Оценка гуморального звена иммунитета определение уровня иммуноглобулинов в сыворотке крови методом радиальной иммунодиффузии по манчини

И ммуноглобулины классов G, A и M определяются в сыворотке пациента (сывороточные иммуноглобулины) и в секретах (секреторные иммуноглобулины). По механизму это реакция преципитации в геле. Для её проведения необходимы агар и сыворотки, содержащие антитела к иммуноглобулинам человека. Ранее моноспецифические сыворотки к иммуноглобулинам человека получали при иммунизации ими кролика.

IgG человека кролик 1 Ат к IgG человека

IgA человека кролик 2 Ат к IgA человека

IgM человека кролик 3 Ат к IgM человека

В настоящее время такие антитела получают с помощью гибридом, то есть используют моноклональные антитела.

К расплавленному теплому агару добавляют сыворотку, содержащую Ат к IgG человека, заливают на стекло ровным слоем, дают застыть, делают лунки, заливают в лунки разведения контрольной сыворотки (с известным содержанием IgG) и исследуемые сыворотки:

Разведения контрольной сыворотки:

цельная 1/2 1/4 1/8 1/16

1 2 3 4 5 1,2,3,4,5 –

сыворотки пациентов

После инкубации измеряют диаметр преципитации колец контрольной сыворотки, строят график (соотношение концентрации Ig и диаметров колец), затем измеряют диаметры исследуемых сывороток и по графику определяют концентрацию иммуноглобулинов в сыворотке больного.

Аналогично определяют и другие иммуноглобулины.

Метод высоко информативен в диагностике первичных и вторичных иммунодефицитных состояниях и хронических инфекциях. Иммуноглобулины снижаются при некоторых иммунодефицитных состояниях (когда нарушается выработка иммуноглобулинов), повышаются при миеломной болезни (злокачественное разрастание одного из клонов В-лимфоцитов и, как следствие, бесконтрольная продукция иммуноглобулинов).

IgM повышается - при перинтальных инфекциях (цитомегаловирусная, токсоплазмоз, краснуха, и др. вирусные инфекции); также повышается при острых септических состояниях, инфекционном мононуклеозе, микоплазменной пневмонии, вирусных гепатитах, циррозе, ревматоидном артрите, особенно в начальном, трудном для диагностики периоде артритов, при обострении СКВ. При некоторых заболеваниях повышение уровня Ig М свидетельствует о хроническом процессе.

IgM снижается - при первичных и вторичных ИД состояниях, при гастроэнтеропатиях, ожоговой болезни, иммунодепрессивной терапии.

IgG повышается - при разных заболеваниях, его повышение часто сопутствует активности процесса. Высокие концентрации данного иммуноглобулина наблюдаются при аутоиммунных процессах, острых инфекционных состояниях в фазу вторичного иммунного ответа. Увеличение концентрации моноклональных IgG имеет место при IgG-миеломе, бессимптомной моноклональной гаммапатии (редкие случаи).

IgG снижается - при первичных и вторичных ИД, при гастроэнтеритах с потерей белка, при нефротическом синдроме, при иммунодепрессивной терапии.

IgA повышается - при перинатальных инфекциях, хронических заболеваниях печени, подострых и хронических инфекциях, аутоиммунных заболеваниях, IgA - миеломе, бессимптомной гипергаммаглобулинемиии (редкие случаи).

IgA снижается - при ИД, ожоговой болезни, селективном дефиците IgA. Лица с дефицитом IgA предрасположены к хроническим воспалительным, аутоиммунным и аллергическим заболеваниям.

В настоящее время всё более широкое распространение получают более современные методы определения уровня иммуноглобулинов: ИФА, нефелометрический, турбодиметрический.