Индикация и идентификация бактериофагов
Качественные пробы:
П
ринцип
метода по
Отто
_____________________________________________________
______________________________________________________________________
______________________________________________________________________
П ринцип метода по Фюрту __________________________________________________
______________________________________________________________________
______________________________________________________________________
П ринцип метода по Фишеру _________________________________________________
______________________________________________________________________
______________________________________________________________________
Определение количества фага (титрование)
Титр бактериофага___________________________________________________________
___________________________________________________________________________
Индекс бактериофага_________________________________________________________
___________________________________________________________________________
Титрование в жидкой среде по Аппельману. Принцип метода состоит в выявлении максимального разведения фаговой суспензии (титра), которое дает просветление (лизис) стандартного количества индикаторной культуры бактерий. Для этого в 10-кратные разведения исследуемой фаговой суспензии вносят одинаковые количества бактерий (около 250 млн/мл среды). Инкубируют в термостате 16-18 ч и определяют максимальное разведение, в котором имеется просветление. Титр выражают степенью разведения, напр. 108.
Определите титр бактериофага:
|
Разведение фага |
|||||||||
10 -1 |
10 -2 |
10 -3 |
10 -4 |
10 -5 |
10 -6 |
10 -7 |
10 -8 |
10 -9 |
10 -10 |
|
Результат |
- |
- |
- |
- |
- |
- |
+ |
+ |
+ |
+ |
Титр бактериофага______________________
Титрование бактериофага по методу Грациа. 1,0 мл фага смешивают в пробирке с 0,5 мл бактериальной культуры и добавляют в эту же пробирку расплавленный МПА. Все содержимое выливают в чашку с МПА. Дают застыть верхнему тонкому слою и ставят в термостат. При встрече фага с бактерией, происходит лизис последней и образуется негативная колония фага. Такие негативные колонии затем подсчитывают для определения титра. Титром фага называют количество фаговых частиц в 1 мл препарата фага.
Определите количество негативных колоний в разведениях:
10 -4 ____________ 10 -5 __________ 10 -6_________
Индекс бактериофага _________ БОЕ/мл
Применение бактериофагов в диагностике и медицине
Применение бактериофагов в терапии и профилактике заболеваний:
Местно применяют бактериофаги:_______________________________________________
_____________________________________________________________________________
Перорально применяют бактериофаги:____________________________________________
_____________________________________________________________________________