Приготування основного розчину йоду

0,50 г йоду і 5,00 г йодистого калію розчиняють в бюксі з притертою кришкою в невеликій кількості води.

Вміст бюксу перемішують на магнітній мішалці при закритій кришці бюксу.

Розчин після повного розчинення йоду переносять в мірну колбу з притертою пробкою місткістю 200 см³ і об’єм доводять дистильованою водою до мітки.

Основний розчин йоду зберігають протягом 1 місяця у склянці із темного скла з притертою пробкою.

Приготування робочого розчину йоду

2 см³ основного розчину йоду розводять розчином соляної кислоти концентрацією 0,1 моль/дм³ при аналізі препаратів бактеріального походження із передбаченою активністю більше 50 од./см³ в мірній колбі місткістю 100 см³.

Перед застосуванням робочого розчину перевіряють його оптичну густину в діапазоні довжин хвиль 434-450 нм в кюветах з товщиною поглинаючого світло шарі 10 мм.

Оптична густина робочого розчину йоду повинна дорівнювати 0,220 (±0,01).

У випадку відхилення від цього значення додають до розчину кілька крапель соляної кислоти або основного розчину йоду.

Приготування основного розчину очищених ферментних препаратів

0,1000-1,000 г дослідного препарату (в залежності від передбачуваної активності) розчиняють в невеликій кількості води, при необхідності старанно розтираючи скляною паличкою, кількісно переносять в мірну колбу місткістю 100 см³, доводять дистильованою водою до мітки і перемішують. Препарати з нерозчинними наповнювачами фільтрують. Розчин зберігають протягом доби при температурі від 2 до 6°С.

Приготування робочого розчину очищених ферментних препаратів

Робочий розчин готують у відповідності до таблиці 1 із основного розчину (для наважки 0,1000 г), розбавляючи його дистильованою водою таким чином, щоб в 5 см³ робочого розчину містилась маса ферменту, яка забезпечувала б в прийнятих умовах гідроліз крохмалю від 20 до 60 %.

Таблиця 1.

Амілолітична активність (АС), од./Г (передбачувана)	Маса препарату в 5 см3 робочого розчину (m1), мг	Об’єм основного розчину, необхідний для вторинного розбавлення, см3	Загальний об’єм розбавленого розчину, см3
Від 20 до 80 включно	5,0	50,0	50,0
Від 80 до 150 включно	2,0	20,0	50,0
Від 150 до 300 включно	1,0	10,0	50,0
Від 300 до 700 включно	0,5	5,0	50,0
Від 700 до 1200 включно	0,25	10,0	200,0
Від 1200 до 2500 включно	0,125	5,0	200,0
Від 2500 до 5000 включно	0,05	2,0	200,0
Вище 5000	0,025	1,0	200,0

Робочий розчин ферментного препарату готують безпосередньо перед визначанням.

Приготування основного розчину із повітряно-сухої культури гриба

5,00 г досліджуваної повітряно-сухої культури гриба, попередньо розтертої в ступці, переносять в конічну колбу місткістю 250 см³, додають 90 см³ дистильованої води і 10 см³ ацетатного буферного розчину з рН 4,7. Суміш витримують протягом 1 год в термостаті при температурі (30,0±0,2)ºС, періодично перемішуючи і потім фільтрують. Фільтрат використовують в якості основного розчину.

Фільтрат зберігають протягом доби при температурі від 2 до 6ºС.