1.1 Реакция Фоля

Реакция Фоля доказывает наличие серы в составе белков.

При добавлении к раствору белка концентрированного раствора щелочи и уксуснокислого свинца с последующим кипячением наблюдается потемнение раствора. Реакция обусловлена присутствием в белке серосодержащих кислот: цистеина и метионина. Эти аминокислоты при нагревании в присутствии концентрированной щелочи разрушаются, образуя сернистый натрий.

Уксуснокислый свинец взаимодействует с избытком едкой щелочи с образованием тетрагидроксоплюмбата(II) натрия

Сернистый натрий при взаимодействии с тетрагидроксоплюмбатом(II) натрия образует черный осадок сернистого свинца

Ход работы:

В одну пробирку вносят 0,5 мл 1%-ного раствора яичного белка, во вторую – 0,5 мл 1%-ного раствора желатина. В каждую пробирку добавляют по 0,5 мл 30%-ного раствора гидроксида натрия и по 50 мкл 5%-ного раствора уксуснокислого свинца. При интенсивном кипячении жидкость с яичным белком темнеет, образуя черный осадок сернистого свинца. В пробирке с желатиной черного осадка не образуется, так как желатин почти не содержит серосодержащих аминокислот.

1.2 Реакция Адамкевича

Реакция Адамкевича демонстрирует присутствие аминокислоты триптофана в составе белка. При добавлении к раствору белка незначительных количеств глиоксиловой кислоты в присутствие крепкой серной кислоты получается красно-фиолетовое окрашивание.

Реакция основана на способности триптофана в кислой среде взаимодействовать с альдегидами, образуя при этом окрашенные продукты конденсации

Глиоксиловая кислота всегда присутствует в небольших количествах в ледяной уксусной кислоте, поэтому последнюю используют в реакции Адамкевича, как источник глиоксиловой кислоты

Ход работы

В одну пробирку наливают 0,5 мл 1%-ного раствора яичного белка, во вторую – 0,5 мл 1%-ного раствора желатина. В каждую пробирку добавляют по 0,5 мл концентрированной уксусной кислоты. Раствор сначала нагревают, затем охлаждают и по стенке пробирки осторожно, чтобы жидкости не смешивались (подслоение) прибавляют 5 капель концентрированной серной кислоты. При стоянии в пробирке с яичным белком на границе двух слоев жидкости наблюдается красно-фиолетовое окрашивание в виде кольца. Появление окраски можно ускорить, поместив пробирку в кипящую водяную баню. В пробирке с раствором желатина окрашивание не происходит, так как этот белок не содержит триптофана.

1.3 Реакция Сакагучи

Реакция Сакагучи позволяет открывать гуанидиновую группировку. Гуанидиновая группировка входит в состав аминокислоты аргинина, по этой причине белки также дают положительную реакцию Сакагучи. Белки в присутствии щелочи дают красное окрашивание с гипобромитом и α-нафтолом.

Механизм реакции Сакагучи не известен. Вероятно, гуанидиновая группировка окисляется гипобромитом и окисленный аргинин, соединяясь с α-нафтолом, образует продукт конденсации красного цвета

Ход работы

В одну пробирку наливают 0,5 мл 1%-ного раствора яичного белка, в другую – 0,5 мл 1%-ного раствора желатина. Затем, в каждую пробирку добавляют по 0,5 мл 10%-ного раствора гидроксида натрия, по 3 капли 0,1%-ного спиртового раствора α-нафтола и 0,5 мл 2%-ного раствора гипобромита натрия. Жидкость в пробирке с раствором яичного белка приобретает красный цвет.