Вимоги до індикаторним організмам:

1 Відповідати на вплив середовища (або знезараження подібно патогенним мікроорганізмам).

2. Постійно присутні у великих кількостях в порівнянні з патогенними мікроорганізмами.

3. Надходять з того ж джерела що і патогенні мікроорганізми.

4. Легко виділяються і підраховуються.

     

            Значна частина патогенних мікроорганізмів потрапляє у водні об'єкти з фекаліями людини і тварин. Ці забруднення, незалежно від наявності в них патогенних мікробів, завжди містять непатогенний мікроорганізм - кишкову паличку (Escherichia Coli), постійно присутню в кишечнику людини і теплокровних тварин. Кількість кишкових паличок у воді характеризує ступінь її забруднення фекальними стоками.

показники

Мікробне число - як критерій бактеріологічної забрудненості використовують підрахунок загального числа утворюючих колонії бактерій (Colony forming Units - CFU) в 1 мл води. Отримане значення називають загальним мікробним числом.

• Мікробне число артезіанських вод не перевищує 10-30 в 1 мл.

• В шахтних колодязях показник становить 200-400 на 1 мл,

• В чистих водоймах - 1000 на 1 мл,

• У водопровідній воді, після знезараження - 100 на 1 мл.

В основному для виділення бактерій і підрахунку загального мікробного числа використовують метод фільтрації через мембрану.

При цьому методі аналізу води певну кількість води пропускається через спеціальну мембрану з розміром пір порядку 0.45 мкм. В результаті, на поверхні мембрани залишаються все знаходяться у воді бактерії. Після чого мембрану з бактеріями поміщають на певний час в спеціальну живильне середовище при температурі 30-37 оС. Під час цього періоду, званого інкубаційним, бактерії отримують можливість розмножитися і утворити добре помітні колонії, які вже легко піддаються підрахунку.

Так як такий метод аналізу води передбачає тільки визначення загального числа колонії - утворюючих бактерій різних типів, то за його результатами не можна однозначно судити про присутність у воді патогенних мікробів. Однак, високе мікробне число свідчить про загальну бактеріологічної забрудненості води і про високу ймовірність наявності патогенних організмів.

Визначення E. coli та її групи є важливим, тому що вони виділяються з екскрементами людей і тварин і є доказом фекального забруднення. Це відносний показник ризику кишкових інфекцій з водним шляхом передачі.

  Для оцінки забрудненості води патогенними бактеріями визначають вміст в ній кишкової палички. Бактеріальне забруднення вимірюють колі-титром і колі-індексом.

Колі-титр - обьем води, в якому міститься одна кишкова паличка.

Колі-індекс - число кишкових паличок, що містяться в 1 л води.

вододжерело	Колі-титр	Колі-індекс
артезіанська	500 мл	не более 2
шахтні колодязі	100 мл	не более 10
водопровід	не менее 300	3

Для отримання більш точних даних про наявність фекального забруднення об'єктів і його ступеня вважається доцільним поряд з визначенням колі-титру (колі-індексу) проводити одночасний кількісний облік в досліджуваному матеріалі та інших санітарно-показових мікроорганізмів (наприклад, протея, ентерококів, спорових анаеробів, кишкових бактеріофагів).

Для визначення колі-індексу використовують метод мембранних фільтрів або безпосередній посів різних кількостей досліджуваного матеріалу на щільні поживні середовища. Суть методу мембранних фільтрів полягає в фільтруванні певних обсягів досліджуваної рідини (або твердого речовини, розведеного у воді) через мембранні фільтри №2 або №3, на яких затримуються бактерії. Фільтри переносять на чашки з середовищем Ендо, інкубіруемой при t ° 37 °, а потім досліджують вирослі на поверхні фільтра темно-червоні з металевим блиском, рожеві і прозорі колонії. З колоній кожного типу готують мазки і фарбують їх по Граму. Колонії різних типів перевіряють на оксидазную активність, яка повинна бути негативною. Безбарвні і рожеві колонії додатково засівають на напіврідку середу з глюкозою і індикатором, на якій протягом 24-годинної інкубації при t ° 37 ° повинні утворюватися кислота і газ. Для визначення колі-індексу підраховують вирослі на фільтрі колонії кишкової палички і потім проводять перерахунок на 1 л, 1 кг або 1 г в залежності від досліджуваного матеріалу.

Колі-титр визначають бродильним методом, що полягає в посіві певних об'ємів досліджуваного субстрату на середовища накопичення (глюкозопептонную або лактозопептонную з індикатором і поплавком і інші подібні середовища), які витримують t ° 37 °. Великі обсяги засівають на концентровану середу, малі обсяги - в пробірки з середовищем нормальної концентрації. З усіх помутнілих пробірок незалежно від освіти кислоти і газу роблять висів на середовище Ендо з подальшою Индентификация вирослих колоній. Орієнтовно за колі-титр приймають той найменший обсяг, при посіві якого на середовища накопичення виявлені кишкові палички.