Техника изготовления временного микропрепарата.

Возьмите из чашки Петри чистое предметное стекло, держа его за боковые грани, поместите в центре стекла в капле воды объ­ект — кусочек листа элодеи. Затем возьмите (обязательно за бо­ковые грани) покровное стекло и положите его сверху на объ­ект.

Правила оформления лабораторной работы.

Необходимым элементом микроскопического изучения объекта является его зарисовка в альбом. Цель зарисовки – лучше понять и закрепить в памяти строение объекта, форму отдельных структур, их взаимное расположение.

Для выполнения зарисовок необходимо иметь альбом (оптимальный формат 30х21 см) и карандаши (простой и цветные).

Поскольку рисование на занятиях по биологии не самоцель, а метод изучения объекта, при зарисовке следует придерживаться ряда правил.

1. Рисовать можно только на одной стороне листа, так как рисунки, сделанные на обеих сторонах, накладываются друг на друга и со временем портятся

2. До начала зарисовки вверху страницы следует записать название темы. Если изучается зоологический объект, то надо указать название типа, подтипа и класса, к которому он относится в соответствии с международной номенклатурой. Каждое из этих названий (тип, подтип, класс) пишется на отдельной строке по-русски и по-латыни.

3. Рисунок должен быть крупным, детали хорошо различимы. На одной странице не должно быть более 3-4 рисунков, если объекты простые; если объект сложный и крупный (вскрытая лягушка, вскрытая крыса), то делают только один рисунок на странице.

4. Главное требование к рисунку – правильное отображение формы, соотношение объема и размеров (длина, ширина, и др.) отдельных частей и целого объекта. Чтобы легче добиться этого, сначала зарисуйте общий контур объекта (крупно) , затем внутри слегка наметьте контуры остальных деталей и лишь после этого вырисовывайте их четко.

5. Правильное отражение соотношения размеров изучаемого объекта позволит выполнить и второе требование – показать индивидуальные особенности объекта, т.е. зарисовать не абстрактную клетку, амебу и т.д. Это очень важно, так как приучает будущего врача к наблюдательности, учит видеть наряду с общим - индивидуальное.

6. Вокруг рисунка не нужно рисовать контуров поля зрения микроскопа.

7. К каждому рисунку обязательно должны быть сделаны обозначения его отдельных частей. Надписи к рисунку выполняются только простым карандашом.

Обозначения можно делать двумя способами :

а) к отдельным частям объекта ставят стрелочки и против каждой пишут название. Все надписи должны быть расположены параллельно друг другу;

б) к отдельным частям объекта ставят стрелочку и против каждой пишут определенную цифру, затем сбоку от рисунка или под ним столбиком по вертикали пишут цифры, а против цифр – название.

8. Если работа выполнена правильно, то в конце занятия ее подписывает преподаватель. Если работа не соответствует предъявленным требованиям, то ее необходимо переделать.

Работа 2. Химический состав клетки.

Изучите и перепишите табл. 1.

Таблица 1

Химические соединения

Их функции

Неорганические вещества: вода минеральные соли Органические вещества: Белки углеводы липиды нуклеиновые кислоты АФТ

Основная среда для передвижения ве­ществ и протекания биохимических реак­ций, растворитель, дисперсионная среда коллоидной системы, источник водорода и кислорода при фотосинтезе, для под­держания теплового режима. Участвуют в поддержании осмотического давления и кислотно-основного состоя ния, активизируют ферменты цитоплаз­мы, влияют на возбудимость клетки. Структурная, защитная, ферментатинная. сократительная, рецепторная, регуляторная, транспортная, сигнальная Структурная, энергетическая, защитная, запасающая Структурная, энергетическая, запасаю­щая, регуляторная, источник эндогенной воды Обеспечивают хранение и передачу на­следственной информации Главный источник энергии в клетке

Работа 3. Сравнительная характеристика прокариотических и эукариотических клеток

Изучите и перепишите табл. 2.

