24. Искусственное осеменение в животноводстве.

В комплексе мер по крупномасштабной селекции, повышению продуктивности животных

и получению качественного приплода особое место отводится искусственному

осеменению маточного поголовья и пересадке зигот от высокопродуктивных животных

реципиентам. Искусственное осеменение имеет различные формы организации. При

использовании любой из них, работу по искусственному осеменению коров, телок и

других видов животных должны проводить ветврачи-гинекологи или зооинженеры

(техники), имеющие глубокие теоретические знания и практический опыт работы по

оценке спермы, выявлению маток в охоте и осеменению их прогрессивными способами,

владеющие методикой и техникой ректального исследования коров на стельность.

Определение коров и телок в охоте является одним из важнейших мероприятий по

проведению искусственного осеменения. Для этого необходимы: четкая нумерация скота,

ежедневные прогулки животных, вспомогательные информационные средства.

В настоящее время в мире насчитывается около 20 групповых способов определения

охоты и течки у коров и телок. Групповые способы основаны на визуальном наблюдении

за проявлением у самок рефлекса неподвижности, что возможно в условиях

беспривязного содержания или регулярного моциона. Только ежедневное наблюдение за

стадом дает возможность установить течку у коров в 90 — 100% случаев, в то время как

фиксированное содержание позволяет обнаруживать только 50 — 65% пришедших в

охоту коров.

Наблюдение за стадом следует проводить в периоды наибольшего проявления

животными состояния охоты, которое приходится на утро за 0,5 — 1 ч до доения и в

полдень при возвращении животных с пастьбы и перед выгоном на пастбище, а в

стойловый период — после кормления на площадках или в секциях коровников и в

начале ночного отдыха. В каждом случае продолжительность осмотра стада должна быть

не менее 30 мин.

Широко используется метод мечения маток, у которых в ближайшие дни должна

наступить охота. Белым или цветным мелом наносят метку на гребень крестца. После

каждой прогулки осматривают состояние маток. Корова, у которой она размазана, а

волосяной покров взъерошен и загрязнен, считается в охоте. Чтобы меловая метка

держалась несколько дней готовят суспензию из 5 г глицерина и 100 г мела. Иногда на

круп коровам на линии моклоков закрепляют детекторы, заполненные красящим

веществом. Окрашенных животных осеменяют.

Кроме групповых способов выявления коров в охоте, используют индивидуальные: по

содержанию гормона прогестерона в молоке, по признакам течки, электрическому

сопротивлению слизи влагалища, показателям преломления луча света в секрете половых

путей самок и др.

Как правило, коров, пришедших в охоту утром, осеменяют во второй половине дня,

пришедших в охоту вечером — на следующий день утром. Доказано, что это оптимальный

срок для зачатия.

25. Основные питательные среды, применяемые в исследованиях репродуктивных

клеток животных (среда Хэнкса, Т-6, раствор Кребса-Рингера, среда Витена, РВ=1, М-2).

Модельные системы, основанные на методах культивирования клеток in vitro,

характеризуются высокой степенью требовательности к условиям их постановки. Они

включают использование специального нейтрального стекла, многокомпонентных

стерильных питательных сред, забуференных солевыми сбалансированными растворами

и приготовленными на высокоочищенной деионизированной воде, моющих средствах

специального состава, строгих правил асептики, боксов специальной конструкции с

ламинарным потоком стерильного воздуха, строгое термостатирование клеточных

культур при заданных температурных режимах, концентрации CO, в воздухе (5%) и пр. В

силу этого работы в модельных системах, связанных с культивированием клеток in vitro,

строго регламентируются, исключая возможность использования неоправданных

дорогостоящих затрат. Так, например, среда №199 (Паркера), используемая на первичных

этапах приготовления клеточных культур, включает 53 компонента (высокоочищенные

аминокислоты, витамины, гормоны, компоненты нуклеиновых кислот, антибиотики,

неорганические соли и др.). Среды, используемые в более продолжительных

культуральных работах, характеризуются более сложным составом. Среда №858 состоит

из 56, среда NCTC 107 — из 71 компонентов. Помимо этого, питательные среды включают

одну из прописей солевых сбалансированных растворов неорганических солей — Хэнкса,

Эрла, Тироде и др. Одной из наиболее широко используемых в настоящее время

синтетических питательных сред для клеточных культур является среда RPMI-1640.

Серьезное ограничение широкого использования модельных систем in vitro заключается

также в быстром отмирании клеток кроветворной и лимфоидной систем, несмотря на

создание высококачественных питательных сред. В связи с этим зачастую возникает

необходимость во включении в состав синтетических питательных сред различных,

тщательно проверенных на токсичность, сывороток, в частности эмбриональной телячьей,

сыворотки лошади, человека и др. В исследованиях, не требующих использования сред

строго известного состава, используют питательные растворы, полностью состоящие из

различных естественных компонентов в разных соотношениях — коровьей

амниотической жидкости, куриного эмбрионального экстракта, лошадиной сыворотки,

сыворотки обезьян, человека и др.

Вместе с тем, несмотря на указанные ограничения, исследование закономерностей

иммунологических реакций, вскрытых в условиях культивирования клеток системы

иммунитета in vitro, внесло существенный вклад в развитие иммунологии, инвитровые

модельные системы успешно используются и в наши дни, К их числу можно отнести

реакцию бласттрансформации лимфоцитов, систему индукции выработки антител in vitro,

систему получения моноклональных антител и др.

Раствор Кребса-Рингера — сложный физиологический раствор.

Применяется в медицине, в физиологии для изучения деятельности тканей вне органов,

для перфузии изолированных органов.