4. Промикроскопировать мазки из гнойного отделяемого уретры больного гонореей окрашенных по Граму и метиленовой синькой

Познакомиться с морфологией и тинкториальными свойствами гонококкка, зарисовать микропрепараты. Основным лабораторным методом для диагностики гонореи является – микроскопия мазка.

У женщин материал берут одновременно из уретры, влагалища и шейки матки, иногда из прямой кишки спустя 3-4 часа после опорожнения кишечника путём смыва физ. раствором, который затем центрифугируют, получают осадок, высушивают на предметном стекле и окрашивают.

У мужчин – материал берут из уретры, утром до первого мочеиспускания, кроме того исследуют и мочу, собранную утром после длительного воздержания от мочеиспускания.

У девочек – из уретры, влагалища, прямой кишки путём смыва.

Из полученного материала необходимо приготовить тонкие мазки, высушить их на воздухе и окрасить по общепринятой методике.

Методы окраски мазков: принято окрашивать мазки по Граму и метиленовой синькой, метод быстрый, но в данном случае не информативен, так как все клеточные элементы окрашиваются в синий цвет и гонококки легко спутать с изменёнными клетками.

Окраска по Грамму – метод трудоёмкий, но очень информативен, так как на голубом фоне грамотрицательные диплококки окрашиваются в красный цвет. Отчётливо видно их расположение парами в виде «кофейных зёрен», как внеклеточно, так и внутри клеточно в лейкоцитах. В 1 лейкоците может быть до 100 гонококков, которые усиленно размножаются, что в результате приводит к разрыву оболочки лейкоцита и гонококки располагаются внеклеточно.

Для выявления хронических и бессимптомных форм течения гонореи перед исследованием проводят провокационные пробы с гонококковой вакциной и алкоголем накануне взятия биологического материала. Для чего это делают? Эта провокация снижает защитный барьер клеточной мембраны, и бессимптомная форма переходит в острую.

Рис. 2. Neisseria gonorrhoeaе окраска по Граму	Рис. 3. Neisseria gonorrhoeaе окраска метиленовой синью	Рис.4. Trichomonas vaginalis, окраска по Романовскому-Гимзе

5. Изучение морфологии возбудителя трихомониаза.

Изучить Trichomonas vaginalis в нативном препарате окрашенном по Романовскому-Гимза, зарисовать.

Лабораторная диагностика трихомониаза: исследование основано на изучении нативного препарата и окрашенного по Романовскому (можно метиленовой синькой, по Граму)

Приготовление нативного препарата: каплю отделяемого из влагалища, взятого пипеткой или петлёй, наносят на предметное стекло, покрывают покровным стеклом и тотчас микроскопируют. Таким образом, в нативном препарате обнаруживают подвижные формы, которые распознаются по характерному движению ундулирующей мембраны. При потери движения микроорганизм распознать нельзя.

Окрашенные препараты: предложено много различных методов (метиленовый синий, по Граму, по Романовскому), но из всех перечисленных методов наиболее удобным является метод Романовского. Для этого каплю отделяемого распределяют тонким слоем на предметном стекле, высушивают и красят по методике. При этой окраске трихомонады распознаются легко – ядро фиолетовое, цитоплазма голубая, содержит бактерии, хорошо виден окружающий трихомонаду клеточный фон (нейтрофилы, эпителиальные клетки, эозинофилы). В мазках окрашенных другими способами легко спутать трихомонаду с изменёнными клетками. Например: при окраске по Граму она красная; метиленовым синим – синяя, на синем фоне, прижатая другими клетками, но особенность цитоплазмы в вакуолизации, пенистая, пористая и содержит большое эксцентричное ядро.