5. Назначение реакции:

а) серодиагностика (примеры);

б) сероидентификация (примеры).

а) серодиагностика:

Серодиагностика- это метод определения неизвестных антител, находящихся в исследуемой сыворотке, с помощью известных антигенов, находящихся в диагностикумах.

Примеры:

Выявление инфицированных вирусом иммунодефицита человека (ВИЧ), вирусом гепатита В,С (HBV), диагностика краснухи и цитомегаловирусной инфекции,кори, иерсиниоза, паротита

б) сероидентификация

Сероидентификация- это метод определения неизвестных антигенов, находящихся в чистой культуре микробов, с помощью известных антител . находящихся в диагностической сыворотке

Примеры: сероидентификация сальмонелл, вируса гриппа.

17. Характеристика возбудителя чумы; эпидемиология, патогенез, клиника, иммунитет. Принципы лабораторной диагностики. Препараты для специфической профилактики и лечения.

1. Характеристика возбудителя:

а) таксономия;

б) морфологические и тинкториальные свойства;

в) антигенная структура;

г) культивирование;

д) ферментативные свойства;

е) резистентность;

ж) факторы патогенности;

з) патогенность для животных.

1. Характеристика возбудителя:

а) таксономия

Холерный вибрион относится к отделу Gracilicutes, семейству Vibrionaceae,

роду Vibrio. Внутри вида Vibrio cholerae различают 2 основных биовара: biovar cholerae classic (выделенный Р. Кохом) и biovar eltor (открытый Ф. и Е. Готшлихами).

б) морфологические и тинкториальные свойства

Морфология. . Холерный вибрион -небольшая грамотрицательная изогнутая палочка длиной 2.4 мкм, толщиной 0,5 мкм ,имеет один полярный жгутик, часто напоминает запятую (запятая Коха). Важный диагностический признак - подвижность (определяют микроскопией по методу висячей или раздавленной капли). Морфологически изменчивы. Тинкториальные свойства .Хорошо окрашиваются водным фуксином Пффейфера и карболовым фуксином Циля.

в) антигенная структура

Холерный вибрион имеет О- и Н-анти-гены; в зависимости от строения

О-антигена у него различают более 150 серогрупп. Возбудитель холеры относится к серогруппам О1 и О139 (его обозначение V. cholerae O1 и V. cholerae 0139), все другие представители вида V. cholerae не являются возбудителями холеры, но могут вызывать,например, гастроэнтериты. О-антиген состоит из 3 компонентов: А, В и С. В зависимости от их сочетания различают 3 серовара возбудителя холеры . Огава (АВ), Инаба (АС) и Гикошима (ABC). Н-анти-ген неспецифичен для V. cholerae, он является общим для всего рода Vibrio.

г) культивирование

Факультативный анаэроб. Холерный вибрион неприхотлив к питательным средам. Хорошо размножается на 1% щелочной (рН 8,6-9,0) пептонной воде, опережая бактерии кишечной группы (среда обогащения), образует нежную голубоватую пленку и муть. Для подавления роста протея и некоторых других микроорганизмов используют пептонную воду с добавлением теллурита калия. Оптимальные температура для его роста 37 °С и рН (в отличие от других бактерий) 8,5—9,0.

На плотных средах холерный вибрион образует гладкие стекловидные, прозрачные с голубоватым оттенком дисковидные колонии вязкой консистенции. Используют щелочной агар, желчно - солевой агар, щелочной агар с кровью, наилучшей является TCBS - агар (агар с тиосульфатом, цитратом, солями желчных кислот и сахарозой).

д) ферментативные свойства

Холерный вибрион сбраживает с образованием кислоты без газа многие углеводы (глюкозу, сахарозу, маннозу, маннит, лактозу, левулезу, гликоген, крахмал). Холерный вибрион разлагает желатин, казеин, свертывает молоко и разлагает белковые препараты до индола и аммиака.

При идентификации важным является отношение холерного вибриона к маннозе, арабинозе и сахарозе. По отношению к этим трем сахарам (триада Хейберга) - сахарозе, маннозе и арабинозе ,по способности их ферментировать семейство Vibrionaceae делят на 8 групп. Холерный вибрион относится к первой группе (манноза+, арабиноза-, сахароза+).

е) резистентность

Более устойчивым к нагреванию, действию солнечных лучей, дезинфицирующим средствам является биовар eltor, хотя его резистентность сравнительно невысока. Очень чувствителен холерный вибрион к кислотам.

Вибрионы плохо переносят высушивание. Долго сохраняются в водоемах, пищевых продуктах. Биовар Эль-Тор более устойчив в окружающей среде, чем классический вибрион.

V. eltor может расти и использовать питательные вещества при температуре не ниже 10-12° С. Температура поверхностных слоев воды 9° С является уже критической для выживания вибрионов в естественных водоемах. Сохранение холерного вибриона в этих случаях может происходить в иловых отложениях, характеризующихся более стабильной температурой и значительным содержанием органических веществ, а с наступлением теплого периода происходит активная миграция вибрионов в зону оптимального кислородного режима, сохраняющегося в поверхностных слоях.

ж) факторы патогенности

-жгутики - активное продвижение бактерий к энтероцитам в слое слизи;

-адгезивность - пили;

-капсула у штамма Бенгал;

-токсины: 1 типа - эндотоксин (О-АГ), 2 типа - экзоэнтеротоксин - холероген, основной признак; идентичен у всех трех возбудителей. 2 субъединицы: В - нетоксична, способствует адгезии токсина к энтероцитам; А - собственно токсин, проникает в энтероциты, где активирует АЦ, что приводит к накоплению цАМФ, который усиливает секрецию воды, натрия и хлора из клеток и нарушает всасывание калия; 3 типа - термостабильный токсин, поражает натрий-калиевую АТФазу; в результате - диарея, резкое обезвоживание организма;

-нейраминидаза - способствует адгезии вибрионов на энтероцитах и проникновению в клетку;

-высокая кинетика размножения.

з) патогенность для животных

Оба биотипа холерного вибриона патогенны только для человека. В естественных условиях животные не болеют холерой.

2. Эпидемиология холеры. Источник, механизмы, пути передачи инфекции, восприимчивость населения.

3. Патогенез.

4. Клиника.

5. Иммунитет.

6. Лабораторная диагностика. Материал для исследования. Бактериоскопический, бактериологический, биологический методы диагностики. Экспресс-методы диагностики (РИФ, РНГА, метод Коробковой). Серологический метод (РНГА, ИФА). Аллергическая проба (для ретроспективной диагностики).

Эпидемиология:

- источник:

Источником инфекции является больной с манифестным или бессимптомным течением заболевания. Наиболее активными вибрионовыделителями являются больные с тяжелым течением заболевания, выделяющие до 10 л испражнений в сутки, в каждом миллилитре которых содержится до 1000000000 вибрионов. В то же время больные с бессимптомным и стертым течением холеры, при отсутствии своевременной диагностики, выделяют возбудитель во внешнюю среду длительное время.

-механизмы передачи:

Механизм заражения холерой - фекально-оральный.

- пути передачи:

водный, алиментарный, контактно-бытовой. Водный путь имеет решающее значение для быстрого эпидемического и пандемического распространения холеры. При этом не только питье воды, но использование ее для хозяйственных нужд (мытье овощей, фруктов и т. п.) может приводить к заражению холерой.

- восприимчивость населения:

Наиболее восприимчивы к холере иммунокомпрометированные люди, лица с гипо- и ахлоргидрией.