Работа 1. Определение полового хроматина в ядрах клеток слизистой оболочки полости рта

Слизистую оболочку щеки протереть ватным тампоном и быстрым движением металлического штапеля сделать соскоб. Полученный материал нанести тонким слоем на чистое предметное стекло, добавить 1-2 капли 2% - ного раствора ацетоорсеина и накрыть покровным стеклом. Спустя 1-2 мин на покровное стекло положить полоску фильтровальной бумаги и надавить на неё большими пальцами обеих рук. При этом избыток красителя остаётся на фильтровальной бумаге, покровное стекло плотно прижимается к предметному и мазок готов для исследования. Под иммерсионной системой микроскопа просмотреть 100 ядер, учитывая среди них хроматинположительные. Половой хроматин в виде слегка выпуклого тёмного тельца, ледащего у ядерной мембраны, определяется в крупных шиповидных клетках, имеющих круглые или овальные ядра. В норме число хроматинположительных ядер колеблется у женщин от 20 до 80%.

Работа 2. Проба Фелинга для выявления фенилкетонурии

В работах 2-3 используются моча здорового человека (контрольная проба) и моча с добавлением исследуемых метаболитов (опытная проба).

К 2 мл мочи прибавить 6 капель 10% - ного раствора хлорного железа. Наличие сине-зелёной или серо-зелёной окраски говорит о положительном результате пробы (реакция положительна, если уровень фенилаланина выше 15 мг%).

Работа 3. Проба с 2,4-динитрофенилгидразином (2,4-ДНФГ) на кетокислоты

В пробирке смешать 5 капель мочи и 20 капель 0,2% - ного раствора 2,4-ДНФГ в 2N HCl. Через 10 мин прибавить равный объём этилового эфира. После смешивания эфир отсосать и перенести в другую пробирку, куда прилить равный объём 10% - ного раствора карбоната натрия. Содержимое пробирки перемешать. Появление жёлтой окраски нижнего слоя рассматривается как положительная реакция, свидетельствующая о наличии в моче фенилпировиноградной, имидазолпировиноградной, пировиноградной и других кетокислот.

Сделать выводы. Результаты наблюдений отразить в протоколе.

Материалы для самоконтроля. I. Вопросы по теме занятия

1. Какова роль наследственный факторов в патологии человека?

2. В чем различие наследственнх болезней и болезней с наследственным предрасположением?

3. Каковы возможные причины возникновения анэуплоидии и хромосомных аномалий?

4. Каково значение анализа кариотипа в диагностике хромосомных болезней человека?

5. Каково диагностическое значение исследования Х- и У-полового хроматина?

6. Какова этиология молекулярных болезней?

5. Каковы фенотипические проявления мутаций функционально различных участков генома?

5. Каковы последствия нарушения посттранскрипционной модификации РНК?

6. Что такое скрининг-тесты? Каковы принципы скринирования энзимопатий?

II. Тесты по теме занятия

1. Что означает термин «сбалансированная транслокация»:

а) отсутствие изменения генотипа,

б) отсутствие изменения фенотипа,

в) перенос участка хромосомы на другую хромосому,

г) обмен участками хромосом.

2. Мутация соматических клеток может привести к:

а) формированию наследственного предрасположения,

б) развитию наследственного заболевания,

в) трансформации нормальной клетки в опухолевую,

г) появлению фенокопии.

3. Что лежит в основе молекулярных болезней:

а) геномные мутации,

б) хромосомные аномалии,

в) генные мутации,

г) нарушение взаимодействия аллельных генов?

4. Нарушение сплайсинга ведёт к:

а) генной мутации,

б) нарушению транскрипции,

в) изменению конформации белка,

г) изменению первичной структуры белка.

5. Что такое «энхансер»:

а) белок, регулирующий функции генов,

б) участок ДНК, усиливающий транскрипцию,

в) участок ДНК, усиливающий трансляцию,

г) место связывания РНК-полимеразы?