- •1 Основные предпосылки возникновения биотехнологии.
- •4 Объекты биотехнологии и их биотехнологические функции
- •8. Основные этапы биотехнологических процессов: ферментация.
- •10. Генетического конструирования микроорганизмов: мутагенез и методы выделения мутантов.
- •11. Генетическое конструирование микроорганизмов: гибридизация эукариотических м/о, слияние протопластов.
- •12. Генетическое конструирование микроорганизмов: плазмиды и конъюгация у бактерий.
- •13. Генетическое конструирование микроорганизмов: фаги и трансдукция.
- •14. Генетическое конструирование микроорганизмов: транспозоны.
- •19. Биотехнология получения вторичных метаболитов: Получение антибиотиков
- •22. Б/т бродильных производств. Пропионово-кислое брожение: производство сыра.
- •23. Биотехнология бродильных производств. Ацетонобутиловое брожение: производство бутилового спирта и ацетона.
- •24. Иммобилизованные ферменты, их преимущества перед чистыми ферментами. Применение иммобилизованных ферментов.
- •25. Физические методы иммобилизации ферментов.
- •26 Химические методы иммобилизации ферментов
- •28. Биотехнология производства бактериальных энтомопатогенных препаратов
- •29. Биотехнология производства грибных энтомопатогенных препаратов.
- •31. Технология производства бактериальных удобрений
- •34.Состав пит . Среды. Основу пит . Ср. Составляют источники с, мин. Эл, и ростовыйфакторы.
- •35 Способы стерилизации в биотехнологии. Стерилизация растительных эксплантатов.
- •36. Каллусные и суспензионные культуры растительных клеток in vitro. Культура одиночных клеток
- •37. Морфогенез в культуре каллусных клеток растения
- •38. Изолированные протопласты, их получение, и особенности культивирование, применение
- •40.Методы бт растений в селекции и растениеводстве:Оплодотворение in vitro, эмбриокультура, эксперементальная гаплоидия.
- •41 Методы бт растений в селекции и растениеводстве: Гибридизация соматических клеток
- •42. Методы сохранения генофонда
- •43. Использование культур изолированных клеток и тканей для синтеза вторичных метаболитов.
- •44.Особенности культивирования клеток.
- •45. Методы б/т в животноводстве: трансплантация эмбрионов.
- •46. Методы б/т в животноводстве: оплодотворение in vitro.
- •50.Существует несколько типов векторов:
4 Объекты биотехнологии и их биотехнологические функции
Биотехнологические объекты находятся на разных ступенях организации:
а) субклеточные структуры (вирусы, плазмиды, ДНК митохондрий и хлоропластов, ядерная ДНК);
б) бактерии и цианобактерии; в) грибы; г) водоросли;
д) простейшие;е) культуры клеток растений и животных;
ж) растения – низшие (анабена-азолла) и высшие – рясковые.
Микроорганизмов, синтезирующих продукты или осуществляющих реакции, полезные для человека, несколько сотен видов. Биотехнологические функции бактерий разнообразны. Бактерии используются при производстве: - пищевых продуктов, например, уксуса, молочнокислых напитков (Lactobacillus,) и др.; - микробных инсектицидов (Bacillus); белка; - витаминов (Clostridium - рибофлавин); - растворителей и органических кислот; - биогаза и фотоводорода.
Широко используется такое свойство некоторых бактерий, как диазотрофность, то есть способность к фиксации атмосферного азота. Бактерии также широко используются в генноинженерных манипуляциях при создании геномных клонотек, введении генов в растительные клетки (агробактерии). К грибам относятся дрожжи и плесени. К дрожжам, сбраживающим лактозу, относится Kluyveromyces fragilis, который используют для получения спирта из сыворотки. Плесени вызывают многочисленные превращения в твердых средах, которые происходят пред брожением.
Пищевые продукты на основе сброженных плесневыми грибами Rhizopus oligosporus соевых бобов или пшеницы содержат в 5 - 7 раз больше таких витаминов, как рибофлавин, никотиновая кислота) и отличаются повышенным в несколько раз содержанием белка. Плесени также продуцируют ферменты, используемые в промышленности (амилазы, пектиназы и т.д.), органические кислоты и антибиотики. Их применяют и в производстве сыров, например, рокфора.
Простейшие относятся к числу нетрадиционных объектов биотехнологии. До недавнего времени они использовались лишь как компонент активного ила при при биологической очистке сточных вод. В настоящее время они привлекли внимание исследователей как продуценты биологически активных веществ. Водоросли используются, в основном, для получения белка. Весьма перспективны в этом отношении и культуры одноклеточных водорослей, в частности высокопродуктивных штаммов рода Chlorella и Scenedesmus. Их биомасса после соответствующей обработки используется в качестве добавки в рационы скота, а также в пищевых целях.
Растения в биотехнологии Водный папоротник азолла ценится как органическое азотное удобрение, Рясковые служат кормом для животных, для уток и других водоплавающих птиц, рыб, ондатры. Их используют и в свежем, и в сухом виде как ценный белковый корм для свиней и домашней птицы.
