Вызываемые инфекции
При попадании В. anthracis на повреждённый кожный покров возникаюг некротизирующие отечные язвы и лимфаденопатия («болезнь скорняков»). При вдыхании спор сибирской язвы развивается молниеносная пневмония и септицемия («болезнь ткачей»). Вспышка заболевания в 2001 г., связанная со спланированным применением спор сибирской язвы, привела к тому, что в настоящее время возбудителя этой инфекции рассматривают в качестве биологического оружия
При этом споры быстро распространяют на заданной территории с целью заражения воздушнокапельным путем как можно большего количества людей. Диагностику проводят в лаборатории, оснащённой специальным оборудованием для хранения и культивирования этого опасного микроорганизма Для лечения сибирской язвы применяют пенициллин, фторхинолоны, эритромицин или тетрациклин В целях профилактики заболевания проводят вакцинацию домашнего скота, людей вакцинируют при высоком риске заражения, а таюке осуществляют спещалънуо обработку продукгов питания животного происхождения Лицам контактировавшим с заражёнными ЖИВОТНЫМИ и пациентами, проводят антибиотикопрофилактику Bacillus cereus Возбудитель обычно размножается в зёрнах риса быстрого приготовления (сырой рис часто бывает обсеменён Baci11us cerews, споры которого устойчивы к нагреванию) и других зараженных продуктах, вызывая саморазрешающееся пищевое отравление. Bacillus cereus вырабатываег термостабильный токсин. Через 6 ч после заражения возникает рвота, а затем — диарея (через 18 ч).
Диагностика и профилактика Диагностика
Диагностика
сибирской язва у человека и животных
основывается на эпизоотологических,
эпидемиологических, клинических,
лабораторных и патологоанатомических
данных
Лабораторные
исследования направлены на обнаружение
и идентификацию возбудителя сибирской
язвы, выявление специфических антител
и аллергической перестройки в организме
людей Исследование на сибирскую язву
включает: • высевы на питательные среды,
микроскопию мазков из исходного
материала, • постановку основных и
дополнительных методов идентификации,
• использование МФА для антигенов и
антител к ним, • постановку ГГЦР •
проведение биопробы, • применение
реакции преципитации.
У
человека и свиней, в случае невозможности
установить диагноз вышеперечисленными
методами, обязательна постановка
клинической кожно-аллергической пробы
с сибиреязвенным аллергеном. Порядок
забора, хранения, транспортирования и
выполнения лабораторных исследований
биологического материала от больных и
умерших людей, животных с подозрением
на сибирскую язву, а также материала из
объектов окружающей среды, подозрительного
на контаминацию возбудителем данного
заболевания определяются методическими
указаниями МУК 4.2.2413-08 «Лабораторная
диагностика и
о
бнаружение
возбудителя сибирской язвы» утвержденными
1.09.2008 г. Главным ГОСУДЩ)СТВеННЫМ санитарным
РФ 4.2.2413—08 «Лабораторная и обнаружение
возбудителя сибирской язвы» предназначены
для специалистов органов и организаций
Федеральной службы по надзору в сфере
защиты прав потребителей и благополучия
человека, ветеринарных учреждений
Россельхознадзора, других организаций
независимо от организационно-правовой
формы. Материал для исследования: от
больных или по;ДО3РИТеЛЬНЬТХ на заболевание
людеЙ — содержимое везикул, отделяемое
карбункула или язвы, фрагменты струпов,
мокрота, кровь, спинномозговая жидкость,
моча, испражнения, экссудаты; трупный
материал — кровь, экссудаты, кусочки
органов (селезенки, печени, лимфоузлов
и др.); материал от животных; продовольственное
сырье и продукты животного происхождения;
i объекты окружающей среды
— почва, трава, фураж, подстилка, вода
и т.д. Документы, регламентирующие работы
по забору, транспортированию, и подготовке
проб клинического и секционного материала
от людей и животных, из внешней среды:
• СП 1.3.1285-03 «Безопасность работы с
микроорганизмами Т-11 групп патогенности
(опасности); • СП 1.2.036-95 «Порядок учета,
хранения, передачи и транспортирования
микроорганизмов 1-V групп
патогенности» ; • МУ 1.3. 2569 -09 «Организация
работы лабораторий, использующих методы
амплификации нуклеиновых кислот при
работе с материалом, содержащим
микроорганизмы — групп патогенности».