Таблица 2

Характерные особенности	Прокариотические клетки	Эукариотические клетки
Поверхностный аппарат клетки: надмембранные структуры плазматическая мембрана субмембранные структуры Органеллы цитоплазмы Ядерный аппарат	Образованы клеточной стенкой, содержат упрочняющий материал-муреин. Снаружи от клеточной стенки у ряда бактерий располагается капсула Имеется. Образует впячивания внутрь цитоплазмы-мезосомы и тилакоиды Не выражены Рибосомы Ядро отсутствует. Нуклеоид – одна кольцевидная хромосома, расположенная в цитоплазме. Сочтоит из ДНК и небольшого количества белков	У растительных клеток образованы клеточной стенкой, содержащей целлюло­зу, а у животных клеток — гл и кокал иксом, состоя­щим из молекул гликолипидов и гликопротеидов Образуют опорно-сократительную систему, состоя­щую из микрофибрилл и микротрубочек Эндоплазматическая сеть, центросома, митохондрии, пластинчатый комплекс, рибосомы, лизосомы. Растительные клетки имеют вакуоли и пластиды Ядро имеет двухмембранную оболочку, кариоплазму, хроматин (хромосомы), ядрышки. Хромосомы со стоят из ДНК и белков

Работа 4. Строение поверхностного аппарата животной клетки (по А.А. Заварзину, 1982)

Изучите по рис. 1 и зарисуйте молекулярную структуру по­верхностного аппарата.

Рис. 1. Строение поверхностных структур животной клетки.

1 - поверхностный аппарат клетки; 2 - надмембранные структуры (гликокаликс); 3 - плазматическая мембрана; 4 - субмембранные структуры (микрофиламенты и микротрубочки); 5 - билипидный слой; 6 - интегральный белок; 1 - полуинтегральный белок; 8 - туннельный белок; 9 - поверхностный бе­лок; 10, 11 - гликопротеиды и гликолипиды гликокаликса.

Работа 5. Органеллы эукариотических клеток

Заполните табл. 3, указав функции перечисленных органелл.

Таблица 3

Органеллы	Их функции
Эндоплазматическая сеть: а) гладкая; б) гранулярная Рибосомы Митохондрии Пластинчатый комплекс Центросома Лизосомы Пластиды

Работа 6. Строение бактерии

Изучите по рис. 2 строение прокариотической (бактериаль­ной) клетки.

Рис. 2. Строение прокариотической клетки.

1 - жгутик; 2 - рибосомы; 3 - запасные питательные вещества; 4 - капсула; 5 - плазматическая мембрана; 6 - кольцевая молекула ДНК (нуклеоид); 7 - стенка клетки; 8 - мезосома; 9 - цитоплазма; 10 - тилакоиды (фотосинтети­ческие мембраны).

Работа 7. Ультрамикроскопическое строение животной и растительной клетки

Изучите по рис. 3 строение эукариотических клеток.

Работа 8. Строение растительной клетки. Клетка пленки лука.

С внутренней стороны мягкой чешуи отделите тонкую про­зрачную пленку. Небольшой кусочек этой пленки поместите на предметное стекло в каплю раствора Люголя, накройте объект покровным стеклом и рассмотрите под малым увеличением микроскопа. На препарате видны тесно прилегающие друг к другу клетки прямоугольной формы. В них имеется округлое крупное ядро желто-коричневого цвета.

Изучите препарат под большим увеличением. Оболочка клетки толстая, цитоплазма зернистая. Ядро иногда смещено к

Рис. 3. Строение эукариотической клетки.

а - животного происхождения; б - растительного происхождения. 1 - ядро с хроматином и ядрышком; 2 - плазматическая мембрана; 3 - клеточная стен­ка; 4 - плазмодесмы; 5 - гранулярная эндоплазматическая сеть (с прикреп­ленными к ней рибосомами); 6 - гладкая эндоплазматическая сеть; 7 - обра­зующиеся пиноцитозные вакуоли; 8 - пластинчатый комплекс; 9 - лизосомы; 10 - жировые включения; 11 - центросома; 12 - митохондрии; 13 - полири­босомы; 14 - вакуоль; 15 - хлоропласт.

оболочке и содержит одно-два ядрышка. Цитоплазма некото­рых клеток имеет как бы пустоты - это вакуоли.

Зарисуйте несколько клеток и обозначьте: 1 - оболочка клетки; 2 - цитоплазма; 3 - ядро с ядрышками; 4 - вакуоль.

Работа 9. Органеллы растительной клетки

а. Хлоропласты в клетках листа элодеи.

Срежьте ножницами лист элодеи и поместите в капле воды на предметное стекло. Расправьте лист препаровальной иглой, накройте покровным стеклом и рассмотрите препарат под ма­лым и большим увеличением микроскопа. Найдите в цитоплаз­ме клеток тельца овальной формы, имеющие зеленый цвет. Это пластиды — хлоропласты. Ядра в клетках не видны, так как в неокрашенной клетке показатели преломнения ядра и цито­плазмы почти одинаковы.

