- •Министерство образования республики беларусь
- •Глава 2. Результаты и их обсуждение
- •Список сокращений и обозначений
- •Введение
- •Глава 1. Материалы и методы
- •Характеристика объекта исследования
- •Питательные среды и физические условия культивирования
- •Состав основной питательной среды mс, использованной в работе
- •Состав модифицированной питательной среды Mурасиге и Скуга
- •1.3. Иммобилизация клеток суспензионной культуры в
- •1.4. Определения активности фенилаланинаммиак-лиазы
- •1.5. Количественное определение содержания фенольных соединений
- •1.6. Статистическая обработка данных
- •Глава 2. Результаты и их обсуждение
- •Заключение
- •Список литературы
1.6. Статистическая обработка данных
Основными статистическими характеристиками служили: средняя арифметическая величина (х), среднее квадратичное отклонение (σ), ошибка средней величины (Sх).
Средняя арифметическая определялась по формуле:
(1.3),
где ∑хi – сумма всех n- повторностей измерения.
Для определения среднего квадратического отклонения использовалось выражение:
(1.4)
где ∑(хi-х)2 – сумма квадратов отклонений от средней арифметической величины.
Ошибка средней величины определялась по формуле:
(1.5).
Достоверность различий между вариантами устанавливали определения t критерия Стьюдента, который определяли по формуле:
d
tфакт. = –––––– (1.6),
Sd
где d =x1 – x2 – модуль разницы между средними арифметическими двух вариантов;
Sd – статистическая ошибка разницы, которая определялась по формуле:
где 1(x1-x1)2 – сумма квадратов отклонения от средней арифметической величины контроля;
2(x2-x2)2 – сумма квадратов отклонения от средней арифметической величины эксперимента;
n1 – число повторностей контроля;
n2 – число повторностей эксперимента.
Различия между вариантами являются достоверными, если tфакт. превышает tтабл., найденное по таблице распределения Стъюдента при уровне значимости 0,05 и соответствующем числе степеней свободы (Рокицкий, 1973).
Статистическую обработку данных производили с помощью пакета анализа данных программы Microsoft Excel.
Глава 2. Результаты и их обсуждение
При выполнении экспериментальной части преддипломной практики на базе кафедры клеточной биологии и биоинженерии растений было исследовано влияние типа питательной среды на активность ФАЛ в свободных клетках суспензионной культуры Echinacea purpurea (рис. 2.1). Измерения проводились в начале ростового цикла (лаг-фаза) и в его конце (стационарная фаза).
1 – стандартная среда; 2 – модифицированная среда
Рис. 2.1. Влияние типа питательной среды на активность ФАЛ в свободных клетках суспензионной культуры эхинацеи пурпурной
Было выявлено, что в лаг-фазе и стационарной фазе ростового цикла активность ФАЛ находилась примерно на одинаковом уровне в свободных клетках суспензионной культуры Echinacea purpurea, выращиваемых на стандартной и модифицированной питательных средах. В лог-фазу обнаружено небольшое повышение активности ФАЛ в свободных клетках выращиваемых на модифицированной среде по сравнению с лаг-фазой. Достоверно более высокая активность ФАЛ была обнаружена в свободных клетках, которые инкубировались на модифицированной среде МС только в лог-фазу ростового цикла. Таким образом, более высокая активность ФАЛ в свободных клетках наблюдалась только в лог-фазу ростового цикла.
На следующем этапе было проанализировано влияние типа питательной среды на активность ФАЛ в иммобилизованных клетках суспензионной культуры Echinacea purpurea (рис. 2.2).
1 – стандартная среда; 2 – модифицированная среда
Рис. 2.2. Влияние типа питательной среды на активность ФАЛ в иммобилизованных клетках суспензионной культуры эхинацеи пурпурной
Согласно полученным данным тип питательной среды влиял на активность ФАЛ в иммобилизованных клетках суспензионной культуры эхинацеи пурпурной. В лаг-фазу активность ФАЛ в продукционной среде была в 1,2 раза больше по сравнению со стандартной средой, в лог-фазу и стац-фазу активность ФАЛ была на одинаковом уровне, в модифицированной среде в 0,8 раз больше по сравнению со стандартной средой.
Достоверно более высокая активность ФАЛ была обнаружена в иммобилизованных клетках, которые инкубировались на модифицированной среде МС. Таким образом, иммобилизация клеток суспензионной культуры Echinacea purpurea в гранулы Са-альгинатного геля приводила к росту активности ФАЛ только при культивировании на продукционной питательной среде.
Далее было проанализировано влияние типа питательной среды на содержание фенольных соединений (ФС) в свободных клетках суспензионной культуры Echinacea purpurea (рис. 2.3).
1 – стандартная среда; 2 – модифицированная среда
Рис. 2.3. Влияние типа питательной среды на содержание фенольных соединений в свободных клетках суспензионной культуры эхинацеи пурпурной
Согласно полученным данным тип питательной среды оказывал более сильное влияние на уровни накопления ФС в свободных клетках суспензионной культуры эхинацеи пурпурной. При этом отмечалась хорошо выраженная стимуляция продукции ФС при замене стандартной питательной среды МС на модифицированную (продукционную). В стационарную фазу стимулирующий эффект составлял в среднем 2 раза. В лаг-фазу стимуляция была еще более выраженной и достигала 2,7-3 раза. Таким образом, при культивировании на продукционной питательной среде свободные клетки суспензионной культуры Echinacea purpurea накапливали больше ФС по сравнению с клетками, выращиваемыми на стандартной среде МС.
Как видно из рис. 2.4. иммобилизация клеток в гранулы Са-альгинатного геля способствовала повышению содержания ФС в клетках только в стационарную фазу ростового цикла. На стандартной среде рост составил 2,8 раза, на продукционной – 2,5 раза, т.е. стимуляция достигалась примерно в равной степени
Рис. 2.4. Влияние типа питательной среды на содержание фенольных соединений в иммобилизованных клетках суспензионной культуры эхинацеи пурпурной
