3.2 Результаты и их обсуждения

С

Оптическая плотность, у.е.

помощью полученных спектров удалось идентифицировать хлорофилл и флавоноид в настойках травы пустырника (рисунок 3.4).

1

2

Длина волны, нм

330

490

650

1 – трава пустырника; 2 – лабораторная настойка травы пустырника

Рисунок 3.4 – Спектры поглощения травы пустырника и лабораторной настойки травы пустырника

В таблице 3.1 представлены результаты спектрофотометрических исследований.

Таблица 3.1 – Результаты спектрофотометрических исследований

Экстракт травы пустырника		Лабораторная настойка травы пустырника
длина волны, нм	идентифицируемое вещество	длина волны, нм	идентифицируемое вещество
333,6	Флавоноид	328,6	флавоноид
578,3	Хлорофилл	575,6	хлорофилл
666,1	хлорофилл	666,1	хлорофилл

Анализ спектров показал, что в составе пустырника присутствуют такие соединения как хлорофилл (длина волны в диапазоне 575-670 нм), флавоноиды (длина волны в диапазоне 325-335 нм).

3.2.1 Количественное определение суммы флавоноидов и сухого остатка

Полученные результаты исследования представлены в таблице 3.2.

Таблица 3.2 – Результаты количественного определения суммарного содержания флавоноидов в траве пустырника, экстракте и настойке травы пустырника

Объект исследования	Содержание флавоноидов, %	Сухой остаток, г/л
Трава пустырника	0,89±0,2	-
Лабораторная настойка травы пустырника	±0,2	846,7±0,5
Настойка травы пустырника	0,50±0,2	882,3±0,5

3.2.2 Хроматографирование флавоноидов

Н

Оптическая плотность (D₃₄₀), у.е

а рисунке 3.5 представлен график зависимости объема элюата от оптической плотности при разделении на гель-хроматографической колонке лабораторной настойки травы пустырника.

Объем элюата, мл

1

2

3

Рисунок 3.5 – Зависимость объема элюата от оптической плотности при разделении на гель-хроматографической колонке

Из графика видно 3 хроматографических пика. Это свидетельствует о том, что произошло разделение лабораторной настойки травы пустырника на фракции в результате пропускания его через гель-хроматографическую колонку.

Результаты хроматографического разделения флавоноидов настойки травы пустырника и лабораторной настойки травы пустырника методом ТСХ в системах растворителей н-бутанол – уксусная кислота – вода (2,6 : 1,4 : 0,3), изопропиловый спирт – уксусная кислота – вода (2,0 : 0,5 : 2,5) представлены в таблице 3.3.

Таблица 3.3 – Результаты ТСХ настоек травы пустырника

№ пятна	Rf	Окраска пятен в видимом свете	Окраска пятна в УФ-свете до обработки реактивом	Флюоресценция после обработки 5 % спиртовым раствором алюминия хлорида	Заключение
Пластинка типа 25 TLC aluminium sheets
настойка травы пустырника
1	0,25	желтая	красная	красная
2	0,59	желтая	красная	красная
экстракт травы пустырника
1	0,25	желтая	красная	красная
2	0,53	желтая	красная	красная
Пластинка типа СТХ-1А
настойка травы пустырника
1	0,61	желтая	красная	красная
экстракт травы пустырника
1	0,84	желтая	красная	красная

По данным ТСХ видно, что на хроматограмме флавоноидов отмечается наличие 2 пятен на пластинке типа 25 TLC aluminium sheets (Mercx, Германия) и 1 пятна на пластинке типа СТХ-1А (ЗАО Сорбполимер, г. Краснодар), имеющих красное окрашивание в УФ-свете и красную флюоресценцию после обработки 5 % спиртовым раствором алюминия хлорида, что характерно для …

С помощью микроскопа (MBL2000-Serie Multipurpose microscope, Германия) получили микрофотографии осадка лабораторной настойки травы пустырника (рисунок 3.6) и технологического отхода, образовавшегося при производстве настойки травы пустырника (рисунок 3.7).

Рисунок 3.6 – Микрофотография лабораторной настойки травы пустырника (увеличение×4)

а

б

в

г

д

е

а, б – увеличение × 4; в, г, д – увеличение × 40; е – увеличение × 100

Рисунок 3.7 – Микрофотография технологического отхода, образовавшегося при производстве настойки травы пустырника

С помощью программы Autoscan Colonies (Bioscan) (ЗАО «Спектроско-пические системы», Республика Беларусь) произвели обработку микрофотографий: выделение объектов, их подсчет и автоматическую классификацию по заданным параметрам (Приложения 1, 2).