5.Основные направления развития биотехнологии. 1)БТ в медицине: генная инженерия, на которой основана генная терапия( исправления врожденных дефектов кл и организма человек путем введения в кл нормального генетического материала) известно более 4000 наслед заболеваний.
-фармакология: Антибиотики — самый большой класс фармацевтических соединений, синтез которых осуществляется микробными клетками.
2)С/Х биотехнология : -производство биоудобений и биопрепаратов для борьбы с вредителями; - Биологическая азотфиксация; - использование кл и тканей с целью ускорения и облегчения селекционного процесса и для криосохранения целых генотипов. – разработка биопестицидов, и др препаратов избирательно действующих на с/х культуры и безопасны для человека. –создание исходных материалов и на его основе сортов с/х культур.
3) БТв пищевой и молочной промышленности: - получение пищевого белка, - производство кисломолочных продуктов, -получение сахарозы и ее заменителей, - производство пищевых кислот (уксусная, лимонная, молочн), -дрожжи и продукты дрожжевого брожения( хлебобулочные, пивные дрожжи, пиво, вино)
4)биоэнергетика и биотехнология: -производство энергии из биомасссы с помощью МО, - производство биогаза, - производство жидкого топлива (этил. Спирт), -дополнит источник металлов (путем выщелачивания) в 90е годы пятая часть добычи меди путем выщелачивания из горных пород.
5)Экологическая: -повышение экологической чистоты различных производств путем снижения массы отходов, - биологическая очистка сточных вод, -биологическое разложение ксенобиотиков и токсических веществ, рекультивация почв.
6)Биоэнергетика: -для создания улучшеных типов биосесоров и новых приводящих устройств – биочипы (на поверхности электродов наносят к-либо МО или биологическ.ткань, которая является датчиком биолог и используется для определения концентрации уксусной кислоты. В качестве сенсоров моноклональные антитела, которые обладают высокой избирательностью. Производство биогаза путем метанового «брожения» отходов
6. Основные этапы биотехнологических процессов: приготовление питательных сред. Среда должна иметь оптемезированный под выращиваемую культуру состав и содержать все необходимые для нее компоненты. Состав: а) источники углерода – СО2, метан, вводятся в биореактор по определенной линии. Подаются по мере расходования. б) источники азота и фосфора – минеральные соли; в) источники макроэлиментов; г) источники микроэлиментов. Условия: соблюдение асептики, потдержание определенного рН, стерильность биореактора, подача минеральных и газообразных веществ через фильтры, спирт подается баз стерилизации .
Способы стерилизации питательных сред: а) термический: 120градусив С, под давлением; б) радиационный: используется если термический невозможен, дорогой, в основном применяется в мед. отрасли; основан на облуч-и матер-в больш. дозами ионизир. излуч.-гамма излуч. в) химический: чаще используют при малых производствах, необходимо подбирать вещество не токсичное для выращиваемой культуры; в-ва с сильн ассептич. дей-м. проблемы: усранение стериал. агента из пит. среды после гибели постор. микрофлоры и донесение инокулята продуцета. После стериализ-и хим. агенты долж. легко раз-я. Пропиолактон-сильное бактерицид. в-во. г) фильтрация: дорогой за счет того что необходимо менять фильтры.
7. Основные этапы биотехн-ких процессов: поддержание чистой культуры.
В лабораторном отделении чистой культуры проводят:
а) поддержание и хранение штампа продуктов;
б) контрольный высев;
в) маломасштабные ферментации
Все биотехнологические процессы можно разделить на: а) периодические процессы культивирования - подготовка определенной группы клеток к каждой операции; б) непрерывные процессы культивирования – необходимо через определенное время вносить штаммы инакулята.Служба микробиологического контроля при отборе штаммов проверяет их на устойчивость к фаголизису, чистоту реакторов, отслеживает все условия культивирования. Время генерации 15-20 мин. Для анализа необходимо наблюдать за морфологией клетки. Слабое место для биотехнологии – отследить состав культуры в определенный момент. Смена штаммов происходит при смене сырьевой базы. Необходима оптимизация условий культивирования. Нарушение условий чистой культуры м\о снижает экономич., технологич. показатели биотехнологич., производства, а в нек.случаях становится эксплуатация штамма. Поэтому при биотех.производстве существ. Лаборатории чистой культуры , котор. Решают ряд задач: 1.поддержание и хранение штаммов и продуктов , котор.рекоменд.к промышленному применению. 2 . первонач. Отбор штамма для технол. Производства с учетом его особенностей , котор., могут отразиться на экономии этого производства. (устоичивость к мутац. воздействиям ,фаголизису,к изм. Темпер и ph.) 3. Оптимизация типа среды для данного штамма и усл. выращивания. Подборка для конкр.субстрата и среды , штаммы, продуцент. Нужно учитывать сезонные изменения сырья. 4 .проведение контрольных высевов и маломасштаб.ферментаций, наработка инокулята в количествах необх для начала процесса.
