- •Приготовление гистологического препарата.
- •Методы окрашивания гистологических препаратов
- •Общие методы окраски
- •3. Выявление неклеточных структур соединительной ткани.
- •5. Выявление элементов нервной системы.
- •Цитология
- •Цитолемма
- •Гиалоплазма
- •Органеллы
- •Строение и функции мембранных органелл
- •Митохондрии
- •Эндоплазматическая сеть (эпс)
- •Ядро. Клеточный цикл
- •Кариолемма
- •Кариоплазма
- •Хроматин
- •Ядрышко
- •Клеточный цикл.
- •Эмбриология
- •Оплодотворение
- •Гаструляция
- •Образование осевых зачатков органов
- •Общие принципы организации тканей. Эпителиальные ткани
- •Ткани внутренней среды
- •Форменные элементы крови
- •Кроветворение
- •Соединительные ткани
- •Межклеточное вещество соединительной ткани
- •Соединительные ткани со специальными свойствами
- •Скелетные соединительные ткани
- •Мышечные ткани
- •Скелетная мышечная ткань
- •Сердечная мышечная ткань
- •Нервная ткань
- •Развитие нервной ткани
- •Нейроны
- •Нейрофибриллы
- •Нейроглия
- •Нервные волокна и нервные окончания
- •Безмиелиновые нервные волокна.
- •Миелиновые нервные волокна.
- •Перехваты Ранвье.
- •Приготовление гистологического препарата
- •Методы окрашивания гистологических препаратов
- •Общие методы окраски
- •3. Выявление неклеточных структур соединительной ткани
- •Цитология: клетка, мембраны, органеллы, включения.
- •Понятие о дифференцировке
- •Межклеточные соединения (контакты)
- •Цитоплазма
- •Мембранные органеллы
- •Ядро. Деление клетки
- •Клеточный цикл для клеток, прекращающих деление
- •Митоз. Стадии митоза.
- •Эмбриология. Строение гамет, оплодотворение, дробление
- •Половые клетки
- •Оплодотворение
- •Дробление
- •Гаструляция
- •Образование осевых зачатков органов
- •Эпителиальные ткани. Определение и источники развития Покровные эпителии
- •Железистые эпителии
- •Кровь и лимфа. Строение и функции форменных элементов крови
- •Кроветворение. Эмбриональное и постэмбриональное кроветворение
- •Классификация, строение собственно соединительных тканей.
- •Cкелетные соединительные ткани Классификация хрящевых тканей
- •Мышечные ткани
- •Классификация мышечных тканей
- •Гладкие мышечные ткани
- •Сердечная поперечно-полосатая мышечная ткань
- •Гладкая мышечная ткань
- •Нервная ткань: нейроны и нейроглия
- •Подразделение нейронов по числу отростков
- •Нервные волокна и нервные окончания. Разновидность и строение нервных волокон и нервных окончаний Нервные волокна
- •Классификация нервных окончаний
- •Синапсы
Общие методы окраски
1. Окраска гематоксилин–эозином - самый распространённый метод окраски. Сочетает основной и кислый красители. Поэтому позволяет выявить почти все клетки и многие неклеточные структуры. Ядра приобретают сине-фиолетовый цвет, цитоплазма – желтовато-розовый цвет.
2 Окраска железным гематоксилином (по методу Генденгайна). Препарат предварительно обрабатывают (протравляют) железноаммиачными квасцами, а потом обрабатывают гематоксилином. Структуры приобретают коричневато-серый цвет. Хорошо выявляются структуры ядра, границы клеток, мышечные волокна.
3. Выявление неклеточных структур соединительной ткани.
1. Окраска по методу ван Гизона. Краситель - смесь растворов пикриновой кислоты и кислого фуксина.
Коллагеновые волокна (содержащиеся в межклеточном веществе соединительной ткани) окрашиваются в ярко-красный цвет, а элементы других тканей (напр., мышечные волокна) - в жёлтый цвет.
2. Окраска по методу Маллори - краситель является трёхцветным - это смесь кислого фуксина, анилинового синего, оранжевого, а также двух кислот. Коллагеновые волокна соединительной ткани окрашиваются в тёмно-синий цвет; многие другие структуры (ядра, мышечные волокна, эритроциты) - в оранжевый или красный цвет.
3. Импрегнация серебром. Препарат обрабатывают аммиачным раствором серебра, а затем - восстановителями.
В итоге, выделяющееся серебро осаждается на определённых волокнах соединительной ткани. Ретикулярные (аргирофильные) волокна приобретают чёрный цвет, коллагеновые волокна - коричневый, ядра клеток - светло-коричневый.
4. Окраска орсеином. Эластические волокна соединительной ткани окрашиваются в тёмно-красный цвет а, остальные структуры - в слабо-розовый цвет.
5. Окраска гематоксилин-пикрофуксином. Эластические волокна окрашиваются пикриновой кислотой в жёлтый цвет, коллагеновые волокна - в красный цвет, ядра клеток - окрашиваются гематоксилином в тёмно-фиолетовый цвет.
6. Окраска по методу Шморля. Используется для окраски костей и дентина. Предварительно кусочки материала подвергают декальцинации, а затем выдерживают в растворе алюмокалиевых квасцов.
Стенки костных полостей и канальцев (выстланные сетью коллагеновых волокон) окрашиваются в тёмно-коричневый цвет, остальной фон - светло-коричневый.
4. Окраска клеток соединительной ткани и крови. Окраска азур2-эозином: базофильные элементы окрашиваются азуром2 в тёмно-синий, оксифильные - в светло-красный цвет.
Окраска мазков по методу Романовского. Краситель - тот же, что и в предыдущем случае (азур2-эозин).
Эритроциты приобретают бледно-красный цвет, цитоплазма лейкоцитов - голубой или синий цвет, цитоплазматические гранулы окрашиваются в зависимости от их природы.
5. Выявление элементов нервной системы.
1. Импрегнация нитратом серебра. Фиксацию материала в формалине проводят не менее 7 дней.
Уплотнение образца осуществляют не путём заливки в парафине, а путём замораживания
При окрашивании срез последовательно обрабатывают растворами азотнокислого серебра, формалина, аммиачного серебра.
Элементы нервной системы (волокна, клетки и т.д.) окрашиваются в чёрный цвет, окружающие ткани - в светло-коричневый цвет.
2. Окраска толуидиновым синим по методу Ниссля. Толуидиновый синий окрашивает умеренно базофильные соединения в синий цвет. С его помощью в цитоплазме нервных клеток обнаруживаются глыбки базофильного вещества (т.н. субстанция Ниссля).
3. Окраска метиловым зелёным - пиронином по методу Браше. Метод служит для выявления РНК.
Лекция № 2