Забор материала от животных Г Для
бактериологического исследования: 1. в
случае падежа животного с подозрением
на сибирскую язву — ухо и мазок из
надреза: 2. если подозрение возникло во
время вскрытия, то манипуляции по
вскрытию прекращают и на исследование
направляют кровь, кусочки органов
(селезенки, печени, лимфоузлов), костный
мозг. У трупов свиней — заглоточные
лимфоузлы; 3. у больных животных — кровь
из яремной вены, или из вены уха, хвоста
Забор материала от животных П. Для
исследования методом ГГЦР
микропробы
тканей массой 0,1-1 г от больных животных
или трупов помещают в пластиковые
пробирки с завинчивающимися крышками
объемом 1 5-1 7 мл с 0 9 % раствором NCl
или транспортной средой. Забор материала
от человека Для бактериологического
исследования (производится до начала
специфического лечения) : 1
При
кожной форме — содержимое везикулы,
отделяемое язвы, отторгаемые струпы;
2. При всех клинических формах кровь; З.
При висцеральных формах и менингите
спинномозговую
жидкость мокроту, испражнения; 4. При
подозрении на ингаляционный способ
заражения — мазки из полости носа Забор
материала от человека Для исследования
методом ПЦР: Забор проб осуществляется
в пластиковые пробирки однократного
применения 1. Кровь в 6 % раствор ЭДТА
1:20; 2. Содержимое везикул, отделяемое
карбункулов, фрагменты струпов в пробирки
с 0,1-0,2 мл транспортной среды; З
Спинномозговую
жидкость в количестве 0,5 мл в стерильную
пробирку; 4. Мазки из полости носа берут
сухим тампоном и помещают в пробирку с
транспортной средой. Транспортирование
осуществляется при +2-8 ос Забор материала
из сырья животного происхождения и
объектов внешней среды проводится в
тех случаях, когда необходимо установить
источник инфекции или фактор передачи,
для выявления обсемененности спорами
возбудителя сибирской язвы отдельных
объектов, а также в целях обнаружения
микроба в местах старых скотомогильников
при проведении строительных, мелиоративных,
гидротехнических и других работ,
связанных с выемкой и перемещением
грунта. Забор материала из объектов
внешней среды Почва Почва. Отбор проб
почвы проводят в соответствии с
«Методическими рекомендациями по отбору
проб почвы для бактериологического
исследования на наличие возбудителя
сибирской язвы и актиномицетов-антагонистов»
(М 1984 г.) • пробы с мест вероятного
обсеменения (мест вынужденного убоя
или падежа скота, стоянок и водопоя
животных берут с глубины 15 см
200
г. • На территории старых скотомогильников
— до глубины 2 м через каждые 25 см
200
г. Забор проводят по углам и центру
квадратов 4х4 м. Забор материала из
объектов внешней среды Почва 1. Каждую
пробу почвы весом 100-200 г помещают мешочки
из плотной ткани с завязками или
широкогорлую лабораторную посуду,
которую сверху завязываЮТ такой же
тканью для предотвращения размножения
актиномицетов. 2
вынутую
из глубины почву смешивают с сухой
хлорной известью (25 % активного хлора)
в соотношении 1•.3. слегка увлажняют и
сбрасывают в шурф. Инструменты обжигают
огнем паяльноЙ лампы. Забор материала
из объектов внешней среды Вода 1. Пробы
воды во всех водоемах берут у поверхности
(на глубине10-15 см) и у дна при помощи
бутирометра
Объем
каждой пробы не менее 0,5 л, общиЙ объем
проб — не менее Тл. 2. Кроме того берут
пробы придонного осадка, который
исследуот, как почву. Забор материала
из объектов внешней среды Корма
Концентрированные корма (зерно, отруби,
комбикорм) незатаренные отбирают из
расчета 1 проба не менее 400 г на 4 мг
поверхности, но не менее 5 проб от каждого
закрома, партии из различных слоев
корма. Затаренные корма отбирают от
упаковочноЙ единицы. • Пробы грубых
кормов (сено, СОЛОМа) из разных мест
СКИРДЫ из расчета 1 проба (40 г) на 4 мг
площади сырды • Зеленио массу отбирают,
как грубые корма Забор материала из
объектов внешней среды Корма • Корнеплоды
отбирают из расчета 1-3 шт. на 4 м: площади
бурта, отсека. Скальпелем срезают
поверхностный слой в скопления земли,
КОТОРЫЙ и используют для исследования.
