12 Вопрос

Мембрана непроницаема для аскорбата. На внешний листок наносится метка, аскорбат окисляет эту метку. Окисленный фосфолипид может совершить флип-флоп (на сколько понял из лекции). Так как головка полярна, поле окисления она теряется заряд, поэтому способна совершить флип-флоп. То есть головка с окисленной аскорбатом меткой перемещается на внутренний листок.

Такой же процесс просходит при термогенезе в МТХ. Протонированные фосфолипиды совершают флип-флоп, а протон переносится внутрь (см. картинку ниже)

Вращательная диффузия – вращение молекул вокруг своей продольной оси. Относительную подвижность цепей ЖК и участков полярной головки связывают с гибкостью цепей. Гибкость связана с возможостью вращения хим.группировок относительно σ-связи. Подвижность вокруг одинарной связи намного выше, чем вокруг двойной.

Хвосты совершают маятникообразные движения, причем центральная часть бислоя обладает большей текучестью, чем участки ЖК, расположенных ближе к головкам.

13.Латеральная диффузия компонентов мембраны и её регуляция в клетке.

Мембранные липиды и белки способны диффундировать вследствие теплового движения. Если перемещение их молекул происходит в пределах одного мембранного слоя, то такой процесс называется латеральной диффузией. При латеральной диффузии частота перескоков за секунду составляет около 3·10⁷.

Коэффициент латеральной диффузии липидов лежит в пределах

10^-7 -10^-9 см²/с. Скорость латеральной диффузии фосфолипидов в жидкокристаллическом бислое составляет около 2 мкм/сек.

При переходе бислоя в гелевое состояние скорость такой диффузии резко падает.

Измерение латеральной диффузии производится методом фотовосстановления флуоресценции после фотообесцвечивания

По кривой восстановления флуоресценции после фотоотбеливания (ВФПФ) можно определить время полувосстановления (t_1/2) (в точке, где интенсивность флуоресценции равна F(0) + 0,5[F(∞) – F(0)] ).

Применительно к методу ВФПФ формулу Эйнштейна для диффузии <x²> = 4D_Lt, где <x²> - величина среднего квадратичного перемещения за время t; D_L – коэффициент латеральной диффузии, можно преобразовать к виду: D_L = (w²/4t_1/2)γ, где w –радиус отбеливаемого участка, γ – рассчитываемая константа, зависимая от профиля луча и степени фотоотбеливания. Отсюда, зная время полувосстановления t_1/2 можно вычислить D_L и таким образом количественно охарактеризовать подвижность белков в мембране живой клетки.

Многие рецепторы подвижны в мембране живых клеток, их коэффициенты латеральной диффузии варьируют в пределах 10^-11 - 5•10^-10 см²/с .

Индукция нейрональной активности усиливает латеральную диффузию, снижая время нахождения рецепторовгамма-аминобутирата(ГАМК) в синапсе.

Модуляция латеральной диффузии рецепторов обеспечивает простой и обратимый способ регуляции функциональной активности синапсов.

14. Подвижность и конформацияжирнокислотных цепей в мембранах. Кинки.

Выделяют два типа:

1)внутримолекулярная

вращение цепей(кинки), наклон головок

2)подвижность молекул

Флип-флоп, латеральная диффузия, выпрыгивание молекул

У липидов выделяют три конформации:

Транс- прямой хвост без 2х связей

Гош- поворот на 120 градусов без 2х связей

Цис- 2х связью участок с гош-транс-гошконформацией называется кинк

Молекулы воды перемещаются

В липидном слое мембраны, совершая скачки между петлями (кинками) жирнокислотных цепей.

Вероятность образования кинков

увеличивается при обогащении мембран

ненасыщенными жирными кислотами.

Трансдермальная потеря воды кожей происходит благодаря кинкам в липидных мембранах рогового слоя кожи.