Рассмотрите движение пластид вдоль стенок клетки. Зарисуйте несколько клеток и обозначьте: 1 - оболочка клетки; 2 - цитоплазма; 3 - хлоропласты.

б. Включении крахмала в лейкопластах клеток клубня карто­феля.

Тонкий срез клубня картофеля поместите на стекло в каплю воды и накройте покровным стеклом. Рассмотрите временный микропрепарат под малым и большим увеличением микроско­па. При большом увеличении видны крупные прозрачные клет­ки многоугольной формы. В цитоплазме клеток видны зерна крахмала разного размера. Нанесите на край покровного стекла каплю раствора Л юголя — зерна крахмала окрасятся в фиолето­вый цвет.

Зарисуйте несколько клеток и обозначьте: 1 - оболочка клетки; 2 - цитоплазма; 3 - крахмальные зерна.

Работа 10. Строение животной клетки

Рассмотрите постоянные микропрепараты под малым и большим увеличением микроскопа.

а. Общая морфология клеток печени (окраска гематоксилином и эозином). При малом увеличении видна группа клеток (гепатоцитов) многоугольной формы. При большом увеличе­нии в клетках хорошо видны ядра, окрашенные гематоксили­ном в фиолетовый цвет, цитоплазма розового цвета, тонкая оболочка.

Зарисуйте несколько клеток и обозначьте: 1 - оболочка клетки; 2 - ядро; 3 - цитоплазма.

Общая морфология клеток многослойного плоского эпите­лия слизистой оболочки щеки ротовой полости человека (окра­ска гематоксилином и эозином). (Для стоматологического фа­культета.)

При малом увеличении видно много слоев клеток, поверх­ностные клетки имеют уплощенную форму.

При большом увеличении в клетках хорошо видны ядра, ок­рашенные в фиолетовый цвет, розовая цитоплазма и тонкая оболочка.

Зарисуйте несколько клеток и обозначьте: 1 - оболочка клетки; 2 - ядро; 3 - цитоплазма.

б. Включения животной клетки. Гликоген в цитоплазме клеток печени (окраска кармином, гематоксилином).

При большом увеличении видны клетки многоугольной формы, ограниченные тонкой, едва заметной плазматической мембраной. Ядро с ядрышками и хроматином фиолетового цвета. В цитоплазме в виде скоплений красного цвета видны включения гликогена.

Зарисуйте несколько клеток и обозначьте: 1 - оболочка клетки; 2 - ядро с хроматином и ядрышками; 3 - цитоплазма с включениями гликогена.

в. Включения жира в клетках печени (окраска осмием).

На препарате в цитоплазме клеток печени видны жировые включения в виде округлых черных капель различной величины.

Зарисуйте несколько клеток и обозначьте: 1 - оболочка клетки; 2 - цитоплазма с жировыми включениями; 3 - ядро.

Работа 11. Клеточный уровень организации биологических систем на примере представителей подцарства Одноклеточные.

Рассмотрите на постоянных микропрепаратах под малым и большим увеличением микроскопа и изучите по таблицам сле­дующих представителей полцарства Одноклеточные:

а. Эвглена зеленая.

Найдите следующие структуры: 1 - жгутик; 2 - пелликулу; 3 - ядро; 4 - сократительную вакуоль; 5 - светочувствитель­ный глазок - стигму; 6 - хлоропласты; 7 - включения (парамил).

б. Амеба простая.

Найдите структуры амебы: 1 - псевдоподии; 2 - цитоплазматическую мембрану; 3 - цитоплазму; 4 - ядро; 5 - пищева­рительную вакуоль; 6 - сократительную вакуоль.

в. Инфузория-туфелька.

Найдите структуры инфузории: 1 - реснички; 2 - пеллику­лу: 3 - трихоцисты; 4 - эктоплазму; 5 - эндоплазму; 6 - мак­ронуклеус (вегетативное ядро); 7 - микронуклеус (генератив­ное ядро); 8 - клеточный рот (цитостом); 9 - клеточную глот­ку (цитофаринкс); 10 - пищеварительные вакуоли; 11 - анальную пору (порошицу); 12 - сократительные вакуоли.