Імуноблот (Western Blot) на віл та його інтерпретація

Адаптовано із Харісона 17 видання та

J. Hopkins. Medical management of HIV infection. – 2007.

Інтерпретація результатів
Негативний блот	Маркери відсутні
Позитивний блот	Присутні маркери до двох з приведених трьох білків (протеїнів) – gp120/160, gp41 або р24. (це продукти трьох основних генів ВІЛ – gag, pol, env).
Сумнівний блот	Інше поєднання маркерів. Зустрічається при сероконверсії, при аутоімунних захворюваннях, при ВІЛ-2-інфекції. Зазвичай перехресна реакція аутоімунних антитіл з маркерами р24 та/або р55.
Хибно-позитивний імуноблотинг	Дуже рідко. Відсутність маркера р31 у 50% свідчить про хибно-позитивний імуноблотинг.

Практична робота 3. Ознайомлення з програмованим термостатом, який використовується для проведення ПЛР.

Схема ПЛР.

1.Виділення днк

2.Ампліфікація

Температурний цикл

Час

Число копій фрагментів ДНК

3. Детекція у агарозному гелі

Позитивні зразки

Негативні зразки

Кількість циклів

Негативний контроль

Позитивний контроль

Практична робота 4. Оцінка результатів вивчення імунного статусу особи з підозрою на СНІД (демонстрація ).

Імунологічні показники	Показник		Норма
	1 обстеження	2 обстеження
Абсолютна кількість лейкоцитів (г/л)			4 – 8
Абсолютна кількість лімфоцитів (г/л)			800 – 3600
% лимфоцитів			19 – 37
Т-лімфоцити
- абс.			600 – 1600
- %			40 – 60
Т-хелпери
- абс.			400 – 1500
- %			30 – 40
Т-супресори/цитотоксичні
- абс.			120 – 450
- %			10 – 19
ІРІ (Т-хелпери/Т-супресори)			2,2 – 3,2
В-лімфоцити
- абс.			300 – 450
- %			15 – 30
Імунолглобуліни (г/л)
- G			7 – 20
- A			0,7 – 5,0
- M			0,5 – 2,0
Імунні комплекси			0,04 – 0,09 опт.щільн.
Фагоцитарний індекс			40 – 70
Фагоцитарне число			2 – 8

Висновок: ________________________________________________________________

________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Практична робота 5. Препарати, що використовують для лікування ВІЛ-інфекції.

Назва препарату	Склад	Показання для використання
А2Т - азидотимідин (зідовудін)
ddC (залцитабін), ddJ (діданозин)
Рітонавір

Практична робота 5. Мікроскопування препаратів «Збудники опортуністичних інфекцій» (демонстрація ).

M ycobacterium avium, фарбування за Грамом

Характеристика:

C andida spp., фарбування за Грамом

Характеристика:

S taphylococcus aureus, фарбування за Грамом

Характеристика:

Pneumocystis carinii, фарбування за Романовським-Гімзе

Характеристика:

Підпис чергового студента ____________

Підпис викладача _____________________

Практичне заняття ДАТА _______________

Тема: «Лабораторна діагностика арбовірусних та робовірусних інфекцій (жовтої лихоманки, лихоманки Денге, кліщового енцефаліту, лихоманки Крим-Конго та лихоманки з нирковим синдромом)».

Питання для підготовки

1. Загальна характеристика, класифікація та ареал арбовірусів.

2. Загальна характеристика вірусів Родини Flaviviridae.

3. Збудник весняно-літнього кліщового енцефаліту: особливості морфології збудника, патогенезу захворювання, лабораторної діагностики, профілактики та лікування захворювання.

4. Збудники міської та джунглевої жовтої гарячки: особливості морфології збудника, патогенезу захворювання, лабораторної діагностики, профілактики та лікування захворювання.

5. Збудник гарячки Денге: особливості морфології збудника, патогенезу захворювання, лабораторної діагностики, профілактики та лікування захворювання.

6. Загальна характеристика вірусів Родини Bunyaviridae.

7. Збудник геморагічної гарячки Крим-Конго: особливості морфології збудника, патогенезу захворювання, лабораторної діагностики, профілактики та лікування захворювання.

8. Збудник геморагічної гарячки з нирковим синдромом: особливості морфології збудника, патогенезу захворювання, лабораторної діагностики, профілактики та лікування захворювання.