9. Статистическая обработка экспериментальных данных
9.1. Определение фитотоксического эффекта проводится путем сопоставления показателей тест-функции (Lср) контрольных и опытных семян.
Величина показателя Lср контрольных и опытных семян вычисляется как среднее арифметическое из совокупности данных о длине корней проростков, полученных в трех повторностях эксперимента (формула 1).
,
где (1)
Li – длина максимального корня каждого семени, мм;
– сумма;
n – общее количество семян, взятых в опыт.
При Lср(ОП) > или = Lср(К) – отсутствие неблагоприятного действия отхода.
Величина эффекта торможения определяется по формуле 2.
,
где (2)
ЕТ – эффект торможения, %;
LОП – средняя длина корней в опыте, мм;
LК – средняя длина корней в контроле, мм.
Фитотоксическое действие считается доказанным, если фитоэффект (ЕТ) составляет 20 % и более.
Результаты данного этапа работы заносятся в таблицу (прилож. 2).
9.2. Регрессионный анализ экспериментальных данных проводится при условии, что биологически эффективными являются не менее 3-х значений R.
Вычисление уравнения регрессии lgR = –mET + b, наиболее адекватно описывающего прямолинейный характер зависимости lgR = f(EТ) проводится методом «Наименьших квадратов», который достаточно подробно описан в статистической литературе [3]. Однако наиболее целесообразно для этих целей использование компьютерных программ, в частности «Microsoft Excel 1997», что значительно упрощает процесс расчета параметров уравнения (m и b).
Оценка достоверности полученного регрессионного уравнения по величине коэффициента корреляции (r), характеризующего степень линейного приближения экспериментальных и эмпирически вычисленных (по уравнению) значений фитоэффектов. Коэффициент r нормирован от 0 до 1. Если он равен 1, то имеет место полная корреляция с моделью, если – 0, то уравнение регрессии неудачно описывает зависимость lgR = f(EТ).
10. Расчет параметров фитотоксичности и оценка опасности отхода
10.1. Определение значений пороговых (LimR) и среднеэффективных (ER50) разведений осуществляется путем решения полученного уравнения: lgR = –mET + b относительно R при заданных величинах фитоэффекта (EТ), который при определении порога фитотоксичности принимается за 20 %, а при определении среднеэффективного разведения EТ = 50 %.
10.2. Класс опасности отхода устанавливается по величине ER50 в соответствии с критериями, представленными в табл. 1.
Таблица 1
Критерии опасности отходов по фитотоксическому действию
Классы |
1 |
2 |
3 |
4 |
Категории опасности |
Чрезвычайно опасные |
Высоко опасные |
Умеренно опасные |
Мало опасные |
Величина ER50 |
> 102 |
> 10—102 |
> 1—10 |
1 |
Примечание: Если токсический эффект зафиксирован только при действии нативного экстракта, а его разведения проявляют индифферентность относительно семян, то отходу автоматически присваивается 4 класс опасности.
10.3. Порог фитотоксичности означает, что разведения водного экстракта отхода, превышающие его величину, будут безопасны для роста и развития высших растений. При этом условии негативное воздействие отхода на среду обитания человека маловероятно.