Тема 4: Микробиологическая диагностика инфекций, передающихся половым путем.

Культуральные признаки.

Гонококки растут на средах, содержащих нативный белок (сыворотка крови, асцитическая жидкость). Аэробы, растут на воздухе, обогащенном 3-5% СО₂. Образуют прозрачные колонии с ровными краями.

Патогенез.

Источник инфекции - больной человек.

Возбудитель передается половым путем, реже через предметы обихода (белье, полотенце, мочалка). При бленнорее заражение новорожденного происходит через инфицированные родовые пути матери.

Факторы патогенности:

- пили (белок-пилин) - прикрепление гонококков к эпителию влагалища, фаллопиевых труб и полости рта,

- капсула - антифагоцитарная активность,

- протеин I (Por-пориновый белок) - способствует внутриклеточному выживанию бактерий, препятствуя слиянию лизосом с фагосомой нейтрофилов,

- протеин II (Opa - Opacity protein; Opacity - мутность) т.е. протеин мутности - опосредует плотное прикрепление к эпителиальным клеткам и инвазию внутрь клеток,

- протеин III (Rmp - Reduction -modifiable  protein) - защищает поверхностные антигены (Por-белок, липоолигосахарид) от бактерицидных антител,

- LOS (Lipooligosaccharide) - обладает свойствами эндотоксина,

- IgA₁-протеаза - разрушает IgA_1,

- бета-лактамаза - гидролизует бета-лактамное кольцо  пенициллинов.

Гонококки прикрепляются к цилиндрическому эпителию уретры, шейки матки, прямой кишки, конъюнктиве глаза, сперматозоидам и простейшим. Они способны проникать в лейкоциты и размножаться в них. LOS оказывает токсическое действие. Капсульные полисахариды подавляют фагоцитоз. Гонококки проникают внутрь клеток при участии белков наружной мембраны клеточной стенки. Это приводит к развитию острого уретрита или цервицита.

Инкубационный период 2-4 дня.

Заболевание характеризуется резью при мочеиспускании, гнойными выделениями из уретры и влагалища. Заболевание может переходить в хроническую бессимптомную форму.

Микробиологическая диагностика.

Материал: гной из уретры, влагалища, мазки со слизистой оболочки мочеполовых органов.

Методы:

1. Бактериоскопический метод - окраска двух мазков:

1) по Граму;

2) 1%  водным раствором  метиленового синего и 1% спиртовым раствором эозина.

2. Бактериологический метод: посев на питательные среды, содержащие нативные белки крови, сыворотки или асцитической жидкости; оптимум роста в атмосфере 10-20% углекислого газа, при рН 7,2-7,4 и температуре 37°С. Гонококки образуют круглые прозрачные колонии, напоминающие капли росы. Выделенную чистую культуру идентифицируют по биохимическим признакам (ферментация глюкозы с образованием кислоты).

При хронической гонорее для обострения процесса за 12 час до взятия материала вводят гонококковую вакцину.

3. Серологический метод: РСК (реакция Борде-Жангу) или РПГА с сывороткой крови больного – используется при хронической гонорее при отсутствии у больного выделений. В качестве антигена применяют гонококкову вакцину или антиген из убитых гонококков. Реакция бывает положительна на 3-4 неделе болезни.

Лечение.

При острой гонорее лечение проводят антибиотиками (пенициллин).

При хронической – иммунотерапия (гонококковая вакцина или пирогенал, которые способствуют быстрому рассасыванию воспалительных инфильтратов) и затем антибиотиками.

Профилактика.

1. Выя

вление больных и их лечение.

2. Выявление носителей – обследование всех членов семьи больного

3. Пропаганда здорового образа жизни.

4. Использование средств механической защиты при половых контактах, спринцевание при случайных половых связях раствором хлоргексидина биглюконата.

5. Для профилактики бленнореи закапывают сразу после рождения сульфацил натрия или нитрат серебра.

Вопрос 2.Treponema pallidum – возбудитель сифилиса

Treponema pallidum (T. pallidum) -  вызывает сифилис - инфекционную болезнь, характеризующуюся первичным аффектом (твердый шанкр), высыпаниями на коже и слизистых оболочках с последующим поражением различных органов и систем.

Морфология.

Treponema pallidum (бледная трепонема) - тонкие штопорообразно закрученные нити  с 8-12 мелкими завитками. По Романовскому-Гимзе окрашиваются в бледно-розовый цвет. Слабо окрашиваются анилиновыми красителями, окрашиваются серебрением. Хорошо видны при темнопольной и фазовоконтрастной микроскопии. Имеют несколько периплазматических жгутиков. Движения - поступательные, вращательные и маятникообразные. Спор не образуют, капсул не имеют. В неблагоприятных условиях могут образовывать цисты и L-формы.

импрегнация серебром окраска по Романовскому-Гимзе иммунофлюоресценция Рис.: Treponema pallidum (бледная трепонема) в мазках из твердого шанкра

Культуральные признаки.

Анаэробы или микроаэрофилы. На питательных средах не растут. Чистую культуру трепонем можно получить при заражении кролика в яичко.

Патогенез.

Источник инфекции - больной человек.

Заражение происходит половым путем, реже контактно-бытовым, трансплацентарным путями и через кровь. Заболевания протекают циклически: первичный сифилис, вторичный, третичный. Без лечения может наступить четвертичный сифилис. Иммунитет  после перенесенной болезни не развивается.

Первичный сифилис -твердый шанкр Вторичный сифилис - сыпь

Микробиологическая диагностика. 

1. Бактериоскопия в темном поле:

Материал для исследования - отделяемое твердого шанкра, пунктаты лимфатических узлов, материал из высыпаний кожного покрова.

2. Иммунофлюоресценция (РИФ)  мазка, окрашенного иммунной антитрепонемной сывороткой, меченной флюорохромом. 

3. Серодиагностика:

Материал: сыворотка крови. Методы:

1) реакция Вассермана (РСК с а) с кардиолипиновым антигеном;  б) с трепонемным антигеном.

2) реакция микропреципитации кардиолипинового антигена с сывороткой крови больного.

3) Окончательный диагноз ставят: на основании РИФ (реакция иммцнофлюоресценции) с тканевым штаммом  T.pallidum (непрямой метод), ИФА (иимуноферментный анализ) и РИБТ (реакция иммобилизации бледных трепонем) для выявления антител. 

4) Применяют также РПГА  с трепонемным эритроцитарным диагностикумом.

Специфическая профилактика отсутствует.

Вопрос 3. Возбудитель трихомоноза – Trichomonas vaginalis

Трихомоноз – антропонозная болезнь, вызываемая мочеполовой трихомонадой (Trichomonas vaginalis), сопровождается поражением мочеполовой системы (уретрит, простатит, воспаление влагалища, шейки матки).

Морфологические признаки:

Trichomonas vaginalis – эукариотический организм, относится к классу простейших, подтипу жгутиконисцы. Имеет грушевидную форму, на переднем конце клетки расположены 4 жгутика и один соединен с клеткой ундулирующей мембраной. В цитоплазме расположены пищеварительные вакуоли, содержащие бактерии. Цист не образует. Спор и капсул не имеет.

Трихомонады – хорошо двигаются при помощи жгутиков и ундулирующей мембраны.