В лабораторию направляют среднюю пробу,
которую составляют из хорошо перемешанных
первичных проб данной партии, емкости
и т.д. Масса средней пробы должна быть
не менее 500 г. Забор материала из объектов
внешней среды Воздух Пробы воздуха
отбирают с помощью специальных приборов,
снабженных собирающей жидкостью или
фильтрами. Объем исследуемого воздулха
должен быть не менее 3-5 мз Забор материала
из объектов внешней среды. Для исследования
методом ПЦР Отбирают пробы из объектов
внешней среды, пищевых продуктов,(мясо
и продукты животного происхождения),
сухих и сочных кормов, подстилки, шкур,
шерсти, почвы, воды, смывов с поверхностей.
Отбор проб осуществляется так же, как
и для бактериологического исследования.
Порядок
и объем работ по лабораторной диагностике
сибирской язвы в различных учреждениях.
В лечебных учреждениях, куда поступает
больной с подозрением на сибирскую
язву, производится забор материала,
котрьгЙ направляется в лаборатории
осбо опасных инфекций Ценлров гигиены
и эпидемиологии, в противочумные
учреждения В лечебных учреждениях
больным с подозрением на сибирс»то язву
таюке производят постановку кожной
илергической пробы с антраксино№
Порядок и объем работ по лабораторной
диагностике сибирской язвы в различных
учреждениях В лабораториях особо
опасньгх инфекций Центров гигиены и
эпидемиологии, в пгхпивочумньх учреждениях
проводят специфическуо индикащтю,
выделение культур и их идентификацию
основными методами, используя при
наличии возможностей дополнительные
методы. Материал от животных (трупов)
исследуют всеми мегодами в ветеринарных
лабораториях, специализированных
центрах и ветеринарных НИИ Порядок и
объем работ по лабораторной диагностике
сибирской язвы в различных учреждениях
• Выделенные в лабораториях учреждений
Федеральной службы по надзору в сфере
защиты прав потребителей и благополучия
человека куль»ры В. anthrac1s
после идентификацищ вместе с паспортами
направляют в вышестоящие учреждения в
соответствии с установленным действующими
документами порядком. • Культуры,
выделенные в учреждениях ветеринарного
профштя, направляются для окончательной
идентификации во Всероссийский научно
исследовательский институт ветеринарной
вирусологии и микробиологии (г. Покров).
Алгоритмы
действий получателей материала, в
котором предполагается наличие порошкщ
содержащего споры возбудителя сибирской
язвы и других патогенных биологических
агентов (ПОдозрилельных почтовых
отправлений), а таюке специалистов,
участвующих в проведении ПРОтивоэпидемических
мероприятий и лабораторных исследований,
определены методическими Реп»мендациями
МР 0100/0556-04-34 «Взаимодействие органов
управления, учреждений и лециализированных
формирований при ликвидации последствий
террористических актов с ПРименением
патогенных биологических агентов и
опасных хиштческих веществ». Подгтовка
проб к исследованию бактериологическим
методом Пробы и тканей • Кусочки проб
мяса,
ОРјцнов и тканей от трупов помещают в служу, измельчают ножницами, растирают песмком, заливают 0,9 % раствором NaCl в соошошении 1:10. Суспензию через марлевый тампон
отсасывают
пипеткой или шприцом в стерильную
посуду. Подготовка проб к исследованию
бактериолоГИЧХКИМ методом Вода • Воду
с илистыми частицами фильтруют через
3 слоя стерильной марли, а при их отсутствии
исследуют без предварилрльной подготовки
• С целью концентрирования воду фильтруют
через фильтры № 3 или центрифугируют
при 6000 об мин в течение 15 мин Осадок с
фильтра или после центрифугирования
ресуспендируот в 1-2 мл 0 9 % раствора NaCl
и используют для исследования, Подготовка
проб к исследованию бак-крриологшеСКИМ
методом Пробы почвы • Освобождают от
корней растений, камней, тщательно
перемешивают. От каждой пробы берут
90-100 г почвы, помещают в колбу, и заливают
стерильным 0 9 0 о раствором NaCl
или 5 % раствором пирофосфата натрия из
расчета получения 15-20 мл суспензии Колбу
закрывают, тщательно встряхивают в
течение 5-10 мин, отстаивают 35 Обирают
надосадочнуо жидкость для исследования
Подготовка проб к исследованию
бактериологическим методом Пробы
порошкообразных веществ • Порошкообртзные
вешества, в том числе пищевые продукты
и корма, обрабатывают аналогично почве,
используя в дальнейшем надосцочнуто
жидкость или раствор при растворении
вещества Подготовка проб к исследованию
бактериологическим методом Пробы шкур
Кусочки шкур массой г помещают в
фарфоровую стужу и заливают СТЕРИЛЬНЫМ
09 раствором NaCl
в соотношении 1:10. Измельчают ножницами
и ославляют на 2-3 часа для размягчения.
Тщательно растирают пестиком, отбирают
жидкость для исследования Подготовка
проб к исследованию бактериологическим
методом Пробы шерсти • От каждой пробы
шерсти отбирают наиболее загрязненные
части, измельчают ножницами и вместе с
пылью помещают в колбу и заливают
стерильным 0,9 % раствором NaCl
Колбу
закрывают, тщательно встряхивают в
течение 10-15 мин. Для освобождения от
грубых частиц пробу фильтруют через
2-3 слоя марли. Подготовка проб к
исследованию бактериологическим методом
i
Для избавления от посторонней микрофлоры,
подготовленные по выше описанной
процедуре пробы из объектов внешней
среды, шерсти и кожи, пищевых продуктов
делят на 2 част, одну из КОТОРЫХ подвергат
термической обработке на водяной бане
при 80 ос
в тече[--ме 20 мин. Пробы от больного
человека и животного, из патологического
материала и мяса животных, где возбудитель
нахощгся в вегетативной форме не
прогревают
Подготовка
проб к исследованию методом ГТЦР •
Сыворотку получают обычным способом,
• Микроаугоптаты, сыворотка крови,
содержимое везикул, отделяемое язв,
мазки из полости носа и спинномозговая
жидкость предварительной обработки не
требуют. • Другие виды материала
обрабатывают так же, как и для
бактериологического исследования,
отбирают отдельным наконечником с
аэрозольным фильтром пробу в количестве
0,1-0,5 мл в пластиковую пробирку объемом
1,5 мл. Проведение исследования делится
на два этапа: 1. Обнаружение возбудителя
или его КОМПОНеНТВ (ДНК, антигенов) в
организме бОЛЬНЫХ людей, животных,
секционном материале или объектах
окружающей среды, с которыми имели
контакт заболевшие и которые могли быть
источником инфицирования. 2. Выделение
и идентификации чистой культуры
возбудителя с последующим изучением
ее свойств Схема исследования наличие
возбудителя сибирской язвы.
