1. Биохимические свойства бактерий. Определение. Методы изучения и практическое использование в микробиологической диагностике инфекционных заболеваний.

Биохимические признаки.Для определения споасобности микроорганизмов ферментировать углводы испоьзуют короткий и длинный «пестрый» ряд.К первому относят среды Гиса с моно и дисахаридами.В длинный в добавление к этим входят также индол,крахмал , гликоген,глицерин. И. т.д.В качестве индикатора(реактив Андреде) во все среды добовляют.Посев инкубирую при темп 37 в течен 18-24 часов.В том случае если бактерии ферментируют углевод до образования кислых продуктов, наблюдается изменение цвета среды и газ при разложении газообразн. продуктов.При отсутствии ферментации цвет не меняется.

Для определ протеолитических ферментов производят посев культуры уколом в столбик с 10-20% желатина При температ.20-22 градус. Несколько дней.При наличии фепрмент бактерии разжижают желатин.(образ воронка или елочка)Реакция на аммиак.Узкую полоску лакмусовой бумаги укрепляют так, чтобы она не соприкасалась с пит средой.Посинение бумаги говорит о присутствии аммиака.Реакция на индол.Способ Эрлиха.В пробирку с культурой бактерии прибавляют2-3 каол.эфира несколько капель реактива Эрлиха.В присутствии индола –розовое окрашивание..Реакция на сероводород.Делают посев культуры уколом в столбик с пит средой . При наличии сероводорода –почернение агара.Обнаружеение каталазы. На предметное стекло наносят каплю перекиси водородо3% и вносят в нее петлю с бактериальной культурой.Каталаза разлогает перекись водорода на кислород и воду.выделение пузырьков водорода свидетельств. О присутств каталазы.

Биохимические признаки определяют для идентификации культур бактерий.

биохимические —тип окислительного и пластического метаболизма, ферментацию углеводов, протеолитические и другие признаки.

2.Реакция непрямой гемагглютиниции. Механизм. Практическое использование.

Реакция непрямой (пассивной) гемагглютинации (РНГА, РПГА) основана на использова­нии эритроцитов (или латекса) с адсорбиро­ванными на их поверхности антигенами или антителами, взаимодействие которых с соот­ветствующими антителами или антигенами сыворотки крови больных вызывает склеива­ние и выпадение эритроцитов на дно пробирки или ячейки в виде фестончатого осадка.

Компоненты. Для постанов­ки РНГА могут быть использованы эритроциты барана, лошади, кролика, курицы, мыши, человека и другие, которые заготавли­вают впрок, обрабатывая формалином или глютаральдегидом.

Эритроциты, сенсибилизированные АГ, называются эритроцитарными диагностикумами. Для приготовления эритроцитарного диагностикума чаще всего используют эритроциты барана, обла­дающие высокой адсорбирующей активностью.

Применение. РНГА применяют для диагностики инфекционных болезней, определения гонадотропного гор­мона в моче при установлении беременности, для выявления повышенной чувствительнос­ти к лекарственным препаратам, гормонам и в некоторых других случаях.

Механизм. Реакция непрямой гемагглютинации (РНГА) отличается значительно более высокой чувствительностью и специфич­ностью, чем реакция агглютинации. Ее используют для иденти­фикации возбудителя по его антигенной структуре или для индикации и идентификации бактериальных продуктов — токси­нов в исследуемом патологическом материале. Соответственно используют стандартные (коммерческие) эритроцитарные анти­тельные диагностикумы, полученные путем адсорбции специфи­ческих антител на поверхности танизированных (обработанных танином) эритроцитов. В лунках пластмассовых пластин готовят последовательные разведения исследуемого материала. Затем в каждую лунку вносят одинаковый объем 3 % суспензии на­груженных антителами эритроцитов.

Через 2 ч инкубации при 37 °С учитывают результаты, оценивая внешний вид осадка эритроцитов (без встряхивания): при отри­цательной реакции появляется осадок в виде компактного.диска или кольца на дне лунки, при положительной реакции — харак­терный кружевной осадок эритроцитов, тонкая пленка с неров­ными краями.