- •Методические указания для студентов к практическому занятию
- •Санитарная микробиология пищевых продуктов, санитарный контроль бактерионосительства у персонала пищеблоков. Микробиология холеры и галофилезов»
- •Владивосток – 2013 г.
- •2. Мотивация изучения темы.
- •3. Цели занятия.
- •4.2. Задания для срс во внеучебное время
- •Методические указания по выполнению практической работы с полным регламентом протокола занятия и его оформлением
- •4. Задания для самостоятельной подготовки к практическому занятию:
- •4.1. Перечень контрольных вопросов для самоконтроля знаний.
- •I раздел:
- •II раздел:
- •5.3. Задания для самоконтроля подготовки к практическому занятию.
- •6. Этапы проведения практического занятия.
- •7. Ориентировочная основа действия (оод) для проведения самостоятельной работы студентов в учебное время (курация, выполнение лабораторной работы и т.Д.).
- •9. Учебно-материальное обеспечение:
- •9.1 . Литература:
- •9.2. Базы данных, информационно-справочные и поисковые системы:
- •Методы исследования пищевых токсикоинфекций:
- •Внутрибольничный сальмонеллез
- •Бактериологическое исследование
- •2. Микроскопия (1, 2 делают для того, чтобы убедиться в чистоте культуры)
- •Методы дополнительного тестирования и диагностики
- •Материал исследования
- •Микробиологическая индикация ботулизма у больных и пищевых объектах:
- •Токсинообразование у бацилл ботулизма:
- •Сальмонеллезных токсикоинфекций
- •Сальмонеллезов
- •Объекты и материал для диагностики
- •Мероприятия, направленные на предупреждение заноса инфекции в стационары и возникновение госпитальных сальмонеллезов:
- •Классификация семейства Vibrionaceae
- •Основные дифференциальные признаки возбудителей холеры
- •Развернутая дифференциальная характеристика холерных 01 и основных видов холерных не 01 вибрионов
- •Бактериологического исследования (начальный этап) Материал
- •1.Рвотные массы 4.Кровь 6.Отделяемое ран
- •2.Промывные воды желудка (дефибриниров.)
- •3.Испражнения 5.Спинномозговая жидкость
- •Ускоренный метод диагностики холеры
- •I этап:
- •Экспресс-методы диагностики вибрионов
- •Особенности иммунолюминисцентной диагностики холеры – риф и рниф
- •Питательные среды
- •Жидкие среды обогащения:
- •Плотные среды:
- •Консервирующие среды:
- •Фаготипирование холерными диагностическими бактериофагами хдф холерных вибрионов Эль-Тор с одновременной дифференциацией их патогенности
- •Фаготипирование энтеротоксигенных неагглютинирующих вибрионов (наг) не 01 группы типовыми бактериями тэпв к энтеропатогенным вибрионам
- •Характеристика генетической основы патогенности
- •Галофильные вибрионы
- •Основные свойства некоторых морских галофильных и не галофильных вибрионов, патогенных для человека
Фаготипирование энтеротоксигенных неагглютинирующих вибрионов (наг) не 01 группы типовыми бактериями тэпв к энтеропатогенным вибрионам
Фаготипы вибрионов НАГ |
Типирующие фаги |
||||||
ТЭПВ - 1 |
ТЭПВ - 2 |
ТЭПВ - 3 |
ТЭПВ - 4 |
ТЭПВ - 5 |
ТЭПВ - 6 |
ТЭПВ - 7 |
|
1 |
+ |
|
|
|
|
|
|
2 |
|
+ |
|
|
|
|
|
3 |
|
|
+ |
|
|
|
|
4 |
|
|
|
+ |
|
|
|
5 |
|
|
|
|
+ |
|
|
6 |
|
|
|
|
|
+ |
|
7 |
|
|
|
|
|
|
+ |
Примечание: ТЭПВ – типовые фаги к энтеропатогенным вибрионам НАГ. Типируют методом агаровых слоев.
Методика: испытуемую культуру засевают в пробирку с 4 мл МПБ, инкубируют при + 37о С в течение 3 часов. Затем 0,3 мл бульонной культуры вносят в пробирку с 4 мл. 0,7% расплавленного и остуженного до + 45оС МПА, перемешивают и выливают вторым тонким слоем в стерильную чашку с первым застывшим слоем 2% МПА, после этого на поверхность МПА петлей или каплей из пипетки наносят типовые бактериофаги в цельном виде, а при необходимости – в разведении от 10-1 до 10-4. Каплям фага дают подсохнуть, впитаться, после чего пробы помещают в термостат при +37оС на 4-18 часов. Контроль – физ.раствор.
Учет результатов ведут при наличии стерильных пятен в связи с лизисом чувствительных к фагу культур. В контроле и при нечувствительности культуры лизиса нет.
Ускоренный метод. Из подготовленной бульонной культуры делают штриховой высев на 8 секторов МПА, а сверху наносят бактериофаг. Режим инкубации и учет результатов те же.
Приложение №13
Характеристика генетической основы патогенности
Кассета генов патогенности в хромосоме холерных вибрионов 01 |
Реализация кассеты в тестах |
Vct+ ген патогенности |
- токсигенность Vct (in vitro, in vivo) |
TOX’T ген-код синтеза токсического белка |
- гемотоксин “Haem-tox 01” к бараньим эритроцитам |
CT+ синтез токсигена, реализует |
- патогенность для крольчат в |
TCP+ токсиноиндуцирующие пили |
изолированной клетке |
адгезии для CTXф |
- агглютинация куриных эритроцитов |
CTXф - переносчик Vct+ |
|
Кассета холерных свободно живущих вибрионов не 01 |
|
TOX R – передавемый код |
|
tep A – кодирует и реализует TCP с помощью восприимчивого организма. |
|
Приложение №14