2.2.4. Биофармацевтические исследования по высвобождению глютаминовой кислоты из сиропа
Изучение высвобождения глютаминовой кислоты из сиропов проводили методом равновесного диализа через полупроницаемую мембрану по Крувчинскому [48,50].
Методика:
Прибор для диализа, предложенный Л. Крувчинским, состоит из химического стакана ёмкостью 300 мл, в который помещают 20 мл среды для диализа, и диализной трубки с внутренним диаметром 32 мм и высотой 150 мм. На нижний конец трубки плотно фиксируют полупроницаемую мембрану, в качестве которой нами был использован целлофан (ГОСТ 7730 - 89). На эту поверхность помещают навеску сиропа и трубку опускают в стакан с диализной средой на глубину 2 мм. Далее прибор помещают в термостат при температуре 37±1° С.
В качестве диализной среды была использована вода очищенная.
Отбор проб диализата (по 10 мл) проводили через определённые промежутки времени, восполняя их новой порцией (10 мл) диализной среды.
Определение количественного содержания глютаминовой кислоты в диализате проводили методом спектрофотометрии.
Оптическую плотность комплекса глютаминовой кислоты с 0,2% водным раствором нингидрина измеряли при длине волны 400 нм на спектрофотометре в кюветах с толщиной поглощающего слоя 10 мм.
Количество высвободившейся и содержащейся в диализате глютаминовой кислоты в граммах (Х) рассчитывали по формуле:
где
Dx – оптическая плотность продукта реакции 0,1 % раствора глютаминовой кислоты, приготовленного из сиропа, с 0,2 % водным раствором нингидрина;
а – масса глютаминовой кислоты в навеске (г);
VД – объём диализной среды (мл);
Do – оптическая плотность продукта реакции 0,1 % раствора стандартного образца глицина с 0,2 % водным раствором нингидрина;
q – объём диализата, взятый для анализа (мл).
Степень высвобождения глютаминовой кислоты рассчитывали с учётом разведения раствора и предыдущего отбора проб. Полученные результаты выражали в процентах от содержания ЛВ в навеске изучаемого сиропа.
2.2.5. Определение стабильности сиропов в условиях ускоренного старения
Определение стабильности разработанных сиропов проводили согласно «Инструкции по проведению работ с целью определения сроков годности лекарственных средств на основе ускоренного старения при повышенной температуре» [26].
Методика:
Образцы сиропов в количестве 100 мл хранились в банках оранжевого стекла в термостате при температуре 60° С. Стабильность оценивали по следующим показателям: органолептические свойства, подлинность, вязкость, рН, количественное определение действующего вещества.
Определение рН проводили на рН-метре Metrohm (Швейцария).
Подлинность глютаминовой кислоты определяли по методике ГФ XII издания (ФС 42-0229-07).
3. Экспериментальная часть
3.1. Изучение ассортимента сиропов как лекарственной формы
В обзоре литературы показана перспективность использования ноотропных ЛС в жидких корригированных ЛФ, которые, обладая рядом положительных свойств, могут применяться в педиатрической практике. При этом особое внимание уделяется глютаминовой кислоте – оригинальному лекарственному средству ноотропного действия с выраженным нейрометаболическим, антигипоксическом и противосудорожным действием.
Количество лекарственных средств в виде сиропов по данным Государственного Реестра Лекарственных Средств равняется 152 торговым наименованиям, что составляет чуть более 1% от общего количества зарегистрированных лекарственных препаратов. К тому же из ноотропных средств, к которым относится глютаминовая кислота, фармацевтический рынок сиропов представлен лишь одним наименованием – сироп пантогама 10% [15]. Таким образом, разработка сиропа кислоты глютаминовой является актуальной и позволит расширить номенклатуру сиропов.