1. Приготовление нервно-мышечного препарата лягушки

Прежде чем приступить к этой работе, необходимо обездвижить лягушку. Нервно-мышечный препарат состоит из икроножной мышцы, бедренной косточки и седалищного нерва с кусочком позвоночника.

О с н а щ е н и е: препаровальный набор инструментов, раствор Рингера для холоднокровных, эфир, марля, вата. Работу проводят на лягушке.

С о д е р ж а н и е р а б о т ы: Разрушьте головной и спинной мозг лягушки.

1. Возьмите левой рукой лягушку за задние лапки, поверните её брюшком вниз и перережьте позвоночник на 1 - 1,5 см выше места прикрепления тазовых костей, которые в таком положении хорошо видны. Свисающую переднюю часть туловища и внутренности удалите.

2. Держа остаток позвоночника левой рукой, захватите кожу и снимите ее с лапок.

3. Для лучшей сохранности препарата лапки опустите в чашку Петри с раствором Рингера. С инструментов смойте остатки слизи с кожи лягушки, которая может раздражать препарат.

4. Осторожно вырежьте копчиковую кость и разделите препарат на две половины, отделив левую и правую лапки. Для этого подведите браншу ножниц под пояснично-крестцовое сочленение и отделите одну лапку ниже так, чтобы сочленение осталось соединенным с фрагментом позвоночного столба. Далее каждая из лапок может использоваться самостоятельно.

5. Расположите препарат задней поверхностью вверх. Раздвинув стеклянным крючком двуглавую и полуперепончатую мышцы, найдите на бедре седалищный нерв. Приподнимите его и на всем протяжении осторожно отделите от окружающих тканей.

6. Такой препарат называется реоскопической лапкой и используется для наблюдения биоэлектрических явлений в опытах Гальвани.

7 . Бедренную кость и мышцы бедра рассеките в двух местах: ниже тазобедренного и выше коленного суставов. Затем отделите икроножную мышцу: отрежьте сухожилие от пяточной кости, а ниже коленного сустава перережьте кости и все мышцы голени.

8. Пяточное сухожилие перевяжите ниткой. В результате получится нервно-мышечный препарат, который является универсальным для исследования функций скелетных мышц и нервов (Рис. 7)

Следует помнить, что при небрежном приготовлении препарата (прикосновении к нерву руками или металлическими предметами, натяжении, подсыхании или, механическом повреждение) препарат быстро теряет возбудимость. Поэтому во время проведения опыта необходимо часто увлажнять нерв и мышцу раствором Рингера.

Рис 7. Основные этапы приготовления нервно-мышечного препарата

Оформление протокола.

1. Зарисуйте основные этапы приготовления нервно-мышечного препарата лягушки.

2. Укажите физиологическую роль каждой части нервно-мышечного препарата, имеющей значение для наблюдения биоэлектрических явлений:

2. Наблюдение биоэлектрических явлений

Впервые биоэлектрические явления в живых тканях наблюдал итальянский физиолог Луиджи Гальвани, который в 1786 г. при изучении влияния атмосферного электричества на живой организм размещал на железной решетке балкона задние лапки лягушки, закрепленные на медных крючках. При соприкосновении лапок с железной решеткой балкона наблюдалось сокращение мышц. На основании анализа этих наблюдений Гальвани высказал мысль о существовании «животного электричества». Но Вольта доказал, что в этом опыте причиной сокращения лапок лягушки был ток, возникающий между двумя разными металлами. В настоящее время опыт, в котором сокращение мышцы возникает при прикосновении к ней или к иннервирующему ее нерву пинцетом, состоящим из двух разнородных металлов, получил название первого опыта Гальвани.

Пытаясь отстоять свою теорию Гальвани в 1794 г. проделал второй опыт, уже без металлов. Приподнимая нерв нервно-мышечного препарата стеклянным крючком, он набрасывал его на поврежденный участок мышцы и наблюдал ее сокращение. Так было доказано наличие «животного электричества» - тока покоя. Позднее Матеуччи представил другие доказательства наличия биопотенциалов в эксперименте, получившем название опыта вторичного сокращения или опыта Матеуччи, где источником сокращения мышцы одной реоскопической лапки служит сокращающаяся мышцы другой. При этом нет необходимости повреждать мышцу.

Использование в этом опыте электростимулятора, часто вызывает затруднения в объяснении истинных причин сокращения лапки второго препарата. Поэтому целесообразно, хотя бы демонстрационно провести более изящный вариантом опыта Матеуччи, которым является опыт Келликера, с набрасыванием нерва на работающее сердце.

Этот опыт был проделан значительно позже, и не с целью доказательства наличия «живого электричества», однако наглядно демонстрирует вторичное сокращение мышцы без использования лабораторного электростимулятора, и доказывает, что источником тока вызывающего возбуждение, является именно сокращающаяся мышца.

Проделайте опыты Гальвани и Матеуччи и Келликера.

О с н а щ е н и е : препаровальный набор инструментов, стеклянные крючки, гальванический пинцет, электростимулятор, раствор Рингера для холоднокровных, эфир, марля, вата. Работу проводят на лягушке.

С о д е р ж а н и е р а б о т ы :