Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
Ефейкина ООБ. 1-2016.doc
Скачиваний:
10
Добавлен:
01.07.2025
Размер:
479 Кб
Скачать
☆

Приготовление препаратов для изучения бактерий

в живом состоянии

Метод «раздавленной» капли

Метод «висячей» капли

1. На поверхность обезжиренного стекла нанести суспензию бактерий и накрыть покровным стеклом.

2. Микроскопировать препарат с объективом х40

1. В центр покровного стекла нанести суспензию бактерий

2. Предметное стекло с лункой, края которой смазаны твердым вазелином, прижать к покровному стеклу так, чтобы капля находилась в центре лунки

3. Быстрым движением перевернуть препарат покровным стеклом вверх, капля должна висеть над лункой, не касаясь ее дна или края

4. С оъективом х8 найти край капли

5. С объективом х40 изучать препарат

Таблица 30

Окраска по методу Бурри

Последовательность действий

1. На стекло петлей нанести каплю спиртового раствора туши

2. Внести туда культуру и растереть

3. Высушить

4. Не фиксировать!

5. Микроскопировать с объективом х40

На черном или сером фоне видны неокрашенные клетки бактерий

Таблица 31

Окраска по методу Грама

Последовательность действий

Время

1. На мазок нанести бумажку, пропитанную раствором генцианвиолетта

1-2 мин

2. Нанести раствор Люголя

1-2 мин

3. Нанести этиловый спирт

30-60 с

4. Промыть водой

5. Нанести бумажку, пропитанную раствором фуксина

1-2 мин

6. Промыть водой

7. Высушить и микроскопировать с объективом х90

Грамположительные бактерии окрашиваются в фиолетовый цвет, грамотрицательные – в розовый

Таблица 32

Обнаружение капсул по методу Бурри – Гинса

Последовательность действий

Время

1. На стекло нанести каплю раствора туши, внести туда культуру и равномерно распределить по стеклу

2. Высушить

3. Зафиксировать над пламенем спиртовки

4. Нанести водный раствор фуксина

1-2мин

5. Промыть водой, высушить

6. Микроскопировать с объективом х90

Бактерии окрашиваются в красный цвет, неокрашенные капсулы контрастно выделяются на черно-розовом фоне

Таблица 33

Окраска кислотоустойчивых бактерий по методу

Циля – Нильсена

Последовательность действий

Время

1. На фиксированный мазок нанести карболовый раствор фуксина через полоску фильтровальной бумаги, подогреть до появления паров

3-5 мин

2. Снять бумагу, промыть водой

3. Опустить мазок в стаканчик с 5% серной кислотой для обесцвечивания

5 с

4. Промыть водой

5. Нанести водный раствор метиленового синего

3-5 мин

6. Промыть водой, высушить

7. Микроскопировать с объективом х90

Кислотоустойчивые бактерии окрашиваются в красный цвет, некислотоустойчивые – в голубой

Таблица 34

Окраска спор по методу Ожешки

Последовательность действий

Время

1. На нефиксированный мазок нанести 0,5% раствор

хлороводородной кислоты и подогреть на пламени

2-3 мин

2. Кислоту слить, препарат остудить, промыть водой

3. Просушить и зафиксировать над пламенем

4. На фиксированный мазок нанести карболовый раствор фуксина через полоску фильтровальной бумаги, подогреть до появления паров

3-5 мин

5. Снять бумагу, промыть водой

6. Опустить мазок в стаканчик с 5% серной кислотой для обесцвечивания

5 с

7. Промыть водой

8. Нанести водный раствор метиленового синего

3-5 мин

9. Промыть водой, высушить

10. Микроскопировать с объективом х90

Споры окрашиваются в розовый цвет, вегетативные клетки – в голубой

Таблица 35

Окраска зерен волютина по методу Нейссера

Последовательность действий

Время

1. На фиксированный мазок нанести ацетат синьки

Нейссера

2-3 мин

2. Нанести раствор Люголя

10-30 с

3. Промыть водой

4. Нанести водный раствор везувина или

хризоидина

0,5-1 мин

5. Промыть водой, высушить

6. Микроскопировать с объективом х90

Зерна волютина окрашиваются в темно-синий цвет, цитоплазма клеток – в желтый

Таблица 36