифические пробы.