21)Фазово-контрастная микроскопия.

Позволяет изучать живые и неокрашенные объекты за счет повышения их контрастности. При прохождении света через окрашенные объекты происходит изменение амплитуды световой волны, а при прохождении через неокрашенные – фазы световой волны, что используют для получения высококонтрастного изображения в фазово-контрастной микроскопии. Для повышения контрастности фазовые кольца покрывают металлом, поглощающим прямой свет, не влияя на сдвиг фазы. В оптической системе микроскопа применяют специальный конденсор с револьвером диафрагм и центрирующим устройством, объективы заменяют на фазово-контрастные объективы-апохроматы.

22)Иммерсионная световая микроскопия.

Ее преимущество перед сухими объективами состоит в том, что между стеклом и линзой устанавливается однородная среда (стекло препарата - масло - стекло объектива) с одинаковым показателем преломления. Все лучи, не преломляясь и не изменяя своего направления попадают в объектив, чем и достигается наилучшее освещение мельчайших объектов. Для этого обычно пользуются кедровым маслом, показатель преломления которого примерно равен показателю преломления стекла при этом капля масла помещается на стекло препарата и на него помещается иммерсионный объектив.

Правила работы с иммерсионным объективом:

1)Микроскоп с поднятым до упора вверх конденсором установить к источнику света, плоским зеркалом направить луч света в сторону конденсора так, чтобы в его верхней линзе появилось изображение источника света.

2)Глядя в окуляр при малом увеличении установить максимальную освещенность в поле зрения. Поместить препарат с каплей инверсионного масла на предметный столик, револьвер перенести на иммерсионный объектив.

3)Глядя сбоку, макровинтом опустить объектив до соприкосновения с каплей масла.

4) Глядя в окуляр, макровинтом осторожно установить нечеткое, а микровинтом четкое изображение объекта, провести микроскопию.

5)После микроскопии макровинтом поднятьтубус, препарат удалить, а иммерсионный объект очистить от масла.

23)Ферменты вирусов.

В отличие от прокариот и клеток всех других

организмов, вирусы лишены ферментов, участвующих в многочисленных

метаболических реакциях. Однако многие вирусы содержат

в составе капсидов одну или две группы ферментов. К первой

относятся ферменты репликации и транскрипции, ко второй — ферменты,

участвующие в проникновении вирусной нуклеиновой кислоты

в клетку хозяина и выходе образовавшихся вирионов (нейрамини-

даза, лизоцим, АТФ-аза).

Ферменты вирусов подразделяют на в и р и о н н ы е

и в и р у с и н д у ц и р о в а н н ы е . К первым относят ферменты

транскрипции и репликации (ДНК- и РНК-полимеразы), обнаруженные

у многих вирусов, обратная транскриптаза ретровирусов, а

также эндо- и экзонуклеазы, АТФ-аза, нейраминидаза отдельных вирусов.

Вирусиндуцированными считаются те ферменты, структура которых

закодирована в вирусном геноме. Прежде всего это относится к

РНК-полимеразам пикорна-, тога-, орто- и парамиксовирусам, а также

ДНК-полимеразе покс- и герпесвирусов.

Наряду с собственными вирусы используют клеточные ферменты,

которые не являются вирусспецифическими. Однако их активность

может модифицироваться в процессе репродукции вируса.