- •Основы общей бактериологии (в таблицах)
- •Признаки, используемые для таксономической
- •Тонкостенные, грамотрицательные (грациликутные) бактерии
- •Толстостенные, грамположительные
- •Примеры формирования бинарного названия бактерий
- •Спорообразование у бактерий (бациллы и клостридии) х
- •Морфология и ультраструктура спирохет
- •Морфология и ультраструктура актиномицетов
- •Окраска по методу Бурри
- •Окраска по методу Грама
- •Окраска кислотоустойчивых бактерий по методу
- •Приготовление препаратов для изучения бактерий
- •Окраска спирохет по методу Романовского – Гимзы
- •Химический состав бактерий
- •Факторы роста бактерий
- •Дыхание бактерий
- •Ферменты бактерий
- •Рост и размножение бактерий
- •Виды роста бактерий на жидких и плотных питательных средах
- •Фаза развития бактериальной популяции
- •Бактериологическая лаборатория и правила работы в ней
- •Условия культивирования бактерий
- •Классификация питательных сред
- •Методы стерилизации
- •Этапы бактериологического исследования
- •Особенности выделения чистых культур аэробных бактерий
- •Особенности выделения чистых культур анаэробных бактерий
- •Культуральные признаки бактерий
- •Изучение биохимических признаков бактерий («пестрый ряд»)
- •Список рекомендуемой литературы
- •Оглавление
- •Методические указания
- •428015 Чебоксары, Московский просп., 15
Приготовление препаратов для изучения бактерий
в живом состоянии
Метод «раздавленной» капли |
Метод «висячей» капли |
1. На поверхность обезжиренного стекла нанести суспензию бактерий и накрыть покровным стеклом. 2. Микроскопировать препарат с объективом х40 |
1. В центр покровного стекла нанести суспензию бактерий 2. Предметное стекло с лункой, края которой смазаны твердым вазелином, прижать к покровному стеклу так, чтобы капля находилась в центре лунки 3. Быстрым движением перевернуть препарат покровным стеклом вверх, капля должна висеть над лункой, не касаясь ее дна или края 4. С оъективом х8 найти край капли 5. С объективом х40 изучать препарат |
Таблица 30
Окраска по методу Бурри
Последовательность действий |
1. На стекло петлей нанести каплю спиртового раствора туши |
2. Внести туда культуру и растереть |
3. Высушить |
4. Не фиксировать! |
5. Микроскопировать с объективом х40 |
На черном или сером фоне видны неокрашенные клетки бактерий |
Таблица 31
Окраска по методу Грама
Последовательность действий |
Время |
1. На мазок нанести бумажку, пропитанную раствором генцианвиолетта |
1-2 мин |
2. Нанести раствор Люголя |
1-2 мин |
3. Нанести этиловый спирт |
30-60 с |
4. Промыть водой |
|
5. Нанести бумажку, пропитанную раствором фуксина |
1-2 мин |
6. Промыть водой |
|
7. Высушить и микроскопировать с объективом х90 |
|
Грамположительные бактерии окрашиваются в фиолетовый цвет, грамотрицательные – в розовый |
|
Таблица 32
Обнаружение капсул по методу Бурри – Гинса
Последовательность действий |
Время |
1. На стекло нанести каплю раствора туши, внести туда культуру и равномерно распределить по стеклу |
|
2. Высушить |
|
3. Зафиксировать над пламенем спиртовки |
|
4. Нанести водный раствор фуксина |
1-2мин |
5. Промыть водой, высушить |
|
6. Микроскопировать с объективом х90 |
|
Бактерии окрашиваются в красный цвет, неокрашенные капсулы контрастно выделяются на черно-розовом фоне |
|
Таблица 33
Окраска кислотоустойчивых бактерий по методу
Циля – Нильсена
Последовательность действий |
Время |
1. На фиксированный мазок нанести карболовый раствор фуксина через полоску фильтровальной бумаги, подогреть до появления паров |
3-5 мин |
2. Снять бумагу, промыть водой |
|
3. Опустить мазок в стаканчик с 5% серной кислотой для обесцвечивания |
5 с |
4. Промыть водой |
|
5. Нанести водный раствор метиленового синего |
3-5 мин |
6. Промыть водой, высушить |
|
7. Микроскопировать с объективом х90 |
|
Кислотоустойчивые бактерии окрашиваются в красный цвет, некислотоустойчивые – в голубой |
|
Таблица 34
Окраска спор по методу Ожешки
Последовательность действий |
Время |
1. На нефиксированный мазок нанести 0,5% раствор хлороводородной кислоты и подогреть на пламени |
2-3 мин |
2. Кислоту слить, препарат остудить, промыть водой |
|
3. Просушить и зафиксировать над пламенем |
|
4. На фиксированный мазок нанести карболовый раствор фуксина через полоску фильтровальной бумаги, подогреть до появления паров |
3-5 мин |
5. Снять бумагу, промыть водой |
|
6. Опустить мазок в стаканчик с 5% серной кислотой для обесцвечивания |
5 с |
7. Промыть водой |
|
8. Нанести водный раствор метиленового синего |
3-5 мин |
9. Промыть водой, высушить |
|
10. Микроскопировать с объективом х90 |
|
Споры окрашиваются в розовый цвет, вегетативные клетки – в голубой |
|
Таблица 35
Окраска зерен волютина по методу Нейссера
Последовательность действий |
Время |
1. На фиксированный мазок нанести ацетат синьки Нейссера |
2-3 мин |
2. Нанести раствор Люголя |
10-30 с |
3. Промыть водой |
|
4. Нанести водный раствор везувина или хризоидина |
0,5-1 мин |
5. Промыть водой, высушить |
|
6. Микроскопировать с объективом х90 |
|
Зерна волютина окрашиваются в темно-синий цвет, цитоплазма клеток – в желтый |
|
Таблица 36
