- •Введение
- •Исторические аспекты становления и развития патологии
- •I период – с III тыс. До н.Э. - до 1540 –х г.Г.
- •II период - новый период, 1540-е–1850-е гг.
- •III период - 1863–1924 гг.
- •IV период - 1924–1950 гг.
- •V период – с 1950 г. – по настоящее время
- •Методы исследования в патологии
- •Цитологическое исследование мазков, соскобов
Методы исследования в патологии
Патологическая анатомия использует три основных метода исследования 1) вскрытие трупов людей, умерших от болезней;
2) микроскопические методы изучения тканей;
3) эксперимент, позволяющий моделировать на животных патологические процессы и болезни.
АУТОПСИЯ - вскрытие трупов – метод морфологического исследования, позволяющий представлять болезнь, как морфологический субстрат, соответствующий нарушениям функций и клиническим проявлениям болезни в её динамике, при выздоровлении, инвалидизации или смерти больного.
Вскрытие обязательно предусматривает составление патологоанатомического диагноза, который строится по тем же принципам, что и клинический диагноз. Это позволяет:
а) сравнивать клинический и патологоанатомический диагнозы,
б) констатировать их совпадение или расхождение,
в) результаты аутопсии, зафиксированные в протоколе вскрытия, позволяют проводить анализ ведения больного в клинике в тех случаях, когда речь может идти о врачебных преступлениях,
г) дают возможность вести научные исследования и разрабатывать статистические данные.
Методы аутопсии.
1) способ Рудольф фон Вирхов (извлечение органов по отдельности; недостатки - при таком способе - нарушаются анатомические связи между органами, что в ряде случаев может привести к ошибке).
2) способ А.И. Абрикосов (предложил вести вскрытие, следуя топографическому расположению органов, которые при этом делятся на пять систем и извлекаются в пять приёмов. Недостаток метода - приводит к расчленению анатомо-физиологических систем на фрагменты).
3) способ Г.В. Шора (органы выделяют целым органокомплексом, сохраняя естественные связи между органами, а также изменения в их топографии, возникшие в результате операции, определяются пределы прорастания опухоли и т.п.).
БИОПСИЯ - прижизненное взятие тканей, органов или взвеси клеток для микроскопического исследования с диагностической целью, а также для изучения динамики патологического процесса и влияния на него лечебных мероприятий. В зависимости от способа взятия материала выделяют:
а) инцизионную биопсию - часть ткани из органа или целый орган иссекают хирургическим путём,
б) пункционную биопсию - столбик ткани из органа получают с помощью специальной иглы или троакара (например: трепанобиопсия),
в) эндоскопическую биопсию желудка, кишечника и бронхов,
г) аспирационную биопсию применяют для исследования жидкого содержимого полых органов или аспирата, полученного из полостей тела с помощью специальных инструментов (цитологическое исследование).
МИКРОСКОПИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
СМ – световая микроскопия |
ЭМ - электронная микроскопия |
- основывается на таких факторах, как: 1) разрешающая способность микроскопа, 2) направленность светового луча, 3) особенности изучаемого объекта (прозрачность и непрозрачность) |
- изображение объектов исследования обеспечивает поток электронов, проходящих в вакууме через электромагнитные поля, создаваемые электро-магнитными линзами |
- разновидности СМ: а) фазовоконтрастная - при исследовании простейших, клеток растений и животных, при подсчёте и дифференцировке клеток костного мозга и периферической крови, при изучении клеток культуры тканей и др., основана на дифракции луча света в зависимости от особенностей объекта изучения, б) интерференционная - позволяет выявлять различные Аг и их концентрацию в клетках, при этом возможна идентификация вирусов, определение АТ и иммунных комплексов, гормонов, различных продуктов метаболизма и др, в) люминесцентная основана на свойстве веществ давать свечение в УФ-лучах или в сине-фиолетовой части спектра света (простые белки, коферменты, некоторые витамины, лекарственные средства (ЛС) и вещества, люминесцирующие при добавлении к ним специальных красителей - флюорохромов), применяют для диагностики вирусных инфекций, с помощью вторичной люминесценции диагностируют злокачественные опухоли в гистологических и цитологических препаратах, определяют очаги ишемии мышцы сердца при ранних сроках инфаркта миокарда, выявляют амилоид в биоптатах тканей, г) поляризационная - позволяет изучать биологические объекты (как окрашенные, так и неокрашенные и нефиксированные (нативные) срезы тканей) в свете, образованном двумя лучами, поляризованными во взаимно перпендикулярных плоскостях, д) ультрафиолетовая и инфракрасная основаны на способности поглощения УФ- (высокомолекулярные соединения, такие как нуклеиновые кислоты, белки, ароматические аминокислоты (тирозин, триптофан, метилаланин), пуриновые и пиримидиновые основания и др.) и инфракрасных лучей определённых длин волн некоторыми веществами, входящими в состав живых клеток, микроорганизмов или фиксированных, но не окрашенных тканей, прозрачных в видимом свете. |
- применяют для изучения структуры клеток, микроорганизмов и вирусов на субклеточном и макромолекулярном уровнях, |
а) трансмиссионная (просвечивающая) - электроны проходят через структуры исследуемого объекта, получают плоскостное изображение внутриклеточных структур, б) сканирующая - электроны отражаются от структур исследуемого объекта, отклоняясь под разными углами, получают объёмное изображение внутриклеточных структур. Исследуют поверхность биологических и небиологических объектов, напыляя в вакуумной камере на их поверхность электроноплотные вещества и изучая эти реплики, повторяющие контуры объекта исследования.
|
|
Требуется специальная химическая или физическая фиксация тканей. Для исследования берут в основном биопсийный материал. Может быть использован и секционный материал, но в максимально короткие сроки после смерти, обычно исчисляемые минутами. Для приготовления биопсийного материала требуются специальные методы, а также нарезка стеклянными или алмазными ножами на ультратомах. При этом получают ультратонкие срезы тканей толщиной 30–50 нм. Их контрастируют, переносят на специальные металлические сетки и затем изучают в ЭМ.
|
|
-10% нейтральный забуференный формалин, - спец. фиксирующие жидкости - Буэна, Карнуа |