Ход работы

С поверхности сильноокрашенной синей луковицы сделать несколько срезов эпидермиса, состоящего из 1-2 слоев окрашенных клеток, содержащих антоциан. Поместить срезы по отдельности в капли воды на предметные стекла, закрыть покровными стеклами и рассмотреть в микроскоп. Клетки с окрашенным клеточным соком зарисовать; найти и рассмотреть устьица.

А. Определить начало и характер плазмолиза клетки под действием одинаковых концентраций биогенных и небиогенных солей. Для этого заменить воду в препаратах 5%-ным раствором CuSO₄ на одном предметном стекле и таким же раствором Pb(NO₃)₂ на другом. Эта замена производится способом 4-5-кратного накапывания раствора соли с одной стороны покровного стекла и отсасывания кусочком фильтровальной бумаги с другой до полной замены воды раствором соли. Оставить клетки в растворе соли на 15 минут, когда плазмолиз будет хорошо заметен, рассмотреть в микроскоп. Зарисовать и сделать выводы относительно действия солей биогенных и небиогенных тяжелых металлов на характер плазмолиза клетки.

Б. Выявить комплексное действие повышенной температуры и одной из наиболее токсичных солей. Для этого препараты, в которых вода заменена на раствор соли, выдерживают 10 мин на водяной бане при температуре 40°С, а потом рассматривают в микроскоп и зарисовывают. При этом часто наблюдается усиление плазмолиза и почернение содержимого некоторых клеток. Очевидно, соли свинца при реакции с сероводородными группами белков дают этот черный цвет.

Работа 5. Влияние солей тяжелых металлов на коагуляцию растительных и животных белков

Работа наглядно показывает действие солей биогенных и небиогенных тяжелых металлов на животные и растительные белки, выявляет разницу в реакции тех и других. Белки с тяжелыми металлами образуют комплексы, нерастворимые в воде.

Оборудование, реактивы, материалы: 1) пробирки - 16 шт.; 2) пузырьки из-под пенициллина - 8 шт.; стаканчик - 1 шт.; 4) пипетка на 1 мл - 1шт.; 5) пипетка аптечная- 2 шт.; 6) стеклограф; 7) фильтровальная бумага; 8) 5%-ный раствор сульфата меди, 9) 5%-ный раствор Pb(NO₃)₂ 10) дистиллированная вода; 11) животный белок (куриного яйца); 12) растительный белок (зернового гороха).

Ход работы

Приготавливают серию растворов сульфата меди, нитрата свинца, хлорида кадмия, сульфата цинка из исходного раствора с концентрацией 0,5 М методом последовательных разбавлений: 0,1 М, 0,03 М, 0,01 М, 0,003 М, 0,001 М, 0,0003 М, 0,0001 М, 0,00003 М. Каждый студент вносит в 8 пробирок пипеткой по 1 мл животного белка, а в другие 8 - по 1 мл растительного белка. В каждую пробирку добавляют по 1 мл одного из указанных растворов испытуемой соли. Все пробирки помечают стеклографом. Затем по наклонной стенке осторожно вливают в пробирки по 1 мл этилового или пропилового спирта. Осторожно покачивают пробирки, чтобы верхняя часть растворов перемешалась. На границе слоев растворов белка и спирта в некоторых пробирках образуется муть или осадок. Характер коагуляции рассматривают на темном фоне (кусочек черной бумаги, доска и др.).

Результаты оформляют в виде таблицы.

Определяют концентрацию раствора соли, при которой происходит коагуляция белка (при разном виде солей и при различном типе белков).

Ответить на следующие вопросы.

1. На какой из видов белков (животный или растительный) сильнее всего действуют выбранные соли?

2. Какова предельная действующая концентрация выбранных солей?

Приготовление растворов белков

А. У куриного яйца отделить белок в мерный стаканчик, размешать его стеклянной палочкой в дистиллированной воде в соотношении 1:10. Затем профильтровать.

Б. Зерновой вызревший горох перемолоть в муку в кофемолке, развести в соотношении: 10 г гороховой муки на 50 мл 10%-ного раствора NaCl или KCl. Профильтровать.

4. МЕТОДЫ НЕЙТРАЛИЗАЦИИ

ДЕЙСТВИЯ ТОКСИКАНТОВ

Основные и дополнительные факторы, определяющие развиие отравлений

В случае, когда токсикант достиг рецепторов токсичности в достаточно большой дозе и в течение короткого времени, возникает токсический эффект. Он зависит от многих факторов, как обусловленных внешними условиями, так и присущих самому организму. В табл.6 приведены эти основные факторы.

Таблица 6

Факторы, определяющие развитие отравлений (по Е.А.Лужникову)

Основные факторы, относящиеся к ядам	Физико-химические свойства; токсическая доза и концентрация в биосредах, особенности распределения в биосредах; характер связи с рецепторами токсичности; степень химической чистоты и наличие примесей; устойчивость и характер изменений при хранении
Дополнительные факторы, относящиеся к конкретной «токсической ситуации»	Способ, вид и скорость поступления в организм; возможность к кумуляции и привыкание к ядам; совместное действие с другими токсическими веществами и лекарствами
Основные факторы, характеризующие пострадавшего	Видовая чувствительность; влияние массы тела, питания и физической нагрузки; половая принадлежность; возрастные особенности; индивидуальная вариабельность и наследственность; влияние биоритмов и пр.; возможность развития аллергии и токсикомании; общее состояние здоровья пострадавшего
Дополнительные факторы, влияющие на пострадавших	Температура и влажность окружающего воздуха; барометрическое давление; шум и вибрация; лучистая энергия и пр.

Из табл.6 видно, что токсическое действие зависит от целого ряда факторов и условий. В первую очередь, это свойства токсиканта, которые определяют его поведение во внешней среде и в организме. Насколько быстро яд поступает в организм зависит и от его действующей концентрации. В то же время свойства самого организма корректируют действие токсиканта. В свою очередь, внешняя среда может эти свойства организма значительно изменять.