Занятие № 2

Тема: Влияние ксенобиотиков на скорость движения крови лягушки

Методы: экспериментальный

Время: 2 академических часа.

Учебные, воспитательные и развивающие цели:

Изучить методику влияния ксенобиотиков на скорость движения крови лягушки.

Воспитывать чувство гордости за достижения отечественных ученых в области ксенобиологии.

Развивать и совершенствовать навыки работы с литературными источниками и электронными ресурсами.

Материальное оснащение: бинт, булавки, пробковая (деревянная) или картонная пластинка, штатив с кольцом или заменяющий его предмет для поддержания пластинки, вата, пипетка, микроскоп, нож, вода, реактивы.

ВОПРОСЫ ДЛЯ АУДИТОРНОГО КОНТРОЛЯ ПО ТЕМЕ ЗАНЯТИЯ:

1. Типы гибели клеток. Активаторы и ингибиторы апоптоза.

2. Фармакокинетика ксенобиотиков.

3. Фармакодинамика ксенобиотиков.

4. Роль ксенобиотиков в опухолевой трансформации клеток.

5. Основные пути поступления ксенобиотиков в организм.

ТЕМЫ ДЛЯ РЕФЕРАТИВНОГО доклада:

1. Факторы, влияющие на концентрацию ксенобиотиков в организме описываемые LADME-системой.

2. Общая картина превращения ксенобиотиков в высших организмах.

3. Воздействие гормоноподобных ксенобиотиков на животных и человека.

На выбор будет заслушано 3-5 докладов студентов.

Лабораторная работа

Реактивы:

Растворы нитрата свинца, нитрата аммония, стирального порошка, этилового спирта.

Ход работы

В одном углу пластинки при помощи ножа делается круглое отверстие величиной в 4 см. Лягушку бинтуют мокрым бинтом (перед опытом бинт целиком погружают в воду и не слишком сильно отжимают) так, чтобы одна из ее задних конечностей осталась свободной. Бинтовать следует плотно, но не слишком туго. Чтобы лягушка не имела возможности сгибать свободную конечность, к ней влажным бинтом прибинтовывают небольшую палочку; доходящую до стопы. Стопа остается свободной. Лягушку кладут на пластинку брюхом вверх. Края марли прикалывают булавкой к пластинке, чтобы лягушка лежала неподвижно. Плавательную перепонку свободной лапки натягивают над отверстием пластинки и укрепляют при помощи булавок. Лягушки должны быть извлечены из холодильника за час до занятий, чтобы у них установилась нормальная скорость кровотока.

Булавки втыкают не в палец лягушки, а перепонку около пальца. Сильно растягивать перепонку не следует, так как кровообращение в ней может прекратиться.

Пластинку с прикрепленной лягушкой переносят на предметный столик микроскопа. Один конец пластинки кладут на столик микроскопа так, чтобы отверстие пластинки совпадало с отверстием в столике, а другой конец помещают на кольцо штатива, поднятое до уровня столика микроскопа.

Затем под микроскопом находят капилляр и подсчитывают, сколько эритроцитов пересечет границу поля зрения за одну минуту. Измерения проводят не менее 5 раз и определяют среднее арифметическое.

В связи с тем, что необходимо длительное время для вывода чужеродного вещества из организма, на одной лягушке можно испытать только одно соединение, но можно увеличивать концентрацию. Поэтому на марлю наносят с помощью пипетки исследуемый ксенобиотик, разведенный в четыре раза, по сравнению с исходной концентрацией, и наблюдают за изменением скорости кровотока в течение 15-20 мин, проводя такие же самые замеры. Затем этот процесс повторяют, применяя разведенный в два раза раствор, а затем исходный. Каждая пара испытывает реакцию на один ксенобиотик, и затем результаты статистически обрабатываются и обобщаются в сводную таблицу.

Контрольные вопросы:

1. Сравните результаты и сделайте выводы о действии различных по химическому составу ксенобиотиков на скорость кровотока.

2. Сделайте выводы о влиянии концентрации ксенобиотика на изучаемый показатель.

ЛИТЕРАТУРА:

Основные учебные пособия:

1. Лекционный материал.

2. А.А. Чиркин, И.М. Прищепа, А.Н. Дударев Основы ксенобиологии: учебное пособие для студентов биологических спец. высш. учеб. зав.- Витебск: изд-во УО «ВГУ им. П.М. Машерова».- 2004г.- 165с.

3. Юрин В. Н. Основы ксенобиологии: учебное пособие для студентов биологических спец. высш. учеб. зав.- Мн.: БГУ, 2001г.- 234с.

4. Юрин В. Н. Основы ксенобиологии: учебное пособие для студентов биологических спец. высш. учеб. зав.- Мн.: Новое знание, 2002.-267с

Дополнительные учебные пособия:

1. Экологический риск: учеб. пособие для студ., обучающихся по спец. 013500 - "Биология" и смежным спец. / [под ред. Г.В. Козьмина]. - Москва: Логос, 2005. - 168 с.

2. Новиков Ю.В. Экология, окружающая среда и человек: Учеб. пособие для вузов, средних школ и колледжей. – М.: ФАИР-ПРЕСС, 2000.- 320с.

3. Медицинская экология: Учеб. пособие для студ. высш. учеб. заведений / А.А. Королев, М.В. Богданов, Ал. А. Королев и др.; Под ред. А.А. Королева. – М.: Изд. центр «Академия», 2003. – 192с.