Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
ОСНОВЫ иммунодиагностики (5 занятие).docx
Скачиваний:
0
Добавлен:
01.07.2025
Размер:
29 Кб
Скачать
☆

Получение моноклональных антител

Другим способом получения индивидуальных антител определенной сᴨȇцифичности служит гибридомная технология -- создание иммортали-зованной линии клеток, продуцирующих антитела только одной сᴨȇцифичности, т. е. моноклональные. В такой культуре можно поддерживать антителообразование неопределенно долгое время. Моноклональные антитела несравнимо лучше соответствуют целям иммуноанализа, чем гетерогенные сыворотки, получаемые от иммунных животных, и в связи с этим нашли широкое применение в различных областях биологии в качестве высокосᴨȇцифичных зондов.

Эффективно продуцировать моноклональные антитела могут любые В-клетки, необходимо лишь сделать их для этого бессмертными и пролиферирующими. Чаще всего для этой цели получают гибридные клетки -- путем слияния мышиных спленоцитов с миеломными В-клетками от мышей той же линии, не секретирующими собственных антител.  Возможно также получить межлинейные или межвидовые гибриды, однако они часто нестабильны. Другой метод иммортализации -- это трансформация клеток, например в случае В-клеток человека путем инфицирования вирусом Эпштейна--Барр.

Разработан также новый метод получения антител, основанный на использовании бактериофагов. С помощью этого интересного метода удается получить экспрессию на поверхности нитевидного бактериофага М13 вариабельных областей в виде фрагментов антител, связывающих антиген с определенной сᴨȇцифичностью и авидностью. Располагая библиотекой таких экспрессируемых бактериофагом фрагментов, можно производить отбор фаговых частиц, продуцирующих тот или иной Fv-фрагмент. Кроме того, если данным бактериофагом инфицировать соответствующие бактерии, они начинают выделять Fv-белок в большом количестве в культуральную среду. Такой подход не требует обязательной иммунизации животных